Malvern 계기에서 Zetasizer Nano 시스템을 사용하는 단백질 융해점 특성

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단백질의 변성
단백질의 특성을 위해 동적인 가벼운 뿌리기
단백질 융해점
단백질의 융해점에 영향을 미치는 요인
Malvern Zetasizer Nano 시스템

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단백질은 폴리펩티드 사슬로, 20가지의 다른 아미노산 모형의 수영장에서 세포 안에서 종합해 구성됩니다. 인공과 무작위 코일 생물학 중합체와 달리, 단백질의 폴리펩티드 사슬은 natured 국가에 있는 유일한 3 차원 구조물로 접힙니다. 이 구조물은 구조물 내의 아미노산의 곁사슬 사이 다중 수소 결합의 대형과 더불어 정전기와 소수성 상호 작용 조합하여, 안정됩니다.

단백질의 변성

단백질은 반응을 촉매 작용을 미치고 작은 분자 또는 이온 수송하기와 같은 생물 체계 내의 특정 기능을 능력을 발휘하기 위하여 발전되었습니다. 이 기능은 단백질의 구조물 내의 융통성의 큰 정도를 필요로 합니다. 따라서, 단백질 구조물을 안정시키는 상호 작용은 환경 조건의 좁은 범위 내의 구조물을 유지하게 다만 충분합니다. 해결책 상태가 PH 온도에 있는 변경을 통해서 이 범위의 이상으로, 예를들면 인 경우에, entropically 몬 변성 또는 전개는 빨리 생길 수 있습니다. 변성이 생길 때, 단백질의 소형은 동일 분자량의 무작위 코일 중합체로 일관된 가치에 증가시킵니다. chaotropic (금지하는 집단) 에이전트이 없을 경우에, 간 중합체 소수성 상호 작용은 변성된 폴리펩티드 사슬의 일반적인 집단으로 빨리 이끌어 낼 수 있습니다. 연속적인 변경과 더불어 변성 프로세스의 대표는, 숫자 1.에서 크기로 보입니다.

단단한 원형의 직경에 의해 표시되는 유체역학 규모 단백질 변성 프로세스 그리고 연속적인 변경을 선발하는 숫자 1. 개략도.

단백질의 특성을 위해 동적인 가벼운 뿌리기

동적인 가벼운 뿌리는 것은 (DLS) 단백질 특성 공구로 오래 사용되었습니다. DLS에서는, 입자의 브라운 운동은 측정되고, 유체역학 규모는 불을 때 아인슈타인 방정식을 사용하여 산출됩니다. DLS의 감도는 다른 oligomeric와 4 개 한조가 되는 단백질 국가를 구별하게 충분하, 조건을 변성시키기에 단백질 구조물의 안정성 감시를 위해 이상적으로 적응됩니다.

단백질 융해점

단백질 융해점 (TM)는 단백질이 변성시키는 온도로 정의됩니다. 단백질 변성을 동반하는 변경은 크기로 DLS 기술을 사용하여 쉽게 확인됩니다. Zetasizer Nano ZS로 측정된 인산염에 의하여 부드럽게 된 염분에 있는 온도에게 의존하는 Z 평균 직경을 및 Ovalbumin를 위한 뿌리 강렬 (PBS) 보여주는 숫자 2를 예를 들면 고려하십시오. 온도에 71°C 보다는 더 적은은, 규모 및 뿌리 강렬 안정되어 있는 삼차 구조를 건의하는 불변의 것 입니다. 71°C에와, 규모 및 변성된 골재의 존재를 표시하는 온도를 가진 강렬 증가를 급격하게 뿌리기 둘 다 더 높은.

PBS에 있는 Ovalbumin를 위한 숫자 2. 융해점 자취 그리고 히스테리시스.

단백질의 융해점에 영향을 미치기 요인

특정 단백질 모형과 관련되었던 아미노산의 유일한 1 차적인 순서 때문에, 융해점은 중요하게 다르 할 수 있습니다. 해결책은, 예를들면 PH와 소금 농도 조절하고, 번역상 수정을 배치합니다, 예를들면 glycosylation에는 또한, 단백질 구조물 및 그러므로 녹는 온도의 안정성에 표시되어 있는 영향이 있을 수 있습니다. 융해점 측정은 그 때 특히 단백질이 제약품 또는 정립으로 통합을 위해 정해진 경우에, 표적 단백질의 총 특성에 있는 중요한 단계입니다. 숫자 3은 PBS에 있는 일련의 단백질을 위한 융해점 자취를 보여줍니다. 자동화된 측정은 각 측정 온도에 1°C 점증형 온도 경사로 그리고 3 작은 평형 시간을 사용하여 Zetasizer Nano ZS, 집합되었습니다.

PBS에 있는 일련의 단백질을 위한 숫자 3. 융해점 자취 그리고 TM 가치.

Malvern Zetasizer Nano 시스템

Malvern 계기에서 Zetasizer Nano ZS는 연구원에게 규모, 분자량 및 zeta 잠재력을 포함하여 견본 속성의 광범위를, 주는 결합한 동 적이고, 정체되는, 및 전기 이동 가벼운 뿌리 측정을 위한 하드웨어 그리고 소프트웨어를 포함하는 첫번째 상업 계기 입니다. 시스템은 특히 전형적으로 콜로이드 응용을 위한 높은 농도 필수품과 더불어 약제와 생체 고분자 응용과, 관련되었던 낮은 사격량과 견본 양 요구에 응하기 위하여 디자인되었습니다. 필수품의 이 유일한 혼합을 만족시키는 것은 비발한 세포 약실의 후방산란 광학계 그리고 디자인의 통합을 통해 달성되었습니다. 이 특징 때문에, 견본 크기를 위한 Zetasizer Nano ZS 논고 및 사격량은 0.6nm에 6um의 규모 범위와 더불어 다른 어떤 상업적으로 이용 가능한 DLS 계기를 위해 그들, 및 40% w/v에 0.1mg/mL 라이소자임의 사격량 범위를 초과합니다. 추가한 상여로, Zetasizer Nano ZS 기계설비는 낙관해 각자이고, 소프트웨어는 유일한 "1개의 제동자" 측정을 포함하고, 분석하고, 새로운 사용자 학습 곡선을 극소화하기 위하여 디자인된 특징을 보고합니다.

Date Added: May 9, 2005 | Updated: Jun 11, 2013

Last Update: 13. June 2013 01:33

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