20% off DeltaTime Fluorescence Lifetime System Upgrade

There are 2 related live offers.

Horiba - DeltaTime - 20% Off | DeltaTime TCSPC Half Price | See All
Related Offers

Karakterisering van Avidin van de Biotine Systeem voor Gebruik van Biologisch Materialen die door Spectroscopische Ellipsometry Apparatuur van Wetenschappelijke Horiba Met Behulp Van - Dunne Film

Besproken Onderwerpen

Achtergrond
Hoe Werkt Biosensor?
Inleiding aan het Avidin van de Biotine Systeem
Experimenteel
Karakterisering van CSI/Biotine
Karakterisering van CSI/Complexe biotine-Avidin
Conclusie

Achtergrond

De analyse van moleculaire interactie is een zeer belangrijk onderzoeksgebied op de gezondheidszorg, geneesmiddel en biotechnologiegebieden. De Moleculaire erkenning aan stevige oppervlakten vormt de basis van een groot aantal bio en immunosensor kenmerkende apparaten.

Biosensor is een analytisch apparaat dat biologische molecules gebruikt om andere biologische molecules of chemische substanties te ontdekken. Typisch moet de detectormolecule met een sensor worden verbonden die door een computer kan worden gecontroleerd, die de biologische systemen met de rekencapaciteit van de microprocessor ombouwt.

Hoe Werkt Biosensor?

Biosensor bestaat uit 3 delen:

  • Het gevoelige biologische element (biologisch materiaal b.v. weefsel, micro-organismen, organellen, celreceptoren, enzymen, antilichamen, nucleic zuren enz.), biologisch afgeleide materieel of biomimic). De gevoelige elementen kunnen door biologische techniek worden tot stand gebracht.
  • De omvormer binnen - tussen (vennoten beide componenten).
  • Het detectorelement (de werken op een fysico-chemische manier; optisch, piezoelectric, elektrochemisch, thermometrisch, of magnetisch).

 

Figuur 1. Schematisch diagram die de belangrijkste componenten van biosensor tonen. Dit apparaat bestaat uit: (a) een biocatalisator die het substraat in product omzet; (b) de omvormer die de reactie bepaalt en het in elektro omzet; en de signaaloutput is (c) vergroot, (d) verwerkt, en (e) getoond.

Inleiding aan het Avidin van de Biotine Systeem

Er zijn velen potentiële toepassing van biosensors van diverse types. De belangrijkste eisen ten aanzien van een biosensor benadering in termen van onderzoek en commerciële toepassingen waardevol te zijn zijn de identificatie van een doelmolecule, beschikbaarheid van een geschikt biologisch erkenningselement, en het potentieel voor beschikbare draagbare opsporingssystemen aan gevoelige op laboratorium-gebaseerde technieken in sommige situaties de voorkeur te hebben. Sommige voorbeelden worden gegeven hieronder: glucose controle in diabetespatiënten <-- historische marktbestuurder, andere medische doelstellingen met betrekking tot de gezondheid, milieutoepassingen b.v. de opsporing van pesticiden en verontreinigende stoffen van het rivierwater, het verre ontdekken van bacteriën in de lucht b.v. in tegen-bioterroristactiviteiten, opsporing van ziekteverwekkers…

Het belangrijkste doel in de ontwikkeling van dergelijke apparaten is de immobilisatie van proteïnen op het omvormerelement zodat om maximum biochemische activiteit en minimum niet specifieke interactie te houden.

Avidin is een glycoproteïne in eiwit wordt gevonden dat. De Biotine is een lid van de B-Vitamine familie, als vitamine-h ook wordt bekend dat.

Speelt het biotine-avidin systeem een belangrijke rol in deze toepassingen aangezien het hoogst specifieke en sterke bindende affiniteit tentoonstelt. Een Ander distinctief voordeel van dit systeem is de vier identieke bandplaatsen van avidin voor biotine ervoor zorgend dat de band slechts aan het doel van belang wordt geleid.

De Adsorberende biotine op stevige oppervlakten en het assembleren avidin maakt het mogelijk om actieve ligands aan de biosensor oppervlakte vast te maken, daardoor zich identificeert richt species in de steekproef en het verhogen van de selectiviteit van biosensor door interferenties van niet-specifieke interactie te verminderen.

Figuur 2. Schema van de vorming van het complexe biotine-avidin

Wanneer de specifieke species in contact met de avidin/biotineoppervlakte komen en aan het binden is er een verhoging van de dikte van de gedeponeerde film. Door een verhoging van de filmdikte te meten kan men vertellen als een biomolecule aan de sensoroppervlakte heeft gebonden. De dikteverhoging is klein, typisch van ongeveer 20 Å, vereisend een gevoelige en betrouwbare techniek voor de meting.

Zulk een techniek is Spectroscopische Ellipsometry (SE), een niet destructieve en zeer nauwkeurige techniek om uiterst dunne lagen te ontdekken evenals de interactie te onderzoeken die bij de vaste-vloeibare stofinterface kunnen gebeuren. Een belangrijk voordeel van de techniek is dat de onderzoeken in omringende lucht, vloeibaar of vacuümmilieu kunnen worden gemaakt.

Experimenteel

De Ellipsometrische gegevens werden verzameld schuin van weerslag van 70° gebruikend UVISEL Spectroscopische Fase Gemoduleerde Ellipsometer van Horiba Wetenschappelijk over de spectrale waaier 260-830 NM. De combinatie van de technologie van de fasemodulatie van UVISEL en zijn modulair ontwerp maakt tot het een krachtig hulpmiddel voor biofilmmeting.

Karakterisering van CSI/Biotine

Een biotinefilm werd gedeponeerd op het siliciumsubstraat en wordt vertegenwoordigd door één enkele laag. De meting werd uitgevoerd in omringend luchtmilieu, wordt de steekproef eenvoudig geplaatst op het steekproefstadium om de niet destructieve meting uit te voeren.

Figuur 3. De Optische Constanten van de Biotine

Karakterisering van CSI/Complexe biotine-Avidin

De meting werd uitgevoerd in een vloeibaar milieu; de steekproef wordt in een vloeibare die cel geplaatst met gedemineraliseerd water wordt gevuld. Één enkele laag werd gebruikt om de steekproef te modelleren. Wij maakten de hypothese dat r.i van de complexe biotinefilm en het biotine-avidin het zelfde was. De verhoging van de gevonden dikte toont de sterke bindende affiniteit van het biotine-avidin systeem.

De figuur toont hieronder de uitstekende overeenkomst tussen de experimentele gegevens en het model.

 

Figuur 4. Experimentele en geproduceerde gegevens

Conclusie

Deze toepassingsnota illustreert de geschiktheid van UVISEL Spectroscopische Fase Gemoduleerde Ellipsometer als zeer nauwkeurig instrument voor het bestuderen van stevige/stevige of stevige/vloeibare interfacereacties, en meting van biofilmdikte.

Bron: Wetenschappelijke Horiba - de Afdeling van Dunne Films

Voor meer informatie over deze bron te bezoeken gelieve Wetenschappelijke Horiba - de Afdeling van Dunne Films

Date Added: May 22, 2008 | Updated: Jun 11, 2013

Last Update: 13. June 2013 17:43

Ask A Question

Do you have a question you'd like to ask regarding this article?

Leave your feedback
Submit