:: AZoNanotechnology Pasal
.jpg)
Topik Covered
Pengantar
Integrasi Atomic Force Microscope Mikroskop Cahaya dan terbalik
CoverslipHolder dan Biocell Dirancang untuk Mengoptimalkan Kualitas Gambar
Piezos di JPK Instrumen
Pengujian Kalibrasi Gambar Optik
Kesimpulan
Pengantar
Kekuatan mikroskop atom (AFM) dan mikroskop optik, khususnya di mikroskop fluoresensi, membuat kombinasi yang kuat dalam studi sampel biologis. AFM tidak tunduk pada batas resolusi Abbe, dan dapat menghasilkan gambar dengan resolusi lebih tinggi dari mikroskop cahaya. Namun, sebagai kontras yang dihasilkan dalam menanggapi sifat struktural dari sampel, dapat menantang untuk mendeteksi struktur tertentu dalam sampel heterogen, seperti sel. Dengan menggabungkan dua teknik, lebih tinggi resolusi informasi struktural dapat dihasilkan dengan menggunakan AFM. Korelasi selanjutnya dengan spidol fluorescently berlabel dapat memberikan informasi tentang komposisi, dan akibatnya fungsi, struktur diidentifikasi.
Integrasi Atomic Force Microscope Mikroskop Cahaya dan terbalik
Desain dari NanoWizard ® dan NanoWizard ® II AFM dari JPK adalah sedemikian rupa sehingga mikroskop atom ini diintegrasikan menjadi sebuah mikroskop cahaya terbalik, tanpa mempengaruhi fungsinya. Hal ini memungkinkan pencitraan AFM untuk digabungkan dengan teknik kontras termasuk fase kontras, DIC, laser scanning confocal dan mikroskop TIRF. Sebuah faktor penting dalam keberhasilan integrasi ini adalah bahwa instrumen JPK yang ujung-scanner. Artinya, selama AFM pencitraan sampel diadakan masih, sementara ujung bergerak dalam mode raster di atas permukaan untuk membangun citra tersebut. Dalam kasus sampel-scanning instrumen, sampel yang akan dicitrakan terus bergerak dalam gambar mikroskop optik sementara AFM pemindaian berlangsung, yang berarti bahwa pencitraan simultan sejati bukanlah benar-benar mungkin (gambar 1).
.jpg)
Gambar 1. Tip scanner pemindai vs sampel. Akuisisi gambar epifluorescent selama akuisisi gambar AFM dengan scanner ujung (A) dan scanner sampel (B). Sebagai sampel bergerak dalam (B) struktur neon tidak lagi dapat dicitrakan tanpa mengolesi. Sel yang sama ditunjukkan pada kedua gambar.
CoverslipHolder dan Biocell Dirancang untuk Mengoptimalkan Kualitas Gambar
Sementara fitur desain hardware ini adalah awal menyediakan integrasi sejati ada juga faktor lain yang perlu ditangani. Yang pertama adalah pemegang sampel yang digunakan. Sebagai AFM dan mikroskop optik teknik fundamental berbeda (yang satu didasarkan pada interaksi fisik dan yang lain di difraksi cahaya) ada persyaratan yang berbeda untuk mendukung sampel yang efektif. Untuk akuisisi gambar berkualitas tinggi optik, terutama dengan lensa perbesaran tinggi (63x dan 100x) itu yang terbaik adalah menggunakan sangat tipis menutup-kaca dengan ketebalan sekitar 170 pM.