計數,大小和形象化的彙總在蛋白質使用納米顆粒跟蹤的分析

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包括的事宜

簡介
想像蛋白質綜合
報道蛋白質綜合範圍範圍
潛水艇 30 毫微米綜合
30 - 1000 毫微米範圍

簡介

分析彙總狀態在蛋白質的是至高無上的重要,當設法瞭解產品穩定性和效力時。 產品質量,根據生物活動和產生免疫性罐頭,被蛋白質彙總狀態高度影響。 蛋白質彙總在製造過程 (細胞培養、洗淨和公式化) 中可能發生在所有步驟並且,通過確定彙總狀態,這個進程的修改/優化可以達到。

跟蹤允許 nanoscale 微粒的分析系統的一新的基於激光的納米顆粒是可用的,例如蛋白質現在綜合,直接地和單個形象化和計數在液體在實時,高分辨率粒度分佈配置文件可以獲得。 這個技術是快速,穩健,準確和低成本表示引力選擇的或補全對納米顆粒分析現有的方法例如動態光散射, DLS (亦稱光子相關性分光學, PCS) 或電子顯微鏡術 (EM)。

想像蛋白質綜合

NanoSight 儀器提供唯一答案到蛋白質彙總在 30 nm1000 nm 範圍內。

圖 1。 一個典型的圖像由 NanoSight 技術生產了。 這個圖像允許用戶立刻認可關於他們的範例的某些功能。

圖 2. 由範例 (編號配電器) 引起的粒度分佈顯示在圖 1. 上。

報道蛋白質綜合範圍範圍

歷史上一定數量的技術用於分析蛋白質和蛋白質彙總。 通常分離技術在一個分隔的範例用於歧視蛋白質和蛋白質綜合,当進一步的分析執行。

分析技術:

分離技術:

  • 範圍排除色譜法 (SEC)
  • 場流分級法 (FFF)
  • 血絲電泳法。 (鈰)
  • 分析離心器處理 (AUC)

潛水艇 30 毫微米綜合

它是公用的查找 SEC 與 DLS、購物中心或者紫外分光學配對。 範圍排除色譜法可以用於從綜合分隔蛋白質單體。 使用例如 DLS 的隨後的分析,可能導致準確範圍/分子量分析被淨化的分數的。 在 SEC 列的排阻極限上沒有分隔並且變大塊分析系統例如 DLS 變得較不非常合適。 購物中心分析可能幫助減少更大的綜合的作用在非被分餾的範例的,但是這個技術要求解釋。

30 - 1000 毫微米範圍

NanoSight 技術允許在範圍範圍的蛋白質綜合的 30 - 1000 內毫微米單個是印象和估量通過跟蹤他們的根據微粒由微粒基本類型的布朗運動。 微粒由微粒分析允許高分辨率編號配電器被生成。 此區域經常由與蛋白質單體的高濃度和經常控制這個信號的大,明亮的綜合的編號下限的 DLS 拙劣地服務。

分餾可以執行例如與對助手 DLS 分析的 FFF,對於 FFF 經常是必需的稀釋可能使此途徑不受歡迎的人由於在進一步彙總的潛在。 此外,這些 『中型的』綜合的稀釋在 DLS 的區分限額下經常採取他們。 當 30-1000 毫微米蛋白質綜合經常屬於此技術的,最佳濃度範圍 Nanosight 技術頻繁地不要求稀釋。

NanoSight 技術 (30 毫微米的被中斷的限額蛋白質綜合的) 意味著它是非常合適的補充 SEC/DLS 或 SEC/UV 在 SEC 上排阻極限。 NanoSight 技術的上限表示常規唯一微粒想像/昏暗技術變得可適用的點。

沒有綜合的前期分隔, DLS 將典型地導致在圖顯示的被綜合的範例的一個雙峰結果 3. 上。 主要峰頂會形成從很大數量單節顯性的微粒,而附屬峰頂將由非常分散重大的強度光的大綜合形成。 一個惡劣解決的 DLS 分析顯示在這些點儘管他們的存在作為主要單節顯性的微粒和少數更大的綜合之間的微粒不會控制這個信號。

圖 3. 圖像由顯示一個大量地被綜合的蛋白質範例的 Nanosight LM10-HS 儀器生產了。

NanoSight 技術無法評定主要單節顯性的範圍,因為微粒在技術的檢測極限下將落,在 30 毫微米上,這個技術提供,唯一地形成被綜合的微粒的高分辨率編號配電器的對蛋白質綜合的微粒由微粒分析。

圖 4。 微粒大小的配電器的表示可能在一個被綜合的蛋白質範例內包含。

此信息是來源,覆核和適應從 NanoSight 提供的材料。

對於更多信息请請參觀 NanoSight

Date Added: Dec 22, 2009 | Updated: Mar 7, 2013

Last Update: 7. March 2013 09:27

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