Malvern의 즉 전기에게 가벼운 뿌리기를 사용하는 â Lactoglobulin의 정전기 집단

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배경
실험
     견본 준비
     입자 크기의 결심
결과

배경

1934년에, Palmer는 처음으로 기술했습니다 둔감한 우유의 유장 조각에서 ß Lactoglobulin (ß Lg)의 별거를. 이 발견은 50 년 실제적인 구조물이 엑스레이 결정학을 통해 설명될 수 있기 전에 했습니다. 이들의 대다수는 열에 의하여 유도된 집단의 주위에 이것이 생활용품의 가공에 중대한 관심사 및 중요성 이기 때문에 센터를 공부합니다. 연구의 년에도 불구하고, ß Lactoglobulin의 특정 기능은 아직 완전하게 이해될 것입니다. 이 일의 목적은 집단이 충분히 느린 비율로 준탄성에게 가벼운 뿌리기에 의하여 평가되기 위하여 생기는 등전자 점의 밑에 낮은 (pI) 이온 세기 (i)와 PH 값에 ß Lg 정전기 집단의 연구 결과를 제공하기 위한 것입니다 (QELS).

실험

견본 준비

시그마 Aldrich에서 구매되고 추가 정화 없이 이용된 ß Lg A&B는 Milli-Q 근해에서 준비된 4.5mM NaCl에서, 녹았습니다. 녹은 ß Lg는 PH 9에 그 때 그것의 단위체 종으로 단백질을 분리하기 위하여 올려졌습니다. 표적 PH 및 4.2와 각각 1mg/mL의 사격량에 결합된 해결책을 가져오기 위하여 0.1M HCl 적합한 양을 포함하는 4.5mM NaCl의 동등한 양은 준비되었습니다. 두 해결책 다 (0.2 µm 필터, Sartorius AG, 독일) 필터되고, 분석 이전에 그 후에 즉각 섞였습니다.

입자 크기의 결심

ß Lg 골재의 크기 분포는 Malvern Zetasizer Nano ZS를 사용하여 결의가 굳었습니다. 상호 관계 시간은 측정 당 실행 그리고 3개의 실행 당 7 초이었습니다. QELS는 50 분 이상 크기 분포를 결정하기 위하여 이용되었습니다.

결과

숫자 1은 시간 (t)에 활동적인 실험 도중 집합된 강렬 크기 분포를 = 0 보여줍니다. 분명한 것과 같이 여기에서, QELS 결과는 그것을 의 2명의 명백한 규모 인구에 있는 ß Lg 골재 거의 즉각 표시합니다.

시간에 PH 4.2에 4.5mM NaCl에 있는 1mg/mL ß Lg를 위한 숫자 1. 강렬 크기 분포 = 0.

소형 인구는 5.4nm circa의 유체역학 직경이 있습니다. 알려진 질량을 사용하여 대 방정식 1에서 보인 공 모양 단백질을 위한 규모 관계, 5.4nm 단백질의 분자량은 ß Lg 단백질의 dimeric 양식으로 일관된 대략 35 kDa 입니다.

실험을 위한 활동적인 자취는 실험적인 시간의 기능으로 강렬 그리고 Z 평균 직경을 보여주는 숫자 2에서 보입니다.

숫자 2. PH 4.2에 4.5mM NaCl에 있는 1.0mg/mL ß Lg의 활동적인 자취.

뿌리 강렬은 분자량의 사격량 그리고 사각에 거의 비례하고, 그러므로 고위 골재의 대형에 확실히 과민합니다. Z 평균 직경은 입자의 종합적 효과의 비열한 직경이고, 상관 함수 (Cumulants 방법)의 linearized 양식의 사면에서 파생됩니다. 숫자 2에서 볼 수 있는 것처럼, 고위 골재의 대형은 실험의 첫번째 20-25 분에서 생깁니다. 장시간에, 뿌리 강렬은 상대적으로 일정하, 이합체 골재 평형이 달성되었다는 것을 건의하. 장시간에 고위 골재의 안정화는 또한 활동적인 실험에서 선정한 강렬 크기 분포를 보여주는 숫자 3에서 분명합니다.

숫자 3.는 ß Lg 활동적인 실험에서 강렬 크기 분포를 선정했습니다.

이합체 상대적인 양에 있는 감소는 또한 실험의 시간 과정에 관찰되었습니다. 숫자 1에서 보인 처음 조건에, 이합체 농도는 뿌리 강렬의 80%의 비율이었습니다. 실험적인 실행의 결말에, 이합체를 거쳐 강렬을 뿌리기에 기여금은 합계의 대략 10%에 안정시켰었습니다 (숫자 4)를 보십시오. 숫자 4에서 볼 수 있는 것처럼, 최고 골재의 강렬과 규모 안정화를 뿌리기에 있는 증가는 또한 한동안 보일 수 있었습니다. 궁극적으로 대략 425nm에 안정되는 골재의 규모에서 실행 도중 20%에서 90%까지, 증가되는 골재의 뿌리기 강렬.

PH 4.2에 4.5mM NaCl에 있는 ß Lg를 위한 숫자 4. 시간에 의존하는 강렬 크기 분포.

주: 참고의 완전 목록은 원본을 나타나서 유효합니다.

근원: "β Lactoglobulin의 집단", Malvern 계기에 의하여 응용 주.

이 근원에 추가 정보를 위해 Malvern 계기 주식 회사 (UK) 또는 Malvern 계기 (미국)를 방문하십시오.

Date Added: May 9, 2005 | Updated: Jun 11, 2013

Last Update: 13. June 2013 01:33

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