DNA de imagens com alta precisão usando EasyScan 2 FlexAFM de Nanosurf

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Temas Abordados

Fundo
Introdução
Descoberta do DNA
Resolver a estrutura do DNA
Os instrumentos utilizados
Imagem DNA

Fundo

Nanosurf é um fornecedor líder de easy-to-use microscópios de força atômica (AFM) e microscópios de tunelamento (STM). Nossos produtos e serviços são confiáveis por profissionais de todo o mundo para ajudá-los a medir, analisar, e informações de superfície presentes em 3D. Nossos microscópios excel através do seu design compacto e elegante, o seu fácil manuseio e sua confiabilidade absoluta.

Introdução

Muito antes da descoberta do ácido desoxirribonucléico (DNA), a humanidade observado que certas características humanas são passados de pais para seus filhos. Durante muito tempo este conceito foi usado para criação de animais ou cultivo de plantas com características distintas. A ciência por trás dos processos hereditários, no entanto, permanecem desconhecidos por algum tempo.

Em 1865, Gregor Mendel descobriu que traços herdados seguir certas regras. Trabalho de Mendel foi amplamente ignorado até que foi redescoberto no início do século 20 por Hugo de Vries e Carl Correns. Esta redescoberta do trabalho de Mendel lançou as bases para a genética moderna eo conceito de genes como blocos de construção da informação hereditária.

Descoberta do DNA

DNA foi encontrado para ser o material que o código genético foi escrito dentro Embora sua composição foi analisada no início, a organização exata e 3-dimensional estrutura do DNA foi um tema muito debatido. Não foi até 1953, quando James Watson e Francis Crick formulou seu modelo de dupla hélice, que a estrutura real de DNA eo mistério do código genético foi resolvido. DNA é uma cadeia polimérica que armazena informações hereditárias, e é composto de duas vertentes de elementos que se repetem (nucleotídeos) que são dobradas em uma dupla hélice. O código genético é incorporado na seqüência de pequenos grupos de três nucleotídeos. Dependendo do organismo, as moléculas de DNA conter até centenas de milhões de nucleotídeos, e pode, portanto, ser em qualquer lugar entre vários micrômetros (bactérias) e metros (mamíferos) de comprimento.

Resolver a estrutura do DNA

Dados difração de raios X de Rosalind Franklin tem desempenhado um papel importante na resolução da estrutura do DNA, e esta técnica continua a ser importante até hoje, onde cristalografia de raios X e microscopia eletrônica são as principais ferramentas utilizadas para DNA imagem em alta resolução. Recentemente, no entanto, as técnicas de varredura por sonda ganharam importância devido à sua alta relação sinal-ruído, a ausência de uma necessidade de cristalizar o DNA antes da imagem, ea possibilidade de estudar interações DNA-proteína e processos à medida que ocorrem.

Os instrumentos utilizados

Todas as medições foram realizadas com um EasyScan Nanosurf 2 FlexAFM (100 faixa de varredura mm) operado em modo dinâmico no ar

Imagem DNA

Microscopia de Força Atômica (AFM) é usada para DNA de imagem com alta precisão e em condições fisiológicas. A fim de ser fotografada pela AFM, as amostras devem ser imobilizada em uma superfície plana. A espinha dorsal de carga negativa do DNA pode ser utilizada para imobilização sobre substratos cobrados por meio de interações eletrostáticas. Recém-clivada mica muscovita é frequentemente utilizado para este fim. Cátions bivalentes pode ser usado como uma ponte para imobilizar moléculas de DNA em superfícies carregadas mica. Os cátions utilizados devem ser solúvel em água e se ligam fortemente a ambos a espinha dorsal do DNA e para a mica. Níquel (Ni ^{2 +)} e magnésio (Mg ^{2 +)} tem essas características e por isso são usadas frequentemente. Após o DNA e os cátions têm adsorvido na mica, a superfície é lavada, seca ao ar, e prontamente com imagens.