다루는 주제
배경
항원과 항체
측정 입자 크기에 대한 동적 광 산란
작은 입자와 희석 농도로 처리
사례 연구 - 항체와 바이러스 사이의 상호 작용
실험 절차
검색 결과
결론
배경
항원과 항체
항체 (AB)는 외국인 신체의 존재에 대응 신체에 의해 만들어진 단백질입니다. 항원 (자세) 항체의 생산을 선동 외국 화합물입니다. 그들은 솔루션에서 무료로 발생할 수 있습니다 또는 그들은 셀 또는 바이러 스나 세균과 같은 입자의 표면에 바인딩 수 있습니다. 외국인 신체에 대한 응답으로 생산 항체는 면역 복합 (AB - AG)를 형성하기 위해 항원과 반응하므로 inactivated입니다.
측정 입자 크기에 대한 동적 광 산란
동적 광 산란 (광자 상관 분광법)는 직경 1nm로 입자의 크기를 측정할 수있는 기술입니다. 서스펜션의 입자는 임의의 브라운 운동을 받고있다. 이러한 입자는 레이저 빔을 조명하는 경우, 흩어져있는 빛의 강도는 입자의 크기에 따라 달라집니다 비율 변동. 이러한 강도 변동의 분석은 브라운 운동의 속도와 따라서 입자 크기를 산출.
작은 입자와 희석 농도로 처리
작은 입자 또는 매우 희석 아르 샘플에서 얻은 분산 빛의 강도는 반복 PC가 표준 10mW He - Ne 레이저를 사용하여 측정을 사이징에 대한 불충 분한 것입니다.
이러한 문제를 극복 한 가지 방법은 높은 효율 감지기를 사용하는 것입니다. Malvern Zetasizer HS 악기는 눈사태 photodiode (APD)가 포함되어 있습니다.
이 감지기는 더 강력한 레이저를위한 필요없이 작은 입자와 낮은 농도의 샘플 측정이 가능합니다.
사례 연구 - 항체와 바이러스 사이의 상호 작용
본 애플 리케이션 노트는 바이러스 샘플에 대한 두 가지 항체의 친화력을 공부 할 수있는 동적 광 산란 측정을 설명합니다.
실험 절차
측정은에서 만들어진 Malvern Zetasizer 25 ° C의 온도에서 3000HS 흩어진 빛이 90 °의 각도로 감지되었다.
검색 결과
그림 1은 혈청이 포함된 항체의 샘플 3 반복 측정에서 얻은 강도 크기 배포판을 보여줍니다. 배포판은 CONTIN 알고리즘과 데이터의 분석에서 얻은되었습니다. 배포판은 각각 32nm에서 피크 모드로 monomodal 있습니다. 바이러스에 대한 두 가지 항체의 친화력은 바이러스의 샘플과 항체 샘플을 각각 혼합 및 신속한 사이징 측정 (매 30 초)하여 결정되었다. 그림 2는 혼합 후 경과 시간의 함수로 바이러스 입자 2 항체의 혼합물에 대해 얻어진 Z - 평균 직경을 (흩어져있는 빛의 강도에 따라 평균 직경)를 보여줍니다. 항체 바이러스 단지의 형성에서 Z - 평균 직경 결과에 향상시킬 수 있습니다. 항체 1 곡선의 험한 슬로프에 표시된 바이러스에 대한 높은 친화력을 보여줍니다.
그림 1. 혈청이 포함된 항체의 샘플 3 반복 측정에서 얻은 강도 크기 배포판.
그림 2. 믹싱 후 경과 시간의 함수로 바이러스 2 가지 항체의 혼합물에서 Z - 평균 직경의 플롯.
결론
광자 상관 분광법은 작은 입자의 크기를 측정하는 데 사용할 수 있습니다. 그것은 특정 바이러스에 대한 다양한 항체의 친화력을 평가하는 데 사용할 수있는 비침습 기술입니다.
출처 : 항체의 연구 : Malvern 악기에 의한 광 산란 기법 ", 애플 리케이션 노트를 사용하여 항원 상호 작용.
이 원본에 대한 자세한 내용은 참조하시기 바랍니다 Malvern 인 스트 루먼트 (주) (영국) 또는 Malvern 인 스트 루먼트 (미국) .