Characterisationen av Nanoparticlen Storleksanpassar och Påstår Före Nanotoxicological Studier genom Att Använda NanoparticleSpårningAnalys

Vid AZoNano

Täckte Ämnen

Inledning
Metoder och Material
     MänniskaPlasma
     Partiklar
Resultat
Diskussion
Avslutningar

Inledning

Innan det börjar någon nanotoxicological studie, är det imperativet som vet det statligt av de använda nanoparticlesna, och i synnerhet deras storleksanpassa och storleksanpassa fördelning i en anslå testar massmedia.

NanoSight har framkallat ett unikt instrumenterar för att karakterisera nanoparticles i vätskeupphängning. Detta noterar diskuterar applikationen av detta instrumenterar i characterisationen av guld- nanoparticles och deras aggregat i en biologically relevant vätska. I Motsats Till klassiska ljusa spridningtekniker låter NanoparticleSpårning- och (NTA) Analystekniken nanoparticles storleksanpassas i upphängning på enpartikel bas och att låta högre upplösning och därför bättre överenskommelse av aggregation än helhetmetoder (liksom den Dynamiska Ljusa Spridningen, DLS). Studien ser ändringen storleksanpassar in av guld- nanoparticles som jämför fallet av den standarda dispersantvätskan (citrate fungera som buffert), till ett utspätt plasma (som innehåller proteiner).

Metoder och Material

MänniskaPlasma:

Blod togs från seemingly sunda oljedoseringar. Rören centrifugerades, för minut 5 på 800 RCF till kulan de röda och vitblodcellerna. Supernatanten (plasmaet) överfördes till märkta rör och lagrades på -80°C. På att töa plasmaet centrifugerades igen för minut 3 på kRCF 16,1 vidare för att förminska närvaroen av röda och vitblodceller. Supernatanten överfördes till en ny skyttel som tar omsorg att inte störa kulan.

Partiklar:

NIST-Guldmyntfotnanoparticles av 60 nm användes (NIST hänvisar till materiella 8013). Dessa lagrades, förberett och användes enligt de relevant rapporterna av utredning. Det guld- förtunnades till en koncentration av ungefärligt 108 particles/ml som använder standard citrate, fungera som buffert av pH=7.19. För spridningarna i plasma var människaplasmaet den förtunnade 1:1000000 i citrate fungera som buffert, och µl 10 av guld- nanoparticles förtunnades med µl 790 av det utspädda plasmaet.

NanoparticleSpårning och Analys bars ut på en NanoSight LM10. Alla tar prov förberedelsen, och mätningar bars ut på UniversitetarHögskolan Dublin, Irland, och analys utfördes av NanoSight genom att använda en beta version av programvara för NTA 2,0. Multipelvideo, varje 166s long, antecknades, och analyserat in gruppera funktionsläget för att se till statistisk invarians. Givet, att plasmaet är ett naturligt ionic medel, noteras det att utfärda av proteinaggregation ska är alltid problematisk.

Figurera 1. NanoSighten LM10 Instrumenterar.

Figurera 2. Videoen avbildar av 60 Guld- partiklar för nm, som fångat av NanoSighten LM10 instrumentera.

Resultat

Video av nanoparticlesna antecknades (Figurera 2), spårat, och analyserat för storleksanpassa, när förtunnat i citrate, fungera som buffert och i människaplasma, och korrigerat för spåra längden (Figurera 3). Mätningen av ta prov gjordes också av DLS (Figurerar 4), och alla resultat resumeras in Bordlägger 1.

Figurera 3. NanoSight resultat genom att använda NTA.

Figurera 4. Mätningen av samma tar prov vid DLS.

Diskussion

Metoderna för mätning av guld- utspätt i citrate var, som de som specificeras i hänvisa tillmaterialen, anmäler. Ett summariskt av resultaten som mätt av NIST kan ses in Bordlägger 2.

NTA kan vara van vid identifierar både visuellt, och vid en koncentrationsmätning, att partiklarna är fortfarande monodispersed tillfoga, bevisa till hypotesen, som proteiner i upphängning agerar för att täcka, nanoparticlesna (Figurera 5) (och, att förhöjningen storleksanpassar in, inte är tack vare aggregation). Det är inte möjligheten som renodlat elicit denna information från DLS-mätningen, som är den baserade helheten.

Figurera 5. NTA bevisar stöttar hypotesen som proteiner i upphängning agerar för att täcka nanoparticlesna.

Bordlägga 1. Summariskt av resultat vid NTA- och DLS-metoder.

Teknik

Materiellt

Parameter

Värdera (nm)

Fel (nm)

NTA

Guld- 60 nm

Medel

61,22

0,93

Funktionsläge

60,08

1,01

Standart
avsteg

6,57

0,92

NTA

Guld- 60 nm (plasma)

Medel

70,4

1,8

Funktionsläge

68,5

1,67

Standart
avsteg

9,3

0,83

DLS

Guld- 60 nm

Funktionsläge

58,5

-

DLS

Guld- 60 nm (plasma)

Funktionsläge

70,7

-

Bordlägga 2. Summariskt av resultat som mätt av NIST.

Teknik

Analyte Bildar

Nominal 60 nm

AFM

Torrt deponerat på substraten

55.4±0.3

SEM 2000

Torrt deponerat på substraten

54.9±0.4

TEM

Torrt deponerat på substraten

56.0±0.5

ES-DMA

Torrt ærosol

56.3±1.5

DLS (173°)

Utspädd vätskeupphängning

56.6±1.4

DLS (90°)

Utspädd vätskeupphängning

55.3±8.3

SAXS

Infödd vätskeupphängning

53.2±5.3

Ändringen storleksanpassar in antecknat in Figurerar 2, och 3 visar att en förhöjning i nanoparticle storleksanpassar av ungefärligt 10 nm och att motsvara till ett 5 adsorberat proteinlagrar för nm som tjockt täcker nanoparticlen.

Avslutningar

Det finns ett viktigt, och mätbar ändring i partikel storleksanpassar fördelning av guld- nanoparticles för monodisperse i närvaroen av ett biologiskt medel liksom människaplasma. En passande methodology för mätningen av tjockleken av plasmalagrar genom att använda två oberoende metoder, NTA och DLS, har varit van vid validerar en another.

Bredden och medlet av fördelningorna som mätas av både DLS och NTA, är liknande till det som är beslutsam vid NIST. I närvaroen av plasma båda som partikeln storleksanpassar, och partikeln storleksanpassar fördelningsförhöjning litet. NTA erbjuder kapaciteten att mäta evig sanningkoncentration som kan vara van vid ger också en numrerakoncentration av de guld- nanoparticlesna för NIST. NTA är också ideal för att identifiera och att räkna nanoparticleaggregat liksom dimers tack vare dess kapacitet att visualisera nanoparticlesna individuellt. Den föreställer thus (för nanoparticlesna och koncentrationsstyrena som här används) ett användbart bearbetar i samlingen av tekniker som är tillgängliga för bionanoscience och bionanointeractions på iscensatte nanomaterials i biologi.

Denna information har varit sourced, granskad och anpassad från material förutsatt att av NanoSight.

För mer information behaga besök NanoSight.

Date Added: Dec 22, 2009 | Updated: Mar 7, 2013

Last Update: 7. March 2013 10:44

Ask A Question

Do you have a question you'd like to ask regarding this article?

Leave your feedback
Submit