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Determinazione granulometrica da Light Scattering statico
Prescrizioni per le misurazioni di peso molecolare
Risultati
Polimeri
Polisaccaridi
Conclusioni
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Il sistema Zetasizer Nano combina dinamiche, statiche e elettroforetica tecnologie dispersione della luce che consente per la misurazione delle dimensioni delle particelle, il peso potenziale zeta e molecolare.
Determinazione granulometrica da Light Scattering statico
Dispersione della luce statico (SLS) è una tecnica non invasiva utilizzata per la caratterizzazione di macromolecole in soluzione. Un fascio di luce monocromatica è diretto attraverso un campione e l'intensità della luce diffusa con un angolo di 173 ° dalle molecole viene misurato. SLS utilizza la media oraria di intensità della luce diffusa, da cui il peso media di peso molecolare e il secondo coefficiente viriale può essere determinato.
L'intensità della luce diffusa che una macromolecola produce è proporzionale al prodotto del peso medio peso molecolare e la concentrazione della macromolecola. Per le molecole che non mostrano alcuna dipendenza angolare nella loro dispersione, la relazione tra l'intensità della luce diffusa e il loro peso molecolare è data dalla equazione di Rayleigh:
dove K è una costante ottica, R θ è il rapporto di Rayleigh del sparsi per l'intensità della luce incidente, M è il peso medio peso molecolare, A 2 è il secondo coefficiente viriale e C è la concentrazione del campione.
Pertanto, un appezzamento di KC / Rθ contro C dovrebbe essere lineare con un equivalente di intercettare a 1 / M e una pendenza pari al secondo coefficiente viriale A 2. Tale trama è nota come una trama di Debye.
Il secondo coefficiente viriale è una proprietà che descrive la forza di interazione tra la molecola e il solvente. Per i campioni dove A 2> 0, le molecole tendono a rimanere in soluzione. Quando A 2 = 0, la molecola-solvente forza di interazione è equivalente alla molecola-molecola forza di interazione ed il solvente è descritto come un solvente theta. Quando A 2 <0, le molecole tendono a cristallizzare o aggregata.
Ulteriori dettagli della teoria delle determinazioni del peso molecolare da misure statiche dispersione della luce si possono trovare nelle note di altre applicazioni disponibili sul Malvern Instruments sito.
Questa nota applicativa dettagli peso molecolare misurazioni eseguite su varie proteine, polimeri e polisaccaridi sul Nano Zetasizer .
1,08 | 0,980 | -2.37x10 -2 | Campione B | 9,865 | 9,86 | -4 17.51x10 |
Campione C | 102 | 96 | -4 8.25x10 |
Come mostrato nella tabella dei risultati, i pesi molecolari sono calcolate in linea con i valori noti.
I gradienti di ogni trama (secondo i coefficienti del viriale) variano da positivo (polistirolo 9.9KDa) a negativo (standard polistirolo 980Da). Il positivo secondo coefficiente viriale che indica che l'energia di interazione tra ogni polimero e il solvente è più forte l'energia di interazione tra il polimero e se stesso. Mentre il secondo coefficiente viriale negativo indica che le molecole polimeriche non piace toluene come solvente.