计数,大小和形象化的汇总在蛋白质使用纳米颗粒跟踪的分析

AZoNano

包括的事宜

简介
想象蛋白质综合
报道蛋白质综合范围范围
潜水艇 30 毫微米综合
30 - 1000 毫微米范围

简介

分析汇总状态在蛋白质的是至高无上的重要,当设法了解产品稳定性和效力时。 产品质量,根据生物活动和产生免疫性罐头,被蛋白质汇总状态高度影响。 蛋白质汇总在制造过程 (细胞培养、洗净和公式化) 中可能发生在所有步骤并且,通过确定汇总状态,这个进程的修改/优化可以达到。

跟踪允许 nanoscale 微粒的分析系统的一新的基于激光的纳米颗粒是可用的,例如蛋白质现在综合,直接地和单个形象化和计数在液体在实时,高分辨率粒度分布配置文件可以获得。 这个技术是快速,稳健,准确和低成本表示引力选择的或补全对纳米颗粒分析现有的方法例如动态光散射, DLS (亦称光子相关性分光学, PCS) 或电子显微镜术 (EM)。

想象蛋白质综合

NanoSight 仪器提供唯一答案到蛋白质汇总在 30 nm1000 nm 范围内。

图 1。 一个典型的图象由 NanoSight 技术生产了。 这个图象允许用户立刻认可关于他们的范例的某些功能。

图 2. 由范例 (编号配电器) 引起的粒度分布显示在图 1. 上。

报道蛋白质综合范围范围

历史上一定数量的技术用于分析蛋白质和蛋白质汇总。 通常分离技术在一个分隔的范例用于歧视蛋白质和蛋白质综合,当进一步的分析执行。

分析技术:

分离技术:

  • 范围排除色谱法 (SEC)
  • 场流分级法 (FFF)
  • 血丝电泳法。 (铈)
  • 分析离心器处理 (AUC)

潜水艇 30 毫微米综合

它是公用的查找 SEC 与 DLS、购物中心或者紫外分光学配对。 范围排除色谱法可以用于从综合分隔蛋白质单体。 使用例如 DLS 的随后的分析,可能导致准确范围/分子量分析被净化的分数的。 在 SEC 列的排阻极限上没有分隔并且变大块分析系统例如 DLS 变得较不非常合适。 购物中心分析可能帮助减少更大的综合的作用在非被分馏的范例的,但是这个技术要求解释。

30 - 1000 毫微米范围

NanoSight 技术允许在范围范围的蛋白质综合的 30 - 1000 内毫微米单个是印象和估量通过跟踪他们的根据微粒由微粒基本类型的布朗运动。 微粒由微粒分析允许高分辨率编号配电器被生成。 此区域经常由与蛋白质单体的高浓度和经常控制这个信号的大,明亮的综合的编号下限的 DLS 拙劣地服务。

分馏可以执行例如与对助手 DLS 分析的 FFF,对于 FFF 经常是必需的稀释可能使此途径不受欢迎的人由于在进一步汇总的潜在。 此外,这些 ‘中型的’综合的稀释在 DLS 的区分限额下经常采取他们。 当 30-1000 毫微米蛋白质综合经常属于此技术的,最佳浓度范围 Nanosight 技术频繁地不要求稀释。

NanoSight 技术 (30 毫微米的被中断的限额蛋白质综合的) 意味着它是非常合适的补充 SEC/DLS 或 SEC/UV 在 SEC 上排阻极限。 NanoSight 技术的上限表示常规唯一微粒想象/昏暗技术变得可适用的点。

没有综合的前期分隔, DLS 将典型地导致在图显示的被综合的范例的一个双峰结果 3. 上。 主要峰顶会形成从很大数量单节显性的微粒,而附属峰顶将由非常分散重大的强度光的大综合形成。 一个恶劣解决的 DLS 分析显示在这些点尽管他们的存在作为主要单节显性的微粒和少数更大的综合之间的微粒不会控制这个信号。

图 3. 图象由显示一个大量地被综合的蛋白质范例的 Nanosight LM10-HS 仪器生产了。

NanoSight 技术无法评定主要单节显性的范围,因为微粒在技术的检测极限下将落,在 30 毫微米上,这个技术提供,唯一地形成被综合的微粒的高分辨率编号配电器的对蛋白质综合的微粒由微粒分析。

图 4。 微粒大小的配电器的表示可能在一个被综合的蛋白质范例内包含。

此信息是来源,复核和适应从 NanoSight 提供的材料。

对于更多信息请参观 NanoSight

Date Added: Dec 22, 2009 | Updated: Mar 7, 2013

Last Update: 7. March 2013 09:26

Ask A Question

Do you have a question you'd like to ask regarding this article?

Leave your feedback
Submit