LiposomesCharacterisationen Däribland Den Potentiella Characterisationen för Storleksanpassa och för Zetaen av Anionic och Cationic Liposomes som Använder Zetasizeren som Är Nano Från Malvern, Instrumenterar

Täckte Ämnen

Bakgrund
     Rekvisita som Verkställer Ödet av Intravenously Injicerade Liposomes
     Mäta Zetaen som är Potentiell av Liposomes
Experimentellt
     LiposomeFörberedelse
     LiposomeCharacterisation
Resultat
     Anionic Liposomes
     Cationic Liposomes
Avslutningar

Bakgrund

Liposomes är vesicles som komponeras av en bilayer av lipidmolekylar som inneslutar en aqueous volym. De användes initialt som modellerar system till studiemembranrekvisita liksom genomtränglighet. Nya applikationer har koncentrerat på deras bruk som drogleveransmedel tack vare kapaciteten av inkorporering av bevattna-lösliga material i deras aqueous volym eller oljer lösliga material i lipidbilayeren. Liposomes kan planläggas för specifika applikationer kontrollerar igenom av lipidsammansättningen eller ändringen av ytbehandla vid konjugation av antikroppar eller peptides. Till exempel används cationic liposomes i genterapiapplikationer tack vare deras kapacitet till komplex till DNA.

Rekvisita som Verkställer Ödet av Intravenously Injicerade Liposomes

Ödet av intravenously injicerade liposomes är beslutsamt vid ett nummer av rekvisita. Två av det viktigast är partikeln storleksanpassar och den potentiella zetaen. Båda av dessa parametrar kan mätas på den Nano Zetasizeren spänner av instrumenterar. Partikeln storleksanpassar mätas genom att använda dynamisk ljus spridning (DLS). Denna teknik mäter Time-anhörigen växlingarna i styrkan av spritt lätt som uppstår, därför att partiklarna är att genomgå som Är Brownian, vinkar. Analys av dessa styrkeväxlingar möjliggör beslutsamheten av diffusionskoefficienterna av partiklarna som konverteras in i en storleksanpassafördelning.

Mäta Zetaen som är Potentiell av Liposomes

Zetaen som är potentiell av en partikel, är den total- laddningen som partikeln får i ett särskilt medel. Kunskap av zetaen som är potentiell av en liposomeförberedelse, kan hjälpa att förutsäga ödet av liposomesna in - vivo. Mätningen av zetaen som är potentiell av, tar prov i den Nano Zetasizeren göras genom att använda den velocimetry tekniken av laser Doppler. I denna teknik appliceras en spänning över en para av elektroder på endera avslutar av en cell som innehåller partikelspridningen. Laddade partiklar tilldras till den motsatt laddade elektroden, och deras hastighet mätas, och uttryckt i enhet sätta in styrka som deras electrophoretic rörlighet. Ytterligare information på dessa tekniker kan finnas i annan applikation, och tekniskt noterar på Malvernen Instrumenterar websiten.

Denna applikation noterar resumerar storleksanpassar och potentiella mätningar för zetaen som göras på både anionic och cationic liposomes.

Experimentellt

LiposomeFörberedelse

Liposomes var förberedda vid sonicationmetoden. En serie av anionic liposomes var förberedd från olika blandningar av dipalmitoylphosphatidylcholinen (DPPC), och dipalmitoylphosphatidylglycerolen i phosphate fungera som buffert saltdamm, (PBS) som specificerat in bordlägga 1. Cationic liposomes var förberedda från DPPC, cholesterol och den dimethyl dioctadecylammoniumbanaliteten för cationic surfactant, (DDAB) som resumerat in bordlägga 2. Cases Sammanlagt finalkoncentrationerna av liposomesna var 4mg lipid/ml PBS.

Bordlägga 1. Väger av DPPC och DPPG som används i förberedelsen av en serie av anionic liposomes i phosphate fungera som buffert saltdamm (PBS)

DPPC (mg)

DPPG (mg)

DPPG (mole %)

PBS (ml)

19

1

5,2

5

18

2

10,9

5

17

3

17,4

5

16

4

24,6

5

15

5

32,8

5

Bordlägga 2. Väger av DPPC, cholesterol och DDAB som används i förberedelsen av en serie av cationic liposomes i phosphate fungera som buffert saltdamm (PBS).

DPPC (mg)

Cholesterol (mg)

DDAB (mg)

DDAB (mole %)

PBS (ml)

17

2

1

5,6

5

16

2

2

11,8

5

15

2

3

18,6

5

14

2

4

26,1

5

13

2

5

34,6

5

Lipidsna var upplöste och blandade i chloroform (DPPG upplöstes i en blandning av chloroform/methanol (2:1 v/v)) och vätskan som tas bort av roterande avdunstning på 60°C för att erhålla en tunn lipid, filmar. Anslåvolymen av phosphate fungera som buffert saltdamm (föruppvärmnings på 60°C) tillfogades, och skytteln agiterades kraftigt på en roterande blandare till multilamellar vesicles för jordbruksprodukter (MLVs). MLVsen var badet sonicated på 60°C för 15 noterar därefter till unilamellar liposomes för jordbruksprodukter. Efter sonication tar prov liposomen kläcktes på 60°C för 15 noterar för att låta dem härda.

LiposomeCharacterisation

Alla potentiella mätningar för storleksanpassa och för zetaen gjordes på en Zetasizer som Nano ZS på 25°C. som Storleksanpassar mätningar, gjordes på den propra liposomen tar prov, eftersom tar prov förtunnades 1 i 10 med PBS för de potentiella mätningarna för zetaen. Den Nano ZSEN inkorporerar non-invasive optik för backscatter (NIBS™) för att storleksanpassa mätningar. Upptäckten metar av 173°enables storleksanpassar mätningar av koncentrerat som är grumliga tar prov för att göras. Emellertid spridd tar prov lätt avkänt från under en zeta som den potentiella mätningen göras på det framåt metar av 12°. Därför strålar laseren behov att tränga igenom ta prov, och som en följd, måste ta provkoncentrationen för potentiella mätningar för zeta vara lägre än det för att storleksanpassa.

Resultat

Anionic Liposomes

Resultaten av storleksanpassa för partikeln och potentiella mätningar för zeta av de olika anionic liposomesna resumeras in bordlägger 3. Detta bordlägger shows z-genomsnittet diametrarna (de genomsnittliga diametrarna som baseras på styrkan av spritt lätt), polydispersityindexet (en bedömning av bredden av fördelningen), och den potentiella genomsnittliga zetaen värderar erhållande för den olika liposomen tar prov. Z-genomsnittet diametern värderar är hjälpmedlet av 3 repetitionmätningar (standardavvikelser sätter inom parantes in) som göras på den propra liposomen, tar prov. Den potentiella zetaen värderar är hjälpmedlet av 5 repetitionmätningar (standardavvikelser sätter inom parantes in) som göras på utspätt, tar prov (1 i 10 med PBS).

Bordlägga 3. Z-genomsnittet diametrarna i nm, polydispersityindex värderar och zetaspänningar i millivolt av olika anionic liposomes som är förberedda i PBS. Standardavvikelsen värderar från repetitionmätningarna visas in sätter inom parantes.

% för Mole DPPG

Diameter z-Av i nm (SD)

Polydispersity (SD)

Zeta som är Potentiell i millivolt (SD)

5,2

133,8 (0,4)

0,292 (0,01)

-9,0 (0,64)

10,9

92,3 (0,49)

0,269 (0,01)

-15,7 (1,36)

17,4

107,2 (0,20)

0,256 (0,01)

-22,5 (0,95)

24,6

125,1 (0,60)

0,261 (0,01)

-27,3 (1,29)

32,8

89,2 (1,39)

0,264 (0,01)

-31,4 (0,98)

De storleksanpassa resultaten erhållande för showen för dessa den anionic liposomeförberedelser, som badsonicationmetoden av förberedelsen ger liknande, storleksanpassar hjälpmedel och fördelningsbredder.

Den potentiella zetaen och storleksanpassar värderar konspireras in figurerar 1 som en fungera av mole%en DPPG. Datan visar, att mätningarna är mycket repeatable för varje liposome tar prov och visar den förväntade trenden av passande negativare - laddat med nöjd ökande DPPG. I tillägg visar resultaten att storleksanpassa är vilden av liposomesammansättningen.

Figurera 1. Den potentiella Zetaen och storleksanpassar värderar erhållande som en fungera av mole%en DPPG som är nöjd för en serie av anionic liposomes.

Cationic Liposomes

Bordlägga 4 resumerar de potentiella resultaten för storleksanpassa och för zetaen erhållande för serien av cationic liposomes. Liknande storleksanpassa fördelningor erhölls jämförde till de anionic liposomeförberedelserna. Figurera 2 shows en täppa av den potentiella zetaen och storleksanpassa resultat erhållande som en fungera av mole%en DDAB och shows en gradvis förhöjning i realitetladdning som DDABEN som är nöjd av liposomesförhöjningarna.

Bordlägga 4. Z-genomsnittet diametrarna i nm, polydispersityindex värderar och zetaspänningar i millivolt av olika cationic liposomes som är förberedda i PBS. Standardavvikelsen värderar från repetitionmätningarna visas in sätter inom parantes.

% för Mole DDAB

Diameter z-Av i nm (SD)

Polydispersity (SD)

Zeta som är Potentiell i millivolt (SD)

5,6

116,6 (1,0)

0,258 (0,01)

10,3 (0,88)

11,8

95,8 (0,36)

0,223 (0,01)

20,1 (1,36)

18,6

120,3 (0,40)

0,266 (0,01)

25,9 (0,52)

26,1

109,0 (1,15)

0,270 (0,01)

33,1 (2,2)

34,6

104,0 (0,42)

0,251 (0,01)

39,5 (1,2)

Figurera 2. Den potentiella Zetaen och storleksanpassar värderar erhållande som en fungera av mole%en DDAB som är nöjd för en serie av cationic liposomes

Avslutningar

Läkarundersökningkarakteriseringen av liposomes är av stor betydelse i överenskommelse deras lämplighet för en spänna av applikationer. Kunskap av zetaen som är potentiell av en liposomeförberedelse, kan hjälpa att förutsäga ödet av liposomesna in - vivo. Anslutningen av laddade liposomes med motsatt laddade molekylar kan övervakas, genom att mäta zetaen som är potentiell av det resulterande komplex.

Zetasizer den Nano serien möjliggör foren, och den repeatable karakteriseringen av båda storleksanpassar och zetaen som är potentiell av liposomes, som specificerat i denna applikation notera.

Notera: Ett färdigt listar av hänvisar till kan finnas, genom att se till källdokumentet.

Källa: ”Storleksanpassa, och Noterar den Potentiella Characterisationen för Zetaen av Anionic och Cationic Liposomes på den Nano Zetasizeren”, Applikationen vid Malvern Instrumenterar.

För mer information på denna källa behaga besök Malvern Instrumenterar AB (UK), eller Malvern Instrumenterar (USA).

Date Added: May 6, 2005 | Updated: Jun 11, 2013

Last Update: 13. June 2013 01:51

Ask A Question

Do you have a question you'd like to ask regarding this article?

Leave your feedback
Submit