Malvern Zetasizer ZS를 사용하는 단백질 Polyelectrolyre 복합물의 단백질 고분자 전해질 복합물 그리고 특성

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단백질 고분자 전해질 착물화를 제어하는 상호 작용은 단백질 정화의 응용 범위에 있는 많은 연구 결과의 주제, 효소 동원정지, immunosensing, 및 계속 bioactive 센서입니다. 이 연구 결과는 또한 단백질을 DNA 묶는 생물 체계의 이해를, 상호 작용의 일반적인 물리 화학이 저장, 복제 및 녹음방송 기계장치의 연구 결과에 종속된 예를 들면, 필드 보조합니다. 이 응용 주는 단백질 고분자 전해질 복합물의 특성을 위한 Malvern Zetasizer Nano ZS의 사용을 강조합니다 (PPCs).

실험

이 연구 결과에서 검토된 PPC 시스템은 4.8의 등전자 점과 더불어 (BSA) 둔감한 혈청 알부민으로 (pI), 구성되고, 관례는 60% 2-acrylamido-2-methylpropanesulfonate와 40% 아크릴아미드 (AMPS60Aam40)의 음이온 공중 합체를 종합했습니다. 단백질 고분자 전해질 해결책은 PH 8.5에 NaCl 250 mM에 있는 고분자 전해질에 단백질의 5:1 질량 비율에 준비되었습니다. 필터된 해결책 (0.22 mm Sartorius)의 동적인 가벼운 뿌리 측정은 PH 8.5에서 PH 4.2에 0.2 PH 부대 간격으로 Zetasizer Nano ZS 시스템으로 집합되었습니다. 강렬 크기 분포에 측정한 상호 관계 곡선의 풀어내기는 음이 아닌 최소 제곱법 산법을 사용하여 달성되었습니다.

결과

숫자 1은 PH 8.5에 BSA, AMPS60AAm40 및 복합물을 위한 강렬 크기 분포를 보여줍니다. 이 PH에, 단백질에 음전하는 polyanion를 가진 착물화를 금지하게 충분합니다. 단백질의 장엄한 미사 사격량 그리고 공 모양 본질 때문에, 해방되는 polyanion는 단백질의 면전에서 검출될 수 없습니다.

PH 8.5에 NaCl 250 mM에 있는 BSA, AMPS60Aam40, PAMPS80 및 BSA-AMPS60AAm40 혼합물을 위한 숫자 1. 강렬 크기 분포.

단백질 고분자 전해질 복합물을 위한 Z 평균 직경의 PH 미결은 PH 5.0 circa에 기준선에서 편차를 표시하는 숫자 2에서 보입니다. Z 평균 규모는에서 강렬 자기 상관 함수의 Cumulants 또는 단 하나 지수 적합을 파생된 강렬 무겁게 한 평균 직경 입니다. 숫자 2에서 보인 선형성에서 편차는 단백질 고분자 전해질 혼합물의 전형적이고, 1개가 처음 복잡한 대형 (pHc)의 PH를 정의하는 것을 허용합니다. PH 5에, 그물 BSA 책임은 부정적입니다. 따라서, PH 5.0에 polyanion에 BSA의 바인딩은 단백질 polyelectrolye 상호 작용이 현지 이다는 것을, 건의합니다 단백질의 표면에 마이너스로 충전된 중합체와 양전하 패치 사이에서.

숫자 2. NaCl 250 mM에 있는 BSA-AMPS60AAm40의 Z 평균 직경의 PH 미결.

숫자 3은 PH ¡ Ü pHc를 위한 단백질 고분자 전해질 복합물을 위한 강렬 크기 분포를 보여줍니다. 숫자 3에서 볼 수 있는 것처럼, 이항 배급은 명확하게 착물화의 개시에 눈에 보입니다. 8 nm의 명백한 직경과 더불어 더 단단 확산 최빈값은, BSA를 해방하기 위하여 대응합니다. 75 nm circa에 더 느린 확산 최빈값은 자유로운 고분자 전해질의 그것과 대략 동일하 명백한 규모와 더불어 단백질 중합체 복합물을, 나타냅니다. PH가 줄 대로, 자유로운 BSA의 상대적인 뿌리기 강렬에 있는 감소와 함께 가치를 낮추는 복잡한 피크 교대의 명백한 규모. 자유로운 단백질의 상대적인 뿌리 강렬에 있는 이 감소는 PH 감소가 단백질 바인딩과 복잡한 대형에 있는 증가로 이끌어 낸다는 것을 건의합니다.

PH ¡ Ü pHc를 위한 BSA-AMPS60AAm40 복합물을 위한 숫자 3. 강렬 크기 분포.

주: 참고의 완전한 세트는 원시 문서를 나타나서 찾아낼 수 있습니다.

근원: "단백질 고분자 전해질 복합물의 특성", Malvern 계기에 의하여 응용 주.

이 근원에 추가 정보를 위해 Malvern 계기 주식 회사 (UK) 또는 Malvern 계기 (미국)를 방문하십시오.

Date Added: May 12, 2005 | Updated: Jun 11, 2013

Last Update: 13. June 2013 01:33

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