Visualización, Apresto y el Contar de Virus y de Fagos en la Suspensión Líquida Usando Análisis Que Sigue Su Trayectoria del Nanoparticle

Por AZoNano

Temas Revestidos

Introducción
Producción/Revelado Vaccíneos
Estudios de la Separación del Virus
Purificación del Virus
Protección Bacteriófago-Basada de MRSA - Terapia Bacteriófaga
Parámetros de la Medición
Tipos del Virus

Introducción

Un nuevo nanoparticle laser-basado que sigue su trayectoria el sistema de análisis está disponible ahora que permite que las partículas del nanoscale tales como virus y agregados del virus visualizar directamente e individualmente en líquidos en el tiempo real, del cual los perfiles de alta resolución de la distribución dimensional de partícula pueden ser obtenidos.

La técnica es costo rápido, robusto, exacto y bajo que representa una opción atractiva o un complemento a los métodos existentes de análisis del nanoparticle tales como Dispersión Luminosa Dinámica (DLS), Espectroscopia de la Correlación del Fotón (PCS) o Microscopia Electrónica (EM).

Por simultáneamente y directamente midiendo el coeficiente de difusión de partículas individuales, el Nanoparticle dedicado Que Sigue Su Trayectoria el suite de software (NTA) del Análisis permite únicamente que el utilizador cuente y clasifique automáticamente los virus y los agregados en una muestra. Se visualizan los Resultados como los gráficos de la talla contra la cuenta de partículas individuales (o de la talla comparado con brillantez relativa). Esta aproximación de la partícula-por-partícula vence las limitaciones inherentes a otros sistemas de análisis de la partícula que generen solamente datos medios de la distribución dimensional de partícula.

Cuadro 1. imagen Típica del virus producida por el instrumento de NanoSight.

Cuadro 2. gráfico de 3 dimensiones de talla de partícula comparado con intensidad relativa de la partícula comparado con cuenta de partícula.

Producción/Revelado Vaccíneos

Las preparaciones vaccíneas Virales se deben demostrar (validado) para ser establo y para contener proporciones sabidas de elementos activos. NanoSight permite una estimación inmediata y directa de la pureza y de la concentración del producto.

Semejantemente, el grado y el índice de formación de agregados en una preparación del virus se pueden estimar simple usando NanoSight permitiendo que el fabricante desarrolle procesos de fabricación mejorados del producto y optimice la vida útil del producto.

Pues NanoSight permite que clasificaas todas las partículas en la preparación sean visualizadas y, la información adicional sobre contenido del nanoparticle se hace disponible en un rato más corto que esté disponible con bio análisis convencionales de TCid50 o de la placa.

Por ejemplo, la presencia de partículas más grandes (que NanoSight puede clasificar y cuenta) podría representar los escombros de célula no-virales del proceso del cultivo celular o los agregados de las partículas del virus que contenían muchos virions individuales. En ambos casos, tales agregados/contaminantes representan un problema posible al fabricante, uno que se pueda determinar inmediatamente con el sistema de NanoSight.

Estudios de la Separación del Virus

La separación del Virus se ensaya (validado) con los altos picos del título de virus (de diversos tipos dependiendo de la aplicación). Éstos entonces se utilizan para desafiar los pasos de progresión de proceso que necesitan ser calificados como paso de progresión de la separación.

Los datos se deben obtener con el material puro, no-agregado del pico del virus que se debe primero preparar en el alto título y salvar antes de usar como el pico. NanoSight se coloca idealmente para establecer el estatus de la agregación ambos antes y después de almacenamiento.

Purificación del Virus

La capacidad de NanoSight de establecer rápidamente el grado al cual una preparación del virus contiene los contaminantes o los agregados y de poder cuantificar los niveles de tales ha demostrado inestimable tramitar los reveladores interesados en los protocolos la optimización de la purificación para la preparación del virus.

Por ejemplo, el Cuadro 3 muestra la diferencia entre una preparación parcialmente purificada del virus (línea blanca) y la misma muestra que es pasada con éxito con un protocolo eficiente de la purificación cuál quitó efectivo toda la contaminación o material agregado (línea roja). Observe que el eje vertical representa la concentración de la partícula (virus particles/ml).

 

El Cuadro 3. Sobrepuso gráficos de la distribución dimensional de partícula de una preparación del virus antes (blanco) y después (rojo) de un paso de progresión final de la purificación.

Protección Bacteriófago-Basada de MRSA - Terapia Bacteriófaga

La detección de la partícula del Virus y el contar usando NTA está proporcionando a la información esencial para los investigadores en la Universidad del Instituto de Strathclyde de la Farmacia y de las Ciencias Biomédicas (IPBS). Estas personas desarrollan métodos para emplear bacterias naturales para combate MRSA.

MRSA (o Estafilococo Áureo Resistente de la Meticilina) es una variación del Estafilococo Áureo de la bacteria que ha desarrollado resistencia a la mayoría de los antibióticos que la hacían difícil tratar y potencialmente muerto. Mientras Que el “Superbug” puede ser matado con los detersorios, la dilución y la aplicación detersorias es a menudo contrarias e ineficaces, haciendo que el bacteriófago encamina una opción atractiva.

Consiste en caracterizar las culturas que NanoSight es empleado dentro de un avance de las personas por el Dr. Mike Mattey, conferenciante honorario del bacteriófago en IPBS. Antes de bacteriófagos que despliegan como seco-cubierta para proteger los sitios bacterianos de alto riesgo de la invasión (suturas, instrumentos y heridas), las culturas necesitan la caracterización y su concentración necesita evaluar. NanoSight permite que las personas vean y clasifiquen culturas virales rápidamente en tiempo real y a bajo costo.

“La caracterización de las poblaciones del virus requiere la evaluación de la agregación en los 20 nanómetro - el rango de 1.000 nanómetro” dice al Dr. Mattey. “NanoSight proporciona a las caracterizaciones cuantitativas rápidas y fáciles de la muestra no posibles de otros métodos y en un mucho más barato. Además, la tecnología de NanoSight proporciona a una opinión el tranquilizar de la población de la partícula que utiliza los resultados que cuentan.”

Parámetros de la Medición

  • El tratamiento previo de la Muestra es mínimo requiriendo solamente la dilución a 107 - 1010 por el ml.

  • Los análisis Exactos y reproductivos se pueden obtener de un segundo análisis 30. La distribución Dimensional es una distribución del número y por lo tanto la concentración de la muestra puede ser derivada.

  • los videoclips en tiempo real permiten fenómenos dependientes del tiempo tales como agregación o disolución que se seguirán cualitativo y cuantitativo. Los Cambios de tamaño y la concentración se pueden calcular en tales procesos.

  • La talla perceptible mínima mensurable depende del tipo de la partícula pero la mayoría de los virus y de los tipos bacteriófagos pueden ser vistos, ser clasificados y ser contados. El límite absoluto para la técnica es 10 nanómetro pero es solamente posible para los materiales altamente retráctiles.

  • La técnica es absoluto, no requiriendo ninguna calibración.

Tipos del Virus

Una amplia gama de tipos del virus se han analizado con éxito hasta la fecha e incluyen:

  • Adenovirus
  • Citomegalovirus (MCMV)
  • Papillomavirus Porcino
  • Fago de la Lambda
  • Estimulante de la gripe Aviar (TMV)
  • Virus Murine de la Leucemia (MULV)
  • Virus de Encefalitis Japonesa (JEV)
  • Cyanovirus
  • Herpes Simple
  • Gripe
  • Baculovirus
  • M13
  • M14

Esta información ha sido originaria, revisada y adaptada de los materiales proporcionados por NanoSight.

Para más información visite por favor NanoSight.

Date Added: Dec 22, 2009 | Updated: Mar 7, 2013

Last Update: 7. March 2013 07:48

Ask A Question

Do you have a question you'd like to ask regarding this article?

Leave your feedback
Submit