ДНК-изображений с высокой точностью Использование EasyScan 2 FlexAFM от Nanosurf

:: AZoNanotechnology статьи

Рассматриваемые вопросы

Фон
Введение
Открытие ДНК
Решение Структура ДНК
Инструменты, используемые
Изображениями ДНК

Фон

Nanosurf является ведущим поставщиком простой в использовании атомно-силовых микроскопов (АСМ) и сканирующих туннельных микроскопов (СТМ). Наши продукты и услуги пользуются доверием специалистов по всему миру, чтобы помочь им измерения, анализа и представления информации 3D поверхности. Наши микроскопы превосходят по своим компактным и элегантным дизайном, их удобство в обращении, и их абсолютная надежность.

Введение

Задолго до открытия дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), человечество заметили, что определенные человеческие качества передаются от родителей к потомству. Долгое время эта концепция была использована для разведения животных и культивирования растений с отличительными характеристиками. Наука за наследственные процессы, однако, остаются неизвестными в течение достаточно долгого времени.

В 1865 году Грегор Мендель обнаружил, что унаследовал черты следовать определенным правилам. Работы Менделя в значительной степени игнорировались, пока она была вновь открыта в начале 20 века Гуго де Фриза и Карл Корренсом. Это повторное открытие работы Менделя заложили основу для современной генетики и концепции генов в качестве строительных блоков наследственной информации.

Открытие ДНК

ДНК было установлено, что материал, генетический код был написан дюйма Хотя его состав был проанализирован на ранней стадии, точную организацию и 3-мерной структуры ДНК была очень обсуждаемой темой. Он не был до 1953 года, когда Джеймс Уотсон и Фрэнсис Крик сформулировали свои двойной спирали модели, то реальной структуры ДНК и тайны генетического кода была решена. ДНК представляет собой полимерную цепь которая хранит наследственную информацию, и состоит из двух нитей повторяющихся элементов (нуклеотидов), которые складываются в двойной спирали. Генетический код встроен в последовательности небольших группах из трех нуклеотидов. В зависимости от организма, молекулы ДНК содержат до сотни миллионов нуклеотидов, и поэтому может быть где-то между нескольких микрометров (бактерии) и метров (млекопитающих) в длину.

Решение Структура ДНК

Рентгеноструктурного анализа данных Розалинд Франклин сыграл важную роль в решении структуру ДНК, и эта технология остается важным, даже сегодня, когда рентгеновской кристаллографии и электронной микроскопии основных инструментов, используемых для изображения ДНК с высоким разрешением. Однако в последнее время методы сканирования зонд приобрели значение в связи с их высоким отношением сигнал-шум, отсутствие необходимости кристаллизоваться ДНК до обработки изображений и возможность изучить белок-ДНК взаимодействий и процессов, как они происходят.

Инструменты, используемые

Все измерения проводились с Nanosurf easyScan 2 FlexAFM (100 мкм сканирования диапазона) работает в динамическом режиме в воздухе

Изображениями ДНК

Атомно-силовой микроскопии (АСМ) используется для изображения ДНК с высокой точностью и в физиологических условиях. Для того, чтобы быть отображены с помощью АСМ, образцы должны быть иммобилизованным на плоскую поверхность. Отрицательно заряженных основой ДНК могут быть использованы для иммобилизации на заряженных субстратов с помощью электростатических взаимодействий. Свежесколотая мусковит часто используется для этой цели. Двухвалентных катионов могут быть использованы в качестве моста для иммобилизации заряженные молекулы ДНК на слюде поверхностей. Катионов использоваться, должны быть растворимы в воде и плотно связывают как основа ДНК и слюды. Никель (Ni ^{2 +)} и магния (Mg ^{2 +)} эти характеристики, и поэтому часто используется. После ДНК и катионов адсорбированные на слюду, поверхность промывают, сушат на воздухе, и тут же образ.

Рисунок 1. Линеаризованные плазмидной ДНК (pGem7zf + от Promega) адсорбируются на мусковит. Область сканирования изображения соответствует 2 мкм × 2 мкм.

Рисунок 2. Крупный план одного и того же ДНК по подготовке слюды. Область сканирования изображения соответствует 250 нм х 250 нм.

Источник: Nanosurf

Для получения дополнительной информации на этот источник пожалуйста, посетите Nanosurf