Ämnen som tas upp
Bakgrund
Antigener och antikroppar
Dynamisk ljusspridning för att mäta partikelstorlek
Hantering av små partiklar och späd Koncentrationer
Fallstudie - samspel mellan antikroppar och virus
Tillvägagångssätt
Resultat
Slutsatser
Bakgrund
Antigener och antikroppar
Antikroppar (Ab) är proteiner som produceras av kroppen som svar på närvaron av en främmande kropp. Antigener (Ag) är utländska föreningar som anstiftar produktionen av antikroppar. De kan förekomma fria i lösning eller de kan vara bundna till ytan av celler eller partiklar, som virus eller bakterier. En antikropp är ett svar på en främmande kropp reagerar med antigenet och bildar ett immunkomplex (AB-Ag) och är därför inaktiverat.
Dynamisk ljusspridning för att mäta partikelstorlek
Dynamisk ljusspridning (fotoner korrelation spektroskopi) är en teknik som kan mäta storleken på partiklar ner till 1nm i diameter. Partiklar i suspension genomgå slumpmässiga Brownsk rörelse. Om dessa partiklar belyses med en laserstråle, varierar intensiteten av det spridda ljuset i en takt som är beroende av partiklarnas storlek. Analys av dessa intensitet fluktuationer ger den hastighet Brownsk rörelse och därmed partikelstorlek.
Hantering av små partiklar och späd Koncentrationer
Intensiteten i spritt ljus från små partiklar eller från prover som är mycket späda kommer att vara otillräcklig för repeterbara PCS dimensionering mätningar med en vanlig 10 mW He-Ne laser.
Ett sätt att övervinna sådana problem är att använda en högre effektivitet detektor. Den Malvern Zetasizer HS Instrumentet innehåller en lavin fotodiod (APD).
Denna detektor kan mätning av små partiklar och prover av låg koncentration utan att det behövs en mer kraftfull laser.
Fallstudie - samspel mellan antikroppar och virus
I detta meddelande beskriver dynamisk ljusspridning mätningar där affinitet av två olika antikroppar för ett virus prov kan studeras.
Tillvägagångssätt
Mätningarna gjordes på en Malvern Zetasizer 3000HS vid en temperatur på 25 ° C. Det spridda ljuset upptäcktes i en vinkel på 90 °.
Resultat
Figur 1 visar fördelningen intensiteten storlek från 3 upprepa mätningar av ett urval av serum innehåller antikroppar. Fördelningarna har erhållits från analys av data med Contin algoritm. Fördelningarna är monomodal med maximal lägen på 32nm respektive. Den samhörighet av två olika antikroppar för ett virus bestämdes genom att blanda varje antikropp prover med ett urval av viruset och göra snabba dimensionering mätningar (var 30 sekunder). Figur 2 visar z-genomsnittet diametrar (medeldiametern baserad på intensiteten av spritt ljus) som erhållits för blandningar av 2-antikroppar med viruspartiklar som en funktion av passerad tid efter blandning. Ökningen i z-medeldiameter resultat från bildandet av antikropps-viruset komplex. Antikropp 1 visar högre affinitet för viruset indikeras av brantare lutning på kurvan.
Figur 1. Intensitet storlek utdelningar från 3 upprepa mätningar av ett urval av serum innehåller antikroppar.
Figur 2. En tomt på z-genomsnittet diametrar från blandning av två olika antikroppar med ett virus som en funktion av den tid som gått efter blandning.
Slutsatser
Photon korrelation spektroskopi kan användas för att mäta storleken på små partiklar. Det är en icke-invasiv teknik som kan användas för att bedöma affinitet av olika antikroppar för ett visst virus.
Källa: Studie av antikropp: Antigen Interaktion med ljus Scattering teknik ", Application Note av Malvern Instruments.
För mer information om denna källa besök Malvern Instruments Ltd (Storbritannien) eller Malvern Instruments (USA) .