Argomenti trattati
Fondo
Antigeni e anticorpi
Dinamico Light Scattering per Dimensione Particle Measuring
Trattare con particelle piccole e concentrazioni Diluire
Caso di studio - Interazioni fra gli anticorpi e un virus
Procedura sperimentale
Risultati
Conclusioni
Fondo
Antigeni e anticorpi
Anticorpi (Ab) sono proteine prodotte dall'organismo in risposta alla presenza di un corpo estraneo. Antigeni (Ag) sono composti estranei che istigano la produzione di anticorpi. Possono verificarsi libero in soluzione o possono essere vincolati alla superficie delle cellule o particelle, come virus o batteri. Un anticorpo prodotto in risposta ad un corpo estraneo reagisce con l'antigene per formare un complesso immune (Ab-Ag) ed è quindi inattivato.
Dinamico Light Scattering per Dimensione Particle Measuring
Dispersione della luce dinamica (fotoni spettroscopia di correlazione) è una tecnica che può misurare la dimensione delle particelle fino a 1 nm di diametro. Particelle in sospensione sottoporsi casuale moto browniano. Se queste particelle sono illuminati con un fascio laser, l'intensità della luce diffusa oscilla ad una velocità che dipende dalla dimensione delle particelle. L'analisi di queste fluttuazioni di intensità produce la velocità del moto browniano e quindi la dimensione delle particelle.
Trattare con particelle piccole e concentrazioni Diluire
L'intensità della luce diffusa ottenuti da piccole particelle o da campioni che sono molto diluite sarà insufficiente per PCS ripetibili dimensionamento misurazioni con un standard di 10mW laser He-Ne.
Un metodo per superare tali problemi è quello di utilizzare un rilevatore di maggiore efficienza. La Malvern Zetasizer strumento HS contiene un fotodiodo valanga (APD).
Questo rilevatore permette di misurare piccole particelle e campioni di bassa concentrazione senza la necessità di un laser più potente.
Caso di studio - Interazioni fra gli anticorpi e un virus
Questa nota applicativa descrive dinamica misure di scattering di luce in cui l'affinità dei due anticorpi diversi per un campione di virus può essere studiato.
Procedura sperimentale
Le misurazioni sono state effettuate su un Malvern Zetasizer 3000HS ad una temperatura di 25 ° C. La luce diffusa è stata rilevata con un angolo di 90 °.
Risultati
La figura 1 mostra le distribuzioni di intensità dimensioni ottenute da 3 misurazioni ripetute di un campione di siero contenente anticorpi. Le distribuzioni sono stati ottenuti dall'analisi dei dati con l'algoritmo CONTIN. Le distribuzioni sono monomodale con modalità di picco a 32 nm, rispettivamente. L'affinità dei due anticorpi diversi per un virus è stata determinata mescolando ciascuno dei campioni di anticorpi con un campione del virus e facendo una rapida misurazione dimensionamento (ogni 30 secondi). La Figura 2 mostra lo z-media diametro (il diametro medio in base all'intensità della luce diffusa) ottenuto per le miscele di 2 anticorpi con le particelle del virus in funzione del tempo trascorso dopo la miscelazione. L'aumento del z-media i risultati diametro dalla formazione di anticorpi-virus complessi. Anticorpi 1 mostra una maggiore affinità per il virus indicato dalla pendenza più ripida della curva.
Figura 1. Distribuzioni di dimensioni Intensità ottenuto da 3 misurazioni ripetute di un campione di siero contenente anticorpi.
Figura 2. Un grafico di z-media diametri da miscele di due anticorpi diversi con un virus in funzione del tempo trascorso dopo la miscelazione.
Conclusioni
Spettroscopia di correlazione fotone può essere utilizzato per misurare le dimensioni delle particelle di piccole dimensioni. Si tratta di una tecnica non invasiva che può essere utilizzata per valutare l'affinità di vari anticorpi per un virus particolare.
Fonte: Lo studio di anticorpi: Interazioni Antigen Utilizzando tecniche di Light Scattering ", la nota applicazione a Malvern Instruments.
Per ulteriori informazioni su questa fonte si prega di visitare Malvern Instruments Ltd (UK) o Malvern Instruments (USA) .