Visualisation, Calibrage et Compte des Virus et des Bactériophages dans la Suspension Liquide Utilisant l'Analyse de Cheminement de Nanoparticle

Par AZoNano

Sujets Couverts

Introduction
Production/Développement Vacciniques
Études d'Habilitation de Virus
Purification de Virus
Protection Bactériophage-Basée de MRSA - Traitement Bactériophage
Paramètres de Mesure
Types de Virus

Introduction

Un nanoparticle basé sur le laser neuf cheminant le système d'analyse est maintenant disponible qui permet à des particules de nanoscale telles que des virus et des agrégats de virus concevoir directement et individuellement dans les liquides en temps réel, de l'où des profils à haute résolution de distribution de dimension particulaire peuvent être obtenus.

La technique est rapide, robuste, précise et coût bas représentant une alternative séduisante ou un complément aux méthodes existantes d'analyse de nanoparticle telles que la Dispersion de la Lumière Dynamique (DLS), Spectroscopie de Corrélation de Photon (PCS) ou Microscopie Électronique (EM).

Par simultanément et directement mesurant le coefficient de diffusion de différentes particules, le Nanoparticle dédié Cheminant la suite logiciel (NTA) d'Analyse permet seulement à l'utilisateur automatiquement de compter et classer les virus et les agrégats dans un échantillon. Des Résultats sont affichés comme des graphiques de taille contre le compte de différentes particules (ou de taille contre la brilliance relative). Cet élan de particule-par-particule surmonte les limitations inhérentes à d'autres systèmes d'analyse de particules qui produisent seulement de moyennes données de distribution de dimension particulaire.

Le Schéma 1. image Particulière de virus produite par l'instrument de NanoSight.

Le Schéma 2. traçage à trois dimensions de la dimension particulaire contre l'intensité relative de particules contre le comptage de particules.

Production/Développement Vacciniques

Les préparations vacciniques Virales doivent être prouvées (validé) pour être gamme de produits et pour contenir des parts connues d'éléments actifs. NanoSight permet une estimation immédiate et directe de la pureté et de la concentration de produit.

De Même, le degré et les tarifs de la formation des agrégats dans une préparation de virus peuvent être simplement estimés utilisant NanoSight permettant au constructeur de développer des processus de fabrication améliorés de produit et d'optimiser la durée de conservation de produit.

Car NanoSight permet à toutes les particules dans la préparation d'être conçues et classées, les informations complémentaires au sujet du teneur de nanoparticle sont rendues disponibles dans plus peu de temps que soyez disponible par de bio analyses conventionnelles de TCid50 ou de plaque.

Par exemple, la présence de plus grandes particules (que NanoSight peut classer et compte) pourrait représenter les saletés non virales de cellules du procédé de culture cellulaire ou les agrégats des particules de virus contenant beaucoup de différents virions. Dans l'un ou l'autre de cas, de tels agrégats/contaminants représentent un problème possible au constructeur, un qui peut être immédiatement recensé avec le système de NanoSight.

Études d'Habilitation de Virus

On analyse l'habilitation de Virus (validé) avec les épis à forts titres des virus (des types variés selon l'application). Ceux-ci sont alors employés pour contester les phases de processus qui doivent être qualifiées comme phase d'habilitation.

Les données doivent être obtenues avec du matériau pur et non-totalisé d'épi de virus qui doit d'abord être préparé à forts titres et être enregistré avant emploi comme épi. NanoSight est idéalement mis pour déterminer le statut de totalisation les deux avant et après la mémoire.

Purification de Virus

La capacité de NanoSight de déterminer rapidement le degré auquel une préparation de virus contient des contaminants ou des agrégats et de pouvoir mesurer les niveaux de tels a inestimable prouvé pour traiter des révélateurs intéressés à optimiser des protocoles de purification pour la préparation de virus.

Par exemple, le Schéma 3 affiche la différence entre une préparation partiellement épurée de virus (ligne blanche) et le même échantillon ayant été avec succès réussi par un protocole efficace de purification ce qui a effectivement enlevé tous les contamination ou matériaux totalisés (ligne rouge). Notez que l'axe vertical représentent la concentration de particules (virus particles/ml).

 

Le Schéma 3. A Recouvert des traçages de distribution de dimension particulaire d'une préparation de virus avant (zone blanche) et après (rouge) une phase finale de purification.

Protection Bactériophage-Basée de MRSA - Traitement Bactériophage

Le dépistage de particules de Virus et le compte utilisant NTA fournit les informations nécessaires pour des chercheurs à l'Université de l'Institut de Strathclyde de la Pharmacie et des Sciences Biomédicales (IPBS). Cette équipe développent des méthodes pour utiliser les bactéries naturelles pour combattre MRSA.

MRSA (ou Staphylocoque Doré Résistant de Méthicilline) est une variation du Staphylocoque Doré de bactérie qui a développé la résistance à la plupart des antibiotiques la rendant difficile à traiter et potentiellement mortel. Tandis Que le « Superbug » peut être détruit avec des détergents, la dilution et l'application détergentes est souvent intermittente et inutile, effectuant le bactériophage pour diriger une alternative séduisante.

Il est en caractérisant les cultures de bactériophage que NanoSight est utilisé dans une avance d'équipe par M. Mike Mattey, conférencier honorifique à IPBS. Avant de déployer des bactériophages comme sec-couche pour protéger les sites bactériens à haut risque d'invasion (sutures, instruments et blessures), les cultures ont besoin de caractérisation et leur concentration a besoin évaluer. NanoSight permet à l'équipe de visualiser et classer des cultures virales rapidement en temps réel et à bas pris.

« La caractérisation des populations de virus exige l'estimation de la totalisation dans les 20 nanomètre - le domaine de 1.000 nanomètre » indique M. Mattey. « NanoSight fournit des caractérisations quantitatives rapides et faciles d'échantillon non possibles en d'autres méthodes et beaucoup à un plus peu coûteux. Supplémentaire, la technologie de NanoSight fournit une vue de rassurer de la population de particules qui supporte les résultats de compte. »

Paramètres de Mesure

  • Le traitement préparatoire d'Échantillon est minimal exigeant seulement la dilution à 107 - 1010 par ml.

  • Des analyses Précises et reproductibles peuvent être obtenues à partir d'une seconde analyse 30. La distribution de Grandeurs est une distribution de numéro et par conséquent la concentration d'échantillon peut être dérivée.

  • les clips vidéos en temps réel permettent des phénomènes dépendant du temps tels que la totalisation ou la dissolution à suivre qualitativement et quantitativement. Des Changements de la taille et de la concentration peuvent être prévus dans de tels procédés.

  • La taille détectable minimum mesurable dépend du type de particules mais la plupart des virus et types bactériophages peuvent être vus, classés et comptés. La limite absolue pour la technique est 10 nanomètre mais est seulement possible aux matériaux hautement rétractiles.

  • La technique est absolu, n'exigeant aucun étalonnage.

Types de Virus

Un large éventail de types de virus avec succès se sont analysés jusqu'à présent et comprennent :

  • Adénovirus
  • Cytomégalovirus (BÂTIMENT DE LUTTE CONTRE LES MINES)
  • Papillomavirus Porcin
  • Bactériophage de Lambda
  • Stimulant de Grippe aviaire (TMV)
  • Virus Murin de Leucémie (MULV)
  • Virus d'Encéphalite Japonaise (JEV)
  • Cyanovirus
  • Herpès
  • Grippe
  • Baculovirus
  • M13
  • M14

Cette information a été originaire, révisée et adaptée des matériaux fournis par NanoSight.

Pour plus d'information visitez s'il vous plaît NanoSight.

Date Added: Dec 22, 2009 | Updated: Mar 7, 2013

Last Update: 7. March 2013 07:46

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