Rappresentazione del DNA con Alta Precisione Facendo Uso di EasyScan 2 FlexAFM da Nanosurf

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Sfondo
Introduzione
Scoperta di DNA
Soluzione della Struttura di DNA
Strumenti Utilizzati
DNA di Rappresentazione

Sfondo

Nanosurf è un fornitore principale dei microscopi atomici di facile impiego della forza (AFM) e dei microscopi di traforo di scansione (STM). I Nostri prodotti e servizi si fidano di dai professionisti universalmente per aiutarli per misurare, analizzare e presentare a 3D le informazioni di superficie. I Nostri microscopi eccellono con la loro progettazione compatta ed elegante, la loro manipolazione facile e la loro affidabilità assoluta.

Introduzione

Molto prima della scoperta di acido desossiribonucleico (DNA), l'umanità ha osservato che determinate caratteristiche umane sono passate sopra dai genitori alla loro prole. A lungo questo concetto è stato usato per gli animali da riproduzione o le piante di coltivazione con le caratteristiche distintive. La scienza dietro i trattamenti ereditari, tuttavia, rimarrebbe sconosciuta per un po 'di tempo.

Nel 1865, Gregor Mendel ha scoperto che i tratti ereditati seguono determinate norme. Il lavoro di Mendel in gran parte è stato trascurato fino a riscoprirlo nell'inizio del XX secolo da Hugo de Vries e da Carl Correns. Questa riscoperta del lavoro di Mendel ha gettato la base per la genetica moderna ed il concetto dei geni come particelle elementari di informazioni ereditarie.

Scoperta di DNA

Il DNA è stato trovato per essere il materiale che il codice genetico è stato scritto dentro. Sebbene la sua composizione sia analizzata nella fase iniziale, l'organizzazione esatta e la struttura dimensionale 3 di DNA erano un argomento altamente dibattuto. Non era fino al 1953, quando James Watson ed il Torcicollo di Francis hanno formulato il loro modello dell'doppio elica, che la struttura reale di DNA e del mistero del codice genetico è stata risolta. Il DNA è una catena del polimero che memorizza le informazioni ereditarie ed è composto di due fili di ripetizione degli elementi (nucleotidi) che profilatura in una doppia elica. Il codice genetico è incluso nella sequenza di piccoli gruppi di tre nucleotidi. Secondo l'organismo, le molecole del DNA contengono fino alle centinaia di milioni di nucleotidi e possono quindi essere dovunque fra parecchi micrometri (batteri) ed i metri (mammiferi) di lunghezza.

Soluzione della Struttura di DNA

I dati di Diffrazione ai raggi X di Rosalind Franklin hanno fatto una parte importante nella soluzione della struttura di DNA e questa tecnica rimane anche oggi importante, dove la Cristallografia a raggi x e la microscopia elettronica sono gli strumenti principali utilizzati al DNA di immagine all'alta risoluzione. Recentemente, tuttavia, le tecniche di scansione della sonda hanno assunto l'importanza dovuto il loro alto rapporto di segnale/disturbo, l'assenza di necessità per cristallizzare il DNA prima della rappresentazione e la possibilità per studiare le interazioni proteina-DNA ed i trattamenti mentre accadono.

Strumenti Utilizzati

Tutte Le misure sono state realizzate con un Nanosurf 2 easyScan FlexAFM (intervallo di scansione di 100 µm) di gestione nel modo Dinamico in aria

DNA di Rappresentazione

La Microscopia Atomica della Forza (AFM) è usata al DNA di immagine con alta precisione e nelle circostanze fisiologiche. Per essere imaged dal AFM, i campioni devono essere vincolati su una superficie piana. Negativamente - la spina dorsale fatta pagare del DNA può essere utilizzata per immobilizzazione sui substrati fatti pagare per mezzo di interazioni elettrostatiche. La mica Di Recente fenduta del moscovita è usata spesso a questo fine. I cationi Bivalenti possono essere usati come ponte per vincolare le molecole fatte pagare del DNA sulle superfici della mica. I cationi usati dovrebbero essere solubili nell'acqua e nella legatura strettamente sia alla spina dorsale del DNA che alla mica. Il Nichel (Ni)2+ ed il magnesio (Mg)2+ hanno queste caratteristiche e sono quindi usati spesso. Dopo il DNA ed i cationi hanno adsorbito sulla mica, la superficie è lavato, asciugato ad aria e subito imaged.

Figura 1. Ha Linearizzato il DNA del Plasmide (pGem7zf+ da Promega) adsorbito sulla mica del moscovita. L'area di scansione di Immagine corrisponde 2 al µm del × 2 del µm.

Figura 2. Primo Piano dello stesso DNA sul preparato della mica. L'area di scansione di Immagine corrisponde al × 250 nanometro di 250 nanometro.

Sorgente: Nanosurf

Per ulteriori informazioni su questa sorgente visualizzi prego Nanosurf

Date Added: Mar 24, 2009 | Updated: Jun 11, 2013

Last Update: 13. June 2013 21:03

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