Liposomes Characterisation Kabilang ang Ang Sukat at Zeta Potensyal Characterisation ng Anionic at Cat

Paksa sakop

Likuran
Katangian na Epekto ang kapalaran ng Intravenously Injected Liposomes
Pagsukat Zeta Potensyal ng Liposomes
Pagsubok
Liposome Paghahanda
Liposome Characterisation
Mga Resulta
Anionic Liposomes
Cationic Liposomes
Konklusyon

Likuran

Liposomes ay vesicles na binubuo ng isang bilayer ng mga molecule sa lipid akip ng isang may tubig dami. Una Sila ay ginamit bilang ng mga sistema ng modelo upang pag-aralan ang mga katangian ng lamad tulad ng pagkamatagusin. Kamakailang mga application puro sa kanilang paggamit ng mga sasakyan sa paghahatid ng gamot dahil sa kakayahan ng incorporating ng nalulusaw sa tubig na mga materyales sa kanilang may tubig na dami o langis natutunaw materyales sa bilayer lipid. Liposomes maaaring dinisenyo para sa tiyak na mga application sa pamamagitan ng control ng lipid komposisyon o pagbabago ng sa ibabaw ng banghay ng mga antibodies o peptides. Halimbawa, ang mga cationic liposomes ay ginagamit sa mga aplikasyon sa gene therapy dahil sa kanilang kakayahan upang kumplikadong sa DNA.

Katangian na Epekto ang kapalaran ng Intravenously Injected Liposomes

Ang kapalaran ng mga intravenously injected liposomes ay natutukoy sa pamamagitan ng isang bilang ng mga katangian. Dalawang ng mga pinakamahalagang tipik laki at Zeta potensyal. Pareho ng mga parameter ay maaaring sinusukat sa Zetasizer Nano na hanay ng mga instrumento. Tipik sukat ay sinusukat gamit ang dynamic light scattering ( DLS) . Ang pamamaraan na ito ay sumusukat ng oras-umaasa pagbabago sa kasidhian ng nakakalat na liwanag na nangyari dahil ang mga particle nagsasagawa Brownian motion. Pagsusuri ng mga pagbabago kasidhian na ito ay nagbibigay-daan sa pagpapasiya ng coefficients ng pagsasabog ng mga particle na kung saan ay na-convert sa isang sukat ng pamamahagi.

Pagsukat Zeta Potensyal ng Liposomes

Ang Zeta potensyal na ng isang tinga ay ang kabuuang pagsingil na ang tinga acquires sa isang partikular na daluyan. Kaalaman ng Zeta potensyal na ng isang liposome paghahanda ay maaaring makatulong upang mahulaan ang kapalaran ng liposomes sa Vivo. Sukatan ng Zeta potensyal ng mga halimbawa sa Zetasizer Nano ay tapos na gamit ang pamamaraan ng laser Doppler velocimetry . Sa pamamaraan na ito, ang boltahe ay inilalapat sa isang pares ng electrodes sa alinman sa dulo ng isang cell na naglalaman ng mga mumo pagpapakalat. Sisingilin particle ay akit sa oppositely na sisingilin elektrod at ang kanilang bilis ay sinusukat at ipinahayag sa lakas ng patlang ng yunit bilang kanilang electrophoretic kadaliang mapakilos. Karagdagang impormasyon sa mga pamamaraan na ito ay matatagpuan sa iba pang application at teknikal na mga tala sa Malvern Instrumentong website.

Ang application tandaan na ito summarizes laki at Zeta potensyal na sukat na ginawa sa parehong anionic at cationic liposomes.

Pagsubok

Liposome Paghahanda

Liposomes ay inihanda sa pamamagitan ng ang paraan ng sonication. Ang isang serye ng mga anionic liposomes ay handa mula sa iba't ibang mga mixtures ng dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC) at dipalmitoylphosphatidylglycerol sa pospeyt buffered asin (PBS) bilang detalyadong sa table 1. Cationic liposomes ay handa mula sa DPPC, kolesterol at ang cationic surfactant dimethyl dioctadecylammonium bromuro (DDAB) bilang summarized sa table 2. Sa lahat ng kaso ang huling mga concentrations ng liposomes ay 4mg lipid / ML PBS.

Table 1. Talaro ng DPPC at DPPG ginamit sa paghahanda ng isang serye ng mga mga anionic liposomes sa pospeyt buffered asin (PBS )

Table 2. Talaro ng DPPC, kolesterol at DDAB ginamit sa paghahanda ng isang serye ng mga mga cationic liposomes sa pospeyt buffered asin (PBS) .

Ang mga lipids ay dissolved at halo-halong sa kloropormo (DPPG ay dissolved sa isang timpla ng kloropormo / methanol (2:01 v / v)) at ang nakatutunaw inalis ni umiinog singaw sa 60 ° C upang makakuha ng isang manipis na film lipid. Ang naaangkop na dami ng pospeyt buffered asin (preheated sa 60 ° C) ay naidagdag at daluyan ang masigla nabalisa sa isang makina na panghalo upang makabuo ng mga multilamellar vesicles (MLVs). Ang mga MLVs ay pagkatapos paliguan sonicated sa 60 ° C para sa 15 minuto upang makagawa ng mga unilamellar liposomes. Pagkatapos sonication, ang mga liposome halimbawa ay incubated sa 60 ° C para sa 15 minuto upang payagan ang mga ito sa magsubo.

Liposome Characterisation

Lahat ng sizing at potensyal na mga sukat ng Zeta ay ginawa sa isang Zetasizer Nano ZS sa 25 ° C. Sizing sukat ay ginawa sa masinop na liposome halimbawa, habang ang mga halimbawa ay diluted 1 sa 10 sa PBS para sa mga sukat ng Zeta mga potensyal na. Ang Nano ZS incorporates non-nagsasalakay backscatter (ginoo ™) optika para sa sizing ng mga sukat. Ang pagtuklas ng anggulo ng 173 ° ay nagbibigay-daan sa gawin ang laki ng sukat ng mga puro, nalilito na mga halimbawa. Gayunpaman, ang kalat na liwanag na nakita mula sa mga halimbawa sa loob ng isang sukatan ng mga potensyal na ng Zeta ay ginawa sa ang forward anggulo ng 12 °. Samakatuwid ang sinag ng laser pangangailangan upang tumagos ang sample at bilang isang kalalabasan, ang concentration ng sample para sa Zeta potensyal na sukat ay dapat na mas mababa kaysa sa para sa sizing.

Mga Resulta

Anionic Liposomes

Ang mga resulta ng tinga sizing at Zeta potensyal na mga sukat ng iba't ibang mga anionic liposomes ay summarized sa table 3. Ipinapakita ng table na ito ang z-average diameters (ang ibig sabihin diameters na batay sa kasidhian ng nakakalat na liwanag), ang polydispersity index (isang pagtatantya ng ang lapad ng pamamahagi) at ang ibig sabihin ng Zeta potensyal na halaga na nakuha para sa iba't ibang mga liposome halimbawa. Ang z-average na halaga ng lapad ang mga paraan ng 3 mga sukat ng ulitin (standard deviations sa mga bracket) na ginawa sa masinop na liposome halimbawa. Ang Zeta potensyal na mga halaga ay ang mga paraan ng 5 mga sukat ng ulitin (standard deviations sa mga bracket) na ginawa sa diluted halimbawa (1 sa 10 sa PBS).

Table 3. Ang z-average diameters sa nm, polydispersity index halaga at Zeta potensyal sa mV ng iba't ibang mga anionic liposomes na handa sa PBS. Ang karaniwang halaga ng paglihis mula sa ulitin ang sukat ay ipinapakita sa mga bracket.

Ang sizing ng mga resulta na nakuha para sa mga anionic liposome paghahanda ay nagpapakita na ang paraan ng paliguan ng sonication ng paghahanda ay nagbibigay sa mga katulad na nangangahulugan ng laki at lapad ng pamamahagi.

Ang potensyal ng Zeta at laki ng mga halaga ay plotted sa figure 1 bilang isang function ng DPPG taling%. Ang data ay nagpapakita na ang sukat ay lubhang repeatable para sa bawat isa liposome sample at ipakita ang inaasahan na trend ng pagiging mas negatibong sisingilin sa pagtaas ng DPPG nilalaman. Sa karagdagan, ang mga resulta ay nagpapakita na ang laki ay malayang ng liposome komposisyon.

Figure 1. Zeta potensyal na at ang laki ng halaga na nakuha bilang isang function ng taling nilalaman% DPPG para sa isang serye ng mga anionic liposomes.

Cationic Liposomes

Table 4 summarizes ang sizing at Zeta potensyal na mga resulta na nakuha para sa mga serye ng mga cationic liposomes. Katulad laki distribusyon ay nakuha kumpara sa anionic liposome paghahanda. Figure 2 ay nagpapakita ng isang balangkas ng ang potensyal ng Zeta at laki ng mga resulta na nakuha bilang isang function ng nunal% DDAB at nagpapakita ng unti-unti pagtaas sa positibong singil bilang DDAB nilalaman ng pagtaas liposomes.

Table 4. Ang z-average diameters sa nm, polydispersity index halaga at Zeta potensyal sa mV ng iba't ibang cationic liposomes handa sa PBS. Ang karaniwang halaga ng paglihis mula sa ulitin ang sukat ay ipinapakita sa mga bracket.

Figure 2. Zeta potensyal at makuha ang laki ng halaga bilang isang function ng nunal% DDAB ng nilalaman para sa isang serye ng mga cationic liposomes

Konklusyon

Ang pisikal na paglalarawan ng mga liposomes ay ng mahusay na kahalagahan sa pag-unawa ng kanilang mga kaangkupan para sa isang hanay ng mga application. Kaalaman ng Zeta potensyal na ng isang liposome paghahanda ay maaaring makatulong upang mahulaan ang kapalaran ng liposomes sa Vivo. Association of sisingilin liposomes sa oppositely sisingilin molecule ay maaaring sinusubaybayan sa pamamagitan ng pagsukat sa Zeta potensiyal ng kumplikado ang nagreresulta.

Ang Zetasizer Nano serye ay nagbibigay-daan sa ang mabilis at repeatable paglalarawan ng parehong sukat at Zeta potensyal ng liposomes bilang detalyadong sa talang ito ng application.

Tandaan: Ang isang kumpletong listahan ng mga sanggunian ay matatagpuan sa pamamagitan ng nagre-refer sa pinagmulan ng dokumento.

Source: "Sukat at Zeta Potensyal Characterisation ng Anionic at Cationic Liposomes sa Ang Zetasizer Nano", Application Tandaan pamamagitan ng Malvern Instrumentong.

Para sa karagdagang impormasyon sa pinagmulan, mangyaring bisitahin ang Malvern Instrumentong Ltd ( UK ) o Malvern Instrumentong ( USA ).