脂质体描述特性包括负离子和负离子脂质体的范围和 Zeta 潜在的描述特性使用 Zetasizer 的纳诺从 Malvern 仪器

包括的事宜

背景
     影响静脉内被注射的脂质体命运的属性
     脂质体评定的 Zeta 潜在
实验
     脂质体准备
     脂质体描述特性
结果
     负离子脂质体
     负离子脂质体
结论

背景

脂质体是泡组成由油脂分子 bilayer 放入一个含水数量的。 他们最初使用作为模型系统学习膜属性例如渗透性。 最近应用集中他们的使用作为药物运载工具由于合并在他们的含水数量的溶于水材料或在油脂 bilayer 的可溶于油的材料的能力。 脂质体可以为特定应用设计通过油脂构成的表面的控制或修改由抗体或肽的结合。 例如,负离子脂质体用于基因治疗应用由于他们的能力对复杂对脱氧核糖核酸。

影响静脉内被注射的脂质体命运的属性

一定数量的属性取决于静脉内被注射的脂质体命运。 二最重要是颗粒大小和 Zeta 潜在。 这两个参数在仪器的 Zetasizer 纳诺范围可以被评定。 使用动态光散射,颗粒大小被评定 (DLS)。 此技术评定发生在强度的非定常波动分散的光,因为微粒进行布朗运动。 对这些强度波动的分析启用微粒的扩散率的确定被转换成大小分布。

脂质体评定的 Zeta 潜在

微粒的 Zeta 潜在是这个微粒在一个特殊媒体获取的整体充电。 脂质体准备的 Zeta 潜在的知识可能帮助预测脂质体的命运体内。 范例 Zeta 潜在的评定在纳诺的 Zetasizer 的完成使用 velocimetry 激光多谱勒仪的技术。 在此技术,电压在一个对是应用的电极间在包含微粒散射的细胞的任一个末端。 荷电粒子被吸引到相反被充电的电极,并且他们的速度用部件场强被评定并且表示作为他们的电泳流动性。 关于这些技术的详细信息可以在其他应用和技术声明找到关于 Malvern 仪器网站。

此应用注解总结在负离子和负离子脂质体做的范围和 Zeta 潜在的评定。

实验

脂质体准备

脂质体用声处理方法准备。 一系列的负离子脂质体从多种混合物 dipalmitoylphosphatidylcholine 准备 (DPPC),并且在磷酸缓冲盐的 dipalmitoylphosphatidylglycerol (PBS) 详情参见表 1. 负离子脂质体从 DPPC、胆固醇和负离子表面活化剂二甲基 dioctadecylammonium 溴化物准备 (DDAB)如被总结在表 2. 在所有的情况下脂质体的最终浓度 4mg lipid/ml PBS。

用于一系列的负离子脂质体的准备和 DPPG 的 1. 重量 DPPC 在磷酸缓冲盐的 (PBS)

DPPC (mg)

DPPG (mg)

DPPG (痣 %)

PBS (ml)

19

1

5.2

5

18

2

10.9

5

17

3

17.4

5

16

4

24.6

5

15

5

32.8

5

用于一系列的负离子脂质体的准备和 DDAB 的 2. 重量 DPPC、胆固醇在磷酸缓冲盐的 (PBS)。

DPPC (mg)

胆固醇 (mg)

DDAB (mg)

DDAB (痣 %)

PBS (ml)

17

2

1

5.6

5

16

2

2

11.8

5

15

2

3

18.6

5

14

2

4

26.1

5

13

2

5

34.6

5

油脂在三氯甲烷被溶化了并且混合 (DPPG 在混合物被溶化了三氯甲烷/甲醇 (2:1 v/v)) 并且转台式蒸发去除的溶剂在 60°C 得到一部稀薄的油脂影片。 适当的数量的磷酸缓冲盐 (预先加热在 60°C) 被添加,并且船在一台转台式搅拌机有力地被鼓动生产 multilamellar 泡 (MLVs)。 MLVs 是然后浴被声波处理在 60°C 15 分钟生产 unilamellar 脂质体。 在声处理以后,脂质体范例被孵化在 60°C 15 分钟给他们锻炼。

脂质体描述特性

所有大小和 Zeta 潜在的评定在 25°C. 大小评定的纳诺 ZS 在整洁的脂质体范例做的 Zetasizer 做,而范例用 Zeta 潜在评定的 PBS 稀释了 1 在 10。 纳诺 ZS 合并估量的评定的非侵入性的背景散射的 (NIBS™) 光学。 173°enables 将做的集中的,混浊范例的范围评定检测角度。 然而,从范例检测的分散的光在 Zeta 潜在的评定期间做在 12° 转接角度。 所以激光需要击穿这个范例和结果, Zeta 潜在的评定的范例浓度低于那一定估量的。

结果

负离子脂质体

微粒大小的结果和多种负离子脂质体的 Zeta 潜在的评定在表 3. 被总结。 此表显示 z 平均直径 (平均直径根据强度分散的光),多分散性索引 (配电器的宽度的估计) 和为多种脂质体范例得到的平均 Zeta 潜在的值。 z 平均直径值是在整洁的脂质体范例 (在托架的标准偏差) 做的方法 3 个重复评定。 Zeta 潜在的值是在被稀释的范例 (在托架的标准偏差) 做的方法 5 个重复评定 (1 在 10 与 PBS)。

表 3。 在 nm、多分散性给定值和 Zeta 潜在的 z 平均直径在 mV 多种负离子脂质体在 PBS 准备。 从重复评定的标准偏差值在托架显示。

痣 % DPPG

z Av Dia 在 nm (SD)

多分散性 (SD)

Zeta 潜在 mV (SD)

5.2

133.8 (0.4)

0.292 (0.01)

-9.0 (0.64)

10.9

92.3 (0.49)

0.269 (0.01)

-15.7 (1.36)

17.4

107.2 (0.20)

0.256 (0.01)

-22.5 (0.95)

24.6

125.1 (0.60)

0.261 (0.01)

-27.3 (1.29)

32.8

89.2 (1.39)

0.264 (0.01)

-31.4 (0.98)

为这些负离子脂质体准备显示得到的大小结果准备浴声处理方法产生相似的范围平均值和配电器宽度。

作为 mole% DPPG 功能, Zeta 潜在和范围值在表 1 被密谋。 这个数据向显示评定为每个脂质体范例是非常可重复的并且显示期望的趋势成为带负电荷随着 DPPG 目录的增加。 另外,结果向显示这个范围是脂质体构成的独立。

图 1. Zeta 潜在和范围值得到作为一系列的负离子脂质体的 mole% DPPG 目录功能。

负离子脂质体

表 4 总结为负离子脂质体系列得到的大小和 Zeta 予想结果。 相似的大小分布获得了与负离子脂质体准备比较了。 当脂质体的 DDAB 目录增加,图 2 显示 Zeta 潜在和范围结果的剧情得到作为 mole% DDAB 功能并且显示在正电荷的一个逐渐增量。

表 4。 在 nm、多分散性给定值和 Zeta 潜在的 z 平均直径在 mV 多种负离子脂质体在 PBS 准备。 从重复评定的标准偏差值在托架显示。

痣 % DDAB

z Av Dia 在 nm (SD)

多分散性 (SD)

Zeta 潜在 mV (SD)

5.6

116.6 (1.0)

0.258 (0.01)

10.3 (0.88)

11.8

95.8 (0.36)

0.223 (0.01)

20.1 (1.36)

18.6

120.3 (0.40)

0.266 (0.01)

25.9 (0.52)

26.1

109.0 (1.15)

0.270 (0.01)

33.1 (2.2)

34.6

104.0 (0.42)

0.251 (0.01)

39.5 (1.2)

图 2. Zeta 潜在和范围值得到作为一系列的负离子脂质体的 mole% DDAB 目录功能

结论

脂质体的实际描述特性是在了解他们的适合的重要性的应用范围。 脂质体准备的 Zeta 潜在的知识可能帮助预测脂质体的命运体内。 被充电的脂质体的关联与相反被充电的分子的可以通过评定发生的复杂的 Zeta 潜在监控。

Zetasizer 纳诺串联启用范围和脂质体 Zeta 潜在的迅速和可重复的描述特性详情参见此应用注解。

注意: 参考一个完整的目录可以通过是指源文档找到。

来源: “范围和负离子和负离子脂质体的 Zeta 潜在的描述特性在 Zetasizer 的纳诺”,应用注解由 Malvern 仪器。

关于此来源的更多信息请参观 Malvern 有限公司 (英国) 仪器Malvern 仪器 (美国)

Date Added: May 6, 2005 | Updated: Jun 11, 2013

Last Update: 13. June 2013 01:13

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