脂质体的表征,包括大小和阴离子和猫Zeta电位表征

讨论主题

背景
性质,影响静脉注射脂质体的命运
脂质体的测量Zeta电位
实验
脂质体的制备
脂质体的表征
结果
阴离子脂质体
阳离子脂质体
结论

背景

脂质体是一个封闭的水体积的脂质分子双层组成的囊泡。他们最初是用来作为模型系统,研究如渗透膜性能。最近的应用程序都集中在其纳入水溶性材料中的水的体积或油溶性材料,在脂质双层的能力由于使用药物运载工具。通过控制脂质成分或修改表面抗体或肽共轭的脂质体可以针对特定应用而设计。例如,使用阳离子脂质体在基因治疗中的应用,由于其复杂的DNA的能力。

性质,影响静脉注射脂质体的命运

静脉注射脂质体的命运是由一些属性。其中两个最重要的是粒径和Zeta电位。这些参数都可以测量纳米激光粒度仪的工具的范围。使用动态光散射DLS )测量粒度。这项技术措施,在散射光的强度随时间变化的波动而发生的,因为粒子进行布朗运动。这些强度波动的分析,可以转换成粒度分布,粒子的扩散系数的测定。

脂质体的测量Zeta电位

一个粒子的zeta电位的整体电荷的粒子在特定介质中获得。一个脂质体的制备zeta电位的知识可以帮助预测在体内的脂质体的命运。 纳米激光粒度仪测量样品的Zeta的潜力是使用激光多普勒测速仪技术。在这种技术中,一对电极施加电压跨,在含有颗粒分散的单元格的任一端。带电粒子被吸引带相反电荷的电极,和他们的速度是衡量其电泳迁移率在单位电场强度表示。这些技术的详细资料,可发现在其他应用程序和技术说明,在马尔文仪器网站。

本应用笔记总结的大小和zeta电位测量阴离子和阳离子脂质体。

实验

脂质体的制备

超声方法制备脂质体。二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)和磷酸盐dipalmitoylphosphatidylglycerol的各种混合物准备一系列的阴离子脂质体如表1详细缓冲液(PBS)。阳离子脂质体的制备DPPC,胆固醇和阳离子表面活性剂的二甲基dioctadecylammonium溴化物(DDAB)总结如表2。在所有情况下,脂质体终浓度分别为4毫克脂质/ ml的PBS。

DPPC和DPPG 见表1。重量在一系列磷酸盐阴离子脂质体的制备缓冲液(PBS )

DPPC(毫克)

DPPG(毫克)

DPPG(摩尔%)

PBS(ML)

19

1

5.2

5

18

2

10.9

5

17

3

17.4

5

16

4

24.6

5

15

5

32.8

5

DPPC,胆固醇和DDAB一系列磷酸盐阳离子脂质体的制备中使用的表2。重量缓冲液( PBS)。

DPPC(毫克)

胆固醇(毫克)

DDAB(毫克)

DDAB(摩尔%)

PBS(ML)

17

2

1

5.6

5

16

2

2

11.8

5

15

2

3

18.6

5

14

2

4

26.1

5

13

2

5

34.6

5

在氯仿中溶解并混合血脂(DPPG溶解在氯仿/甲醇(2:1 V / V)的混合物),由旋转蒸发除去溶剂,在60 ° C至取得一个薄的脂质膜。适当体积的磷酸盐缓冲液(预热在60 ° C)和船只的大力旋转混合器激动multilamellar囊泡(MLV更具)。然后洗澡的MLV更具超声在60 ° C 15分钟产生unilamellar的脂质体。超声后,脂质体样品孵育15分钟,让他们在60 ° C退火。

脂质体的表征

所有的大小和zeta电位测量在纳米激光粒度仪ZS在25 ° C浆纱测量了整齐的脂质体样本,而样本用PBS稀释1 10 zeta电位测量。纳米ZS采用非侵入性的反向散射(NIBS™)光学测量大小。探测角度173 °,使集中,混浊样品的尺寸测量。然而,从样品检测过程中Zeta电位测量的散射光,在12 °的前进角度。因此激光束需要穿透样品,作为一个后果,zeta电位测量样品浓度必须低于用于调整。

结果

阴离子脂质体

粒子的大小和zeta电位测量的各种阴离子脂质体的结果总结于表3。此表显示的Z -平均直径(散射光的强度为基础的平均直径),多分散指数(分布宽度估计),平均zeta电位值获得各种脂质体样品。 Z -平均直径值是3重复上整齐的脂质体样品的测量结果(括号内为标准差)的手段。 Zeta电位值是5(1 10),用PBS稀释样品的重复测量(括号内为标准差)的手段。

表3。Z -平均水平,在纳米的直径,多分散指数值和Zeta在PBS中准备的各种阴离子脂质体MV的潜力。重复测量的标准偏差值显示在括号中。

鼹鼠%DPPG

Z - AV直径在纳米(SD)

分子量分布(SD)

Zeta电位毫伏(SD)

5.2

133.8(0.4)

0.292(0.01)

-9.0(0.64)

10.9

92.3(0.49)

0.269(0.01)

-15.7(1.36)

17.4

107.2(0.20)

0.256(0.01)

-22.5(0.95)

24.6

125.1(0.60)

0.261(0.01)

-27.3(1.29)

32.8

八十九点二(1.39)

0.264(0.01)

-31.4(0.98)

上浆这些阴离子脂质体的准备工作取得的成果表明,准备洗澡超声方法提供类似规模的手段和分布宽度。

Zeta电位和大小值绘在图1摩尔%DPPG功能。数据显示,测量每个脂质体样品的重复和预期的趋势越来越负面被控增加DPPG内容。此外,结果表明,大小是独立的脂质体组成。

图1。Zeta电位和大小值获得的痣%DPPG一系列阴离子脂质体的内容的函数。

阳离子脂质体

表4总结了大小和zeta电位阳离子脂质体系列取得的成果。同样大小的分布相比,阴离子脂质体的准备。图2显示了Zeta电位和获得的摩尔%DDAB的功能,并显示在逐渐增加,正电荷脂质体增加DDAB内容的大小的情节。

表4。Z -平均水平,在纳米的直径,多分散指数值和各种阳离子脂质体的zeta在mV潜力PBS编制。重复测量的标准偏差值显示在括号中。

鼹鼠%DDAB

Z - AV直径在纳米(SD)

分子量分布(SD)

Zeta电位毫伏(SD)

5.6

116.6(1.0)

0.258(0.01)

10.3(0.88)

11.8

95.8(0.36)

0.223(0.01)

20.1(1.36)

18.6

120.3(0.40)

0.266(0.01)

25.9(0.52)

26.1

109.0(1.15)

0.270(0.01)

33.1(2.2)

34.6

一零四点零(0.42)

0.251(0.01)

39.5(1.2)

图2。Zeta电位和大小值作为一个功能的痣%DDAB内容取得了一系列阳离子脂质体

结论

脂质体的物理特征,了解他们是否适合的应用范围具有重要意义。一个脂质体的制备zeta电位的知识可以帮助预测在体内的脂质体的命运。协会与带相反电荷的分子收取的脂质体可以监测测量zeta电位,由此产生的复杂。

纳米激光粒度仪系列产品可作为本应用笔记详细的脂质体的大小和Zeta潜力的快速和可重复的特性。

注:完整的参考文献列表中可以找到源文件。

来源:“尺寸和泽塔纳米的激光粒度仪的阴离子和阳离子脂质体的潜在表征”,由马尔文仪器中的应用注意。

对于这个源的更多信息, 请访问马尔文仪器有限公司(英国)或马尔文仪器(美国 )。

Date Added: May 6, 2005

Last Update: 5. October 2011 20:49

Ask A Question

Do you have a question you'd like to ask regarding this article?

Leave your feedback
Submit