Polymrer och Polysaccharides Det Molekylärt Väger Däribland Beslutsamhet av Polymrer, och Polysaccharides som Använder Zetasizeren som Är Nano Från Malvern, Instrumenterar

Täckte Ämnen

Bakgrund
     Partikeln Storleksanpassar Beslutsamhet vid Ljus Spridning för Statisk elektricitet
     Krav För Molekylärt Väger Mätningar
Resultat
     Polymrer
     Polysaccharides
Avslutningar

Bakgrund

De dynamiska Zetasizer Nano Systemsammanslutningarna, statisk elektricitet och electrophoretic ljusa spridningteknologier som möjliggör för mätningen av partikeln, storleksanpassar, den potentiella zetaen, och molekylärt väga.

Partikeln Storleksanpassar Beslutsamhet vid Ljus Spridning för Statisk elektricitet

Är den ljusa spridningen (SLS) för Statisk elektricitet eninvasive teknik som används för att karakterisera macromolecules i lösning. En stråla av monochromatic ljust riktas till och med en ta prov, och styrkan av det ljust spritt på en meta av 173° av molekylarna mätas. SLS gör bruk av deni genomsnitt uppgå till styrkan av spritt lätt, som deti genomsnitt uppgå till molekylärt väger och understöder från virial samverka kan vara beslutsamt.

Styrkan av spritt lätt, att en macromolecule producerar, är proportionell till produkten av det molekylära väga-genomsnittet väger och koncentrationen av macromoleculen. För molekylar, som visar inget vinkelformigt beroende i deras spridning, förhållandet mellan styrkan av spritt lätt, och deras molekylärt väger, ger sig av den Rayleigh likställanden:

var K är en optisk konstant, ärθ R det Rayleigh förhållandet av den spridda styrkan för incidentet lätt, är M det molekylära väga-genomsnittet väger, är2 A det virial samverka för understödja, och C är ta provkoncentrationen.

Därför förväntas en täppa av KC/Rθ kontra C för att vara linjär med en fånga uppmotsvarighet till 1/M och en sluttajämlike till understödja virial samverka A.2 En Sådan täppa är bekant som en Debye täppa.

Det virial samverka för understödja är en egenskap som beskriver växelverkanstyrkan mellan molekylen och vätskan. För tar prov var A2 > 0, molekylarna ansar stag i lösning. När A2 = 0, molekyl-vätskan växelverkanstyrkan är likvärdigt till molekyl-molekylen växelverkanstyrkan och vätskan, beskrivas som vara en thetavätska. När A<02, de ska molekylarna ansar för att kristallisera eller samla.

Specificerar Vidare av teorin av molekylärt väger beslutsamhetar från statisk elektricitet som ljusa spridningmätningar kan finnas i annan applikation noterar tillgängligt från Malvernen Instrumenterar websiten.

Denna applikation noterar specificerar molekylärt väger mätningar som utförs på olika proteiner, polymrer och polysaccharides på den Nano Zetasizeren.

Krav För Molekylärt Väger Mätningar

  • Zetasizer Nano S eller ZS (instrumenterar den införlivade NIBS™-optik),
  • Kvartcuvette
  • Förberedelse av ett nummer av koncentrationer av den okända molekylen (protein eller polymern) i en passande vätska
  • Beslutsamhet av differensen R.I. ökar (dñ/dC). Detta kan endera finnas från litteraturkällor eller mätas genom att använda en passande refractometer. Dñna/dC värderar för klotformiga proteiner, till exempel är 0.185ml/g
  • Mätningen av styrkan av spridningen från ett standart tar prov vars Rayleigh Förhållande är bekant. Denna rekommenderas för att vara toluene, som värdera är bekant på olika våglängder. Till exempel är det Rayleigh förhållandet av toluene på 633nm 1,3522 x 10-5 cm-1
  • Mätningen av styrkan av spridningen från nollkoncentrationen tar prov (om vätskan är olik till toluene),
  • Mätningen av styrkan av spridningen från de olika koncentrationerna av tar prov

Det bör noteras att Zetasizeren som Nano programvara mäter styrkorna av spridd lätt av det förberett tar prov och beräknar automatiskt det molekylärt väger och understöder virial samverka från datan genom att använda en Debye täppa.

Resultat

Polymrer

Figurera shows 1 som singel-meta Debye konspirerar för en serie av polystyrenpolymernormal som är förberedda i toluene och mäter på en Zetasizer Nano S. Det mätte molekylärt väger och understöder virial koefficienter (A2), tillsammans med bekant molekylärt väger värderar, ger sig in bordlägger 1. I varje fall värderar dñna/dC togs för att vara 0.110ml/g.

Figurera 1. Debye täppor för olika polystyrenpolymrer.

Bordlägga 1. Molekylärt väger och understöder virial koefficienter (A2) av olika polystyrenpolymrer som är förberedda i toluene

Polymer

Mätt Molekylärt Väger (KDa)

Anmält Molekylärt Väger (KDa)

2nd Samverka Virial (A2)

Ta Prov A

1,08

0,980

-2.37x10-2

Ta Prov B

9,865

9,86

17.51x10-4

Ta Prov C

102

96

8.25x10-4

Som visat i bordlägga av resultat, väger det beräknade molekylärt är jämnt med det bekant värderar.

Lutningarna av varje täppa (de virial koefficienterna för understödja) varierar från realiteten (polystyrenen 9.9KDa) till negationen (den standarda polystyrenen 980Da). Realiteten understöder virial samverka indikera att växelverkanenergin mellan varje polymer och vätskan är starkare än växelverkanenergin mellan polymern och sig själv. Eftersom negationen understöder virial samverka, indikerar att polymermolekylarna inte gillar toluene som en vätska.

Polysaccharides

Debyen som täppan erhållande från en ta prov av dextran bevattnar in, visas in figurerar 2. Ta prov hade ett anmält molekylärt att väga av 68KDa, och det molekylära väga-genomsnittet väger erhållande från mätningen var 63.3KDa. En dñ/dC värderar av 0.140ml/g användes för mätningarna.

Figurera 2. Den Debye täppan för Dextran bevattnar in.

Den Nano programvaran möjliggör samlingen av partikeln storleksanpassar fördelningsdata genom att använda dynamisk ljus spridning, såväl som evig sanningmätningen av styrka för molekylärt väger analys. Detta möjliggör beslutsamheten av modaliteten av ta prov före molekylärt väger mätning. Detta är viktigt, i att bestämma renligheten av, tar prov före analys. Figurera 3 är styrkan storleksanpassar fördelning erhållande från lagerförakoncentrationen av dextranlösningen (10mg/ml). Ta prov hade en zaveragediameter (den genomsnittliga diametern som baseras på styrkan av spritt lätt) av 13.5nm. Den erhållande monomodal fördelningen bekräftar att det inte fanns någon aggregatgåva. Det molekylärt väger erhållande från ljus spridning väga-i genomsnitt uppgå till, och därför samlar närvaroen av några ska bidrar till denna värderar.

Figurera 3. Styrka storleksanpassar fördelning av dextran bevattnar in (10mg/ml).

Z-genomsnittet diametern av 13.5nm kan vara van vid beräknar ett beräknat molekylärt väger av 64.8KDa som använder en empirisk kalibreringsgraf som framkallas av Malvern, Instrumenterar. Detta molekylärt väger anseende är tillgängligt i den Nano programvaran och är användbart för verifiering av de erhållande experimentella datan.

Avslutningar

Den Nano Zetasizeren är den enda reklamfilmen instrumenterar kapabelt av att mäta storleksanpassa, den potentiella zetaen, och molekylärt väga i en singel, kompakt enhet. Inkorporeringen av NIBS™-optik ger känsligheten som krävs för mätningen av mycket litet, svagt tar prov spridningen, och beslutsamheten av det molekylärt väger. I tillägg möjliggör bruket av backscatterupptäckt mätningen av koncentrerat som är täckande tar prov utan behovet för förtunning.

Källa: ”Molekylärt Väga Beslutsamhetar av Polymrer, och Polysaccharides genom Att Använda Zetasizer det Nano Systemet”, Applikationen Noterar vid Malvern Instrumenterar.

För mer information på denna källa behaga besök Malvern Instrumenterar AB (UK), eller Malvern Instrumenterar (USA).

Date Added: May 6, 2005 | Updated: Jun 11, 2013

Last Update: 13. June 2013 01:51

Ask A Question

Do you have a question you'd like to ask regarding this article?

Leave your feedback
Submit