Antikörper und Studieren von Antigen-/Virus-Interaktionen Unter Verwendung der Dynamischen Lichtstreuungs-Techniken Von Malvern-Instrumenten

Themen Umfaßt

Hintergrund
     Antigene und Antikörper
     Dynamische Lichtstreuung für Messende Teilchengröße
     Beschäftigen Teilchen und Verdünnte Konzentrationen
Fallstudie - Interaktionen Zwischen Antikörpern und einem Virus
     Experimentelle Prozedur
     Ergebnisse
Schlussfolgerungen

Hintergrund

Antigene und Antikörper

Antikörper (Ab) sind die Proteine, die durch das Gehäuse in Erwiderung auf die Anwesenheit eines Fremdkörpers produziert werden. Antigene (Ag) sind fremde Mittel, die die Produktion von Antikörpern anstiften. Sie treten möglicherweise frei in gelöster Form auf, oder sie werden zur Oberfläche von Zellen oder von Partikeln wie Viren oder Bakterien gesprungen möglicherweise. Ein Antikörper, der in Erwiderung auf einen Fremdkörper produziert wird, reagiert mit dem Antigen, um einen Immunkomplex (AB-AG) zu bilden und wird deshalb inaktiviert.

Dynamische Lichtstreuung für Messende Teilchengröße

Die Dynamische Lichtstreuung (Photonwechselbeziehungsspektroskopie) ist eine Technik, die die Größe von Partikeln zu 1nm im Durchmesser unten messen kann. Partikel machen schwebend gelegentliche Brownische Bewegung durch. Wenn diese Partikel mit einem Laserstrahl geleuchtet werden, schwankt die Intensität des Streulichts mit einer Kinetik, die nach der Größe der Partikel abhängig ist. Analyse dieses Intensitätsfluktuierens erbringt die Geschwindigkeit der Brownischen Bewegung und folglich der Teilchengröße.

Beschäftigen Teilchen und Verdünnte Konzentrationen

Die Intensität des Streulichts erreicht von den Teilchen oder von den Proben, die sehr verdünnt sind, ist für wiederholbare PCS-Bearbeitenmaße unter Verwendung eines Standard-Er-Ne 10mW Lasers unzureichend.

Eine Methode der Überwindung solcher Probleme ist, einen Detektor der höheren Leistungsfähigkeit zu verwenden. Das Instrument Malvern Zetasizer HS enthält eine Lawinenphotodiode (APD).

Dieser Detektor erlaubt Maß von Teilchen und von Proben der niedrigen Konzentration ohne den Bedarf an einem leistungsfähigeren Laser.

Fallstudie - Interaktionen Zwischen Antikörpern und einem Virus

Diese Anwendungsanmerkung beschreibt dynamische Lichtstreuungsmaße, in denen die Affinität von zwei verschiedenen Antikörpern für eine Virusprobe studiert werden kann.

Experimentelle Prozedur

Die Maße wurden auf einem Malvern Zetasizer 3000HS bei einer Temperatur von 25°C. gemacht. Das Streulicht wurde schräg von 90° entdeckt.

Ergebnisse

Abbildung 1 Shows die IntensitätsKorngrößenverteilungen erreicht von 3 Wiederholungsmaßen einer Probe des Serums Antikörper enthalten. Die Verteilungen wurden von der Analyse der Daten mit dem CONTIN-Algorithmus erreicht. Die Verteilungen sind mit Höchstmodi an 32nm beziehungsweise monomodal. Die Affinität von zwei verschiedenen Antikörpern für ein Virus wurde bestimmt, indem man jede der Antikörperproben mit einer Probe des Virus mischte und schnelle Bearbeitenmaße machte (alle 30 Sekunden). Abbildung 2 zeigt die z-durchschnittlichen Durchmesser (den Mitteldurchmesser basiert auf der Intensität des Streulichts) erhalten für die Mischungen von 2 Antikörpern mit Viruspartikeln als Funktion der Laufzeit, nachdem sie gemischt hat. Die Zunahme des z-durchschnittlichen Durchmessers resultiert aus der Entstehung des Antikörpervirus Komplexes. Antikörper 1 zeigt höhere Affinität für das Virus, das durch die steilere Steigung der Kurve angezeigt wird.

Abbildung 1. IntensitätsKorngrößenverteilungen erreicht von 3 Wiederholungsmaßen einer Probe des Serums Antikörper enthalten.

Abbildung 2.A-Plan der z-durchschnittlichen Durchmesser von den Mischungen von 2 verschiedenen Antikörpern mit einem Virus als Funktion der Laufzeit nachdem dem Mischen.

Schlussfolgerungen

Photonwechselbeziehungsspektroskopie kann verwendet werden, um die Größe von Teilchen zu messen. Es ist eine nichtinvasive Technik, die verwendet werden kann, um die Affinität von verschiedenen Antikörpern für ein bestimmtes Virus einzuschätzen.

Quelle: Die Studie des Antikörpers: Antigen Interaktionen Unter Verwendung der Lichtstreuungs-Techniken“, Anwendungs-Anmerkung durch Malvern-Instrumente.

Zu mehr Information über diese Quelle besuchen Sie bitte Malvern Instruments Ltd (GROSSBRITANNIEN) oder Malvern-Instrumente (USA).

Date Added: May 3, 2005 | Updated: Jun 11, 2013

Last Update: 13. June 2013 01:25

Ask A Question

Do you have a question you'd like to ask regarding this article?

Leave your feedback
Submit