: : AZoNanotechnology 기사
다루는 주제
배경
단백질의 변성
단백질의 Characterisation에 대한 동적 라이트 산란
단백질 융점
단백질의 녹는점에 영향을 미치는 요인
Malvern Zetasizer 나노 시스템
배경
단백질은 20 개의 아미노산 종류의 수영장에서 세포 내에서 합성 polypeptide 사슬의 구성됩니다. 인조와 무작위 코일 생물 학적 고분자와는 달리, 단백질의 polypeptide 사슬은 성질이 상태에서 독특한 3 차원 구조에 통합됩니다. 이러한 구조는 구조 내에서 아미노산의 측면 체인 사이에 여러 개의 수소 채권의 형성과 함께, 정전기 및 소수성 상호 작용의 결합에 의해 안정화됩니다.
단백질의 변성
단백질이 이러한 반응을 catalysing 작은 분자 또는 이온을 운반 등 생물 학적 시스템 내의 특정 기능을 수행하기 위해 진화했다. 이 기능은 단백질의 구조 내에서 유연성의 큰 학위를 필요로. 따라서 단백질 구조를 안정화 상호 작용 환경 조건의 좁은 범위 내에서 구조를 유지하기 위해 단지 충분하고 있습니다. 솔루션 조건 산도이나 온도, entropically 주도 변성 혹은 빠르게 발생할 수 있습니다 펼쳐 변화를 통해 예를 들어,이 범위의 밖에있다면. 변성이 발생하면, 단백질의 작은 크기는 동일한 분자량의 무작위 코일 폴리머와 일치하는 값으로 증가됩니다. chaotropic의 부재 (집합은 금지) 대리인에 간 고분자 소수성 상호 작용은 빠르게 변성 polypeptide 체인이 아닌 특정 집합을 초래할 수 있습니다. 크기가 이후 변화와 함께 변성 과정의 표현은 그림 1에 표시됩니다.
그림 1. 단백질 변성 과정과 유체 크기의 후속 변경 사항을 상세하게 도식은 단단한 원형의 직경에 의해 지적했다.
단백질의 Characterisation에 대한 동적 라이트 산란
동적 광 산란 (DL을)은 단백질 특성화 도구로 오랫동안 사용되었습니다. DL을에서 입자의 브라운 운동을 측정하고 유체 크기는 스톡 - 아인슈타인 방정식을 사용하여 계산됩니다. DL을의 감도 다른 oligomeric 및 제사기 단백질 상태를 구별하기 위해 충분하고, 이상 denaturing 조건에 단백질 구조의 안정성을 모니터링에 적합합니다.
단백질 융점
단백질 융점 (TM)은 온도에서 단백질 denatures로 정의됩니다. 단백질 변성을 함께 크기의 변화는 쉽게 DL을 기술을 사용하여 식별됩니다. 예를 들어, 그림 2를 고려, 이것은 인산의 Ovalbumin에 대한 온도 의존 Z - 평균 직경 및 산란 강도가 함께 측정 식염수 (PBS) 버퍼 보여줍니다 Zetasizer 나노 ZS를 . 온도에서 71 ° C 이하, 크기와 산란 강도가 안정적인 차 구조를 제안, 상수입니다. 71에 ° C 이상, 크기와 산란 강도 모두 변성 집계의 존재를 나타내는 온도 기하 급수적으로 증가합니다.
PBS에서 Ovalbumin을 위해 그림 2. 융점 추적 및 히스테리 시스.