Los temas cubiertos
Fondo
Antígenos y anticuerpos
La dispersión de luz dinámica para medición del tamaño de partícula
Trata de pequeñas partículas y concentraciones diluidas
Estudio de caso - Interacciones entre los anticuerpos y virus
Procedimiento experimental
Resultados
Conclusiones
Fondo
Antígenos y anticuerpos
Anticuerpos (Ab) son proteínas producidas por el cuerpo en respuesta a la presencia de un cuerpo extraño. Antígenos (Ag) son compuestos extranjeros que instigan la producción de anticuerpos. Pueden ocurrir libre en solución o pueden ser unidos a la superficie de las células o partículas como virus o bacterias. Un anticuerpo producido en respuesta a un cuerpo extraño reacciona con el antígeno para formar un complejo inmune (Ab-Ag) y se inactiva por lo tanto.
La dispersión de luz dinámica para medición del tamaño de partícula
Dispersión de luz dinámica (fotones espectroscopia de correlación) es una técnica que puede medir el tamaño de las partículas de hasta 1 nm de diámetro. Partículas en suspensión se someten al azar el movimiento browniano. Si estas partículas se ilumina con un rayo láser, la intensidad de la luz dispersada oscila a una velocidad que depende del tamaño de las partículas. El análisis de estas fluctuaciones de la intensidad de los rendimientos de la velocidad del movimiento browniano y por lo tanto el tamaño de las partículas.
Trata de pequeñas partículas y concentraciones diluidas
La intensidad de la luz dispersada obtenidos a partir de pequeñas partículas o de las muestras que son muy diluidas será insuficiente para PCS repetir las mediciones con un tamaño estándar de 10 mW láser He-Ne.
Un método para superar estos problemas es utilizar un detector de mayor eficiencia. El Malvern Zetasizer instrumento SA contiene un fotodiodo de avalancha (APD).
Este detector permite la medición de las partículas pequeñas y las muestras de baja concentración, sin la necesidad de un láser más potente.
Estudio de caso - Interacciones entre los anticuerpos y virus
Esta nota de aplicación describe evaluación dinámica de dispersión de la luz en la que puede ser la afinidad de dos anticuerpos diferentes de una muestra de virus estudiados.
Procedimiento experimental
Las mediciones se realizaron en un Malvern Zetasizer 3000HS a una temperatura de 25 ° C. La luz dispersada se detectó en un ángulo de 90 °.
Resultados
La figura 1 muestra la distribución del tamaño de intensidad obtenidos de 3 mediciones repetidas de una muestra de suero que contiene anticuerpos. Las distribuciones se obtuvieron del análisis de los datos con el algoritmo CONTIN. Las distribuciones son monomodal con los modos de pico a 32 nm, respectivamente. La afinidad de dos anticuerpos diferentes de un virus se determinó mediante la mezcla de cada una de las muestras de anticuerpos con una muestra del virus y la toma rápida de medidas de tamaño (cada 30 segundos). La figura 2 muestra los diámetros de z de la media (el diámetro medio basado en la intensidad de la luz dispersada) obtenidos en las mezclas de dos anticuerpos con las partículas de virus en función del tiempo transcurrido después de la mezcla. El aumento en los resultados de diámetro z de la media de la formación del complejo anticuerpo-virus. Anticuerpos 1 muestra una mayor afinidad por el virus de la indicada por la pendiente más pronunciada de la curva.
Figura 1. Distribuciones de intensidad de tamaño obtenidos de 3 mediciones repetidas de una muestra de suero que contiene anticuerpos.
Figura 2. Un gráfico de los diámetros de z de la media a partir de mezclas de dos anticuerpos diferentes, con un virus como una función del tiempo transcurrido después de la mezcla.
Conclusiones
Espectroscopía de correlación de fotones se puede utilizar para medir el tamaño de las partículas pequeñas. Se trata de una técnica no invasiva que puede ser utilizado para evaluar la afinidad de los anticuerpos diferentes para un virus en particular.
Fuente: Estudio de anticuerpos: Las interacciones antígeno mediante técnicas de dispersión de luz ", la nota de aplicación de Malvern Instruments.
Para más información sobre esta fuente, por favor visite Malvern Instruments Ltd (Reino Unido) o Malvern Instruments (EE.UU.) .