抗体および Malvern の器械からのダイナミックな光散乱の技術を使用して抗原/ウイルスの相互作用を調査すること

カバーされるトピック

背景
     抗原および抗体
     測定の粒度のためのダイナミックな光散乱
     小粒子および希薄な集中を取扱うこと
ケーススタディ - 抗体とウイルス間の相互作用
     実験プロシージャ
     結果
結論

背景

抗原および抗体

抗体は (Ab)異物の存在に応じてボディによって作り出される蛋白質です。 抗原は (Ag)抗体の生産を扇動する外国の混合物です。 それらは解決に自由に発生するかもしれませんか、またはウイルスまたは細菌のようなセルまたは粒子の表面に区切られるかもしれません。 従って異物に応じて作り出される抗体は抗原と免疫の複合体 (Ab Ag) を形作るために反応し、非アクティブになります。

測定の粒度のためのダイナミックな光散乱

ダイナミックな光散乱は (光子の相関関係の分光学) 直径の 1nm に粒子のサイズを測定できる技術です。 中断の粒子は任意ブラウン運動を経ます。 これらの粒子がレーザ光線と照らされれば、分散させたライトの強度は粒子のサイズに依存しているレートで変動します。 これらの強度の変動の分析はブラウン運動およびそれ故に粒度の速度をもたらします。

小粒子および希薄な集中を取扱うこと

小粒子または非常に希薄のサンプルから得られた分散させたライトの強度は標準 10mW 彼 Ne レーザーを使用して反復可能な PCS のサイジングの測定のために不十分です。

そのような問題を克服する 1 つの方法は高性能の探知器を使用することです。 Malvern Zetasizer HS の器械はなだれフォトダイオードを含んでいます (APD)。

この探知器はより強力なレーザーのための必要性なしで低い集中の小粒子そしてサンプルの測定を可能にします。

ケーススタディ - 抗体とウイルス間の相互作用

このアプリケーションノートはウイルスのサンプルのための 2 つの抗体の親和性が調査することができるダイナミックな光散乱の測定を記述します。

実験プロシージャ

測定は 25°C. の温度の Malvern Zetasizer 3000HS でなされました。 分散させたライトは 90° のの斜めに検出されました。

結果

図 1 ショー抗体を含んでいる血清のサンプルの 3 つの繰り返しの測定から得られる強度のサイズ分布。 分布は CONTIN のアルゴリズムのデータの分析から得られました。 分布はそれぞれ 32nm でピークモードと monomodal です。 ウイルスのための 2 つの抗体の親和性は抗体のサンプルのそれぞれをウイルスのサンプルとの混合し、急速なサイジングの測定 (30 秒毎に) によって定められました。 図 2 は混合の後で経過時間の機能としてウイルスの粒子が付いている 2 つの抗体の混合物のために得られる z 平均直径 (分散させたライトの強度に基づく中間の直径) を示します。 z 平均直径の増加は抗体ウイルスの複合体の形成に起因します。 抗体 1 はカーブの急斜面によって明記されるウイルスのためのより高い親和性を示します。

抗体を含んでいる血清のサンプルの 3 つの繰り返しの測定から得られる図 1. 強度のサイズ分布。

混合の後の経過時間の機能としてウイルスが付いている 2 つの抗体の混合物からの z 平均直径の 2.A のプロット。

結論

光子の相関関係の分光学が小粒子のサイズを測定するのに使用することができます。 特定のウイルスのためのさまざまな抗体の親和性を査定するのに使用することができるのは非侵襲的な技術です。

ソース: 抗体の調査: 光散乱の技術を使用して抗原の相互作用」、 Malvern の器械によるアプリケーションノート。

このソースのより多くの情報のために Malvern の器械株式会社 (イギリス) または Malvern の器械 (米国) を訪問して下さい。

Date Added: May 3, 2005 | Updated: Jun 11, 2013

Last Update: 13. June 2013 01:30

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