Karakterisering van Grootte Nanoparticle en Staat Voorafgaand aan Studies Nanotoxicological die het Volgen Nanoparticle Analyse Gebruiken

Door AZoNano

Besproken Onderwerpen

Inleiding
Methodes en Materialen
     Menselijk Plasma
     Deeltjes
Resultaten
Bespreking
Conclusies

Inleiding

Alvorens om het even welke nanotoxicological studie te beginnen, is het noodzakelijk om de staat van gebruikte nanoparticles, en in het bijzonder hun grootte en groottedistributie in een aangewezen testmedia te kennen.

NanoSight heeft een uniek instrument voor het kenmerken nanoparticles in vloeibare opschorting ontwikkeld. Deze nota bespreekt de toepassing van dit instrument in de karakterisering van goud nanoparticles en hun complexen in een biologisch relevante vloeistof. In Tegenstelling Tot klassieke het lichte verspreiden zich technieken, de staan het Volgen van Nanoparticle en (NTA) techniek van de Analyse nanoparticles om in opschorting op deeltje-door-deeltje basis worden gerangschikt toe, die hogere resolutie een toestaat en daarom beter begrip van samenvoeging dan ensemblemethodes (zoals zich het Dynamische Lichte Verspreiden, DLS). De studie bekijkt de verandering in grootte van goud nanoparticles vergelijkend het geval van het standaardverspreideroplosmiddel (citraatbuffer) bij een verdund plasma dat (proteïnen bevat).

Methodes en Materialen

Menselijk Plasma:

Het Bloed werd genomen uit schijnbaar gezonde donors. De buizen werden gecentrifugeerd, voor 5 min bij 800 RCF om het rood en de leucocytten te korrelen. De bovendrijvende substantie (het plasma) overgebracht=werd= naar geëtiketteerde buizen en werd opgeslagen bij -80°C. Op het ontdooien werd het plasma gecentrifugeerd opnieuw voor 3 min bij kRCF 16.1 om de aanwezigheid van rood en leucocytten verder te verminderen. De bovendrijvende substantie werd overgebracht naar een nieuw schip, dat zorg neemt om de korrel niet te storen.

Deeltjes:

De goudstandaard NIST nanoparticles van 60 NM werd gebruikt (NIST verwijzingsmateriaal 8013). Deze werden opgeslagen, voorbereid en werden werden gebruikt volgens de relevante rapporten van onderzoek. Het goud werd verdund aan een concentratie van ongeveer 108 particles/ml gebruikend standaardcitraatbuffer van pH=7.19. Voor de verspreiding in plasma, was het menselijke plasma verdund 1:1000000 in citraatbuffer, en 10 µl van goud werden nanoparticles verdund met 790 µl van het verdunde plasma.

Het Volgen en Analyse van Nanoparticle werden uitgevoerd op een NanoSight LM10. Alle steekproefvoorbereiding en metingen werden uitgevoerd bij Universitaire Universiteit Dublin, werden Ierland en de analyse uitgevoerd door NanoSight gebruikend een bètaversie van software NTA 2.0. De Veelvoudige video's, elke 166s lang, werden geregistreerd en werden geanalyseerd in partijen om statistische onveranderlijkheid te verzekeren. Gezien het plasma een natuurlijk Ionisch middel is, merkt men op dat de kwestie van eiwitsamenvoeging altijd problematisch zal zijn.

Figuur 1. Het LM10 Instrument NanoSight.

Figuur 2. Video beeld van 60 NM Gouden deeltjes zoals die door het LM10 instrument NanoSight wordt gevangen.

Resultaten

De Video's van nanoparticles werden geregistreerd (Figuur 2), gevolgd en werden werden geanalyseerd voor grootte wanneer verdund in citraatbuffer en in menselijk plasma, en verbeterd voor spoorlengte (Figuur 3). De meting van de steekproef werd ook gemaakt door DLS (Figuur 4) en alle resultaten worden samengevat in Lijst 1.

Figuur 3. De resultaten die van NanoSight NTA gebruiken.

Figuur 4. Meting van de zelfde steekproef door DLS.

Bespreking

De methodes voor meting van goud in citraat wordt verdund waren zoals die gedetailleerd in het rapport dat van verwijzingsmaterialen. Een samenvatting van de resultaten zoals die door NIST wordt gemeten kan in Lijst 2 worden gezien.

NTA kan worden gebruikt om zich zowel visueel als door een concentratiemeting te identificeren dat de deeltjes monodispersed nog het toevoegen van bewijsmateriaal aan de hypothese zijn dat de proteïnen in opschorting handelen om nanoparticles (Figuur 5) met een laag te bedekken (en dat de verhoging van grootte niet toe te schrijven aan samenvoeging is). Het is niet mogelijk om deze informatie van de meting zuiver te onthullen DLS, die gebaseerd ensemble is.

Figuur 5. Het nta- bewijsmateriaal steunt de hypothese die proteïnen in opschortingshandeling om nanoparticles met een laag te bedekken.

Lijst 1. Samenvatting van resultaten door NTA en methodes DLS.

Techniek

Materiaal

Parameter

Waarde (NM)

Fout (NM)

NTA

60 van het NM- Goud

Beteken

61.22

0.93

Wijze

60.08

1.01

Norm
afwijking

6.57

0.92

NTA

60 van het NM- Goud (plasma)

Beteken

70.4

1.8

Wijze

68.5

1.67

Norm
afwijking

9.3

0.83

DLS

60 van het NM- Goud

Wijze

58.5

-

DLS

60 van het NM- Goud (plasma)

Wijze

70.7

-

Lijst 2. Samenvatting van resultaten zoals die door NIST wordt gemeten.

Techniek

Analyte Vorm

Nominale 60 NM

AFM

Droog, gedeponeerd op substraat

55.4±0.3

SEM

Droog, gedeponeerd op substraat

54.9±0.4

TEM

Droog, gedeponeerd op substraat

56.0±0.5

S-DMA

Droog, aërosol

56.3±1.5

DLS (173°)

Verdunde vloeibare opschorting

56.6±1.4

DLS (90°)

Verdunde vloeibare opschorting

55.3±8.3

SAXS

Inheemse vloeibare opschorting

53.2±5.3

De verandering in grootte in Cijfers 2 en 3 wordt geregistreerd toont een verhoging van nanoparticlegrootte van ongeveer 10 NM, die aan een 5 NM dikke geadsorbeerde eiwitlaag beantwoorden die nanoparticle behandelt die.

Conclusies

Er is een significante en meetbare verandering in de distributie van de deeltjesgrootte van monodispersegoud nanoparticles in aanwezigheid van een biologisch middel zoals menselijk plasma. Een geschikte methodologie voor de meting van de dikte van de plasmalaag die twee onafhankelijke methodes, NTA en DLS gebruikt, is gebruikt om elkaar te bevestigen.

De breedte en het gemiddelde van de distributies door zowel DLS als NTA worden gemeten die zijn gelijkaardig aan dat bepaald door NIST. In aanwezigheid van plasma, zowel lichtjes stijgen de deeltjesgrootte als de distributie van de deeltjesgrootte. NTA biedt de capaciteit aan om absolute concentratie te meten die kan worden gebruikt om een aantalconcentratie van het goud ook te geven NIST nanoparticles. NTA is ook ideaal voor het identificeren van en het tellen van nanoparticle complexen zoals dimeer toe te schrijven aan zijn capaciteit om nanoparticles individueel te visualiseren. Het vertegenwoordigt (voor nanoparticles en hier gebruikte concentratie de regimes) zo een nuttig hulpmiddel in de serie van technieken beschikbaar voor bionanoscience en bionanointeractions op gebouwde nanomaterials in biologie.

Deze informatie is afkomstig geweest, herzien en die van materialen door NanoSight aangepast worden verstrekt.

Voor meer informatie te bezoeken gelieve NanoSight.

Date Added: Dec 22, 2009 | Updated: Mar 7, 2013

Last Update: 7. March 2013 10:41

Ask A Question

Do you have a question you'd like to ask regarding this article?

Leave your feedback
Submit