Proyección De Imagen De alta resolución y Alta de la Producción de las Muestras de Tejido Usando El ATLAS™ de Carl Zeiss

Temas Revestidos

El ATLAS™ de Carl Zeiss
¿Cuál es El ATLAS™?
Ventajas de Usar El ATLAS™
Energía Máxima del Haz en FE-SEM
Trabajos Típicos de ATLAS™ que fijan y Que Se Ejecutan
Sitios Múltiples dentro de una Única Matriz
Software Integrado del Espectador
Resumen
Acuses De Recibo

El ATLAS™ de Carl Zeiss

Carl Zeiss tiene recientemente desarrollado un nuevo enfoque: “ATLAS™” - un módulo para que Exploración Automatizada de la Área Extensa dirija el reto de detectar un gran número de imágenes seriales de alta calidad en la velocidad. ATLAS™ combina el modo de la proyección de imagen del microscopio electrónico (STEM) de la transmisión de la exploración (o real cualquier otro esquema de la detección) de un microscopio electrónico de exploración de la emisión de campo (FE-SEM) con un generador digital extremadamente grande de la exploración y del sistema de adquisición de imagen con hasta 32 pixeles del × 32 k de k.

La combinación de FE-SEM basó la proyección de imagen con ATLAS™, un compartimiento grande del espécimen, movimiento del escenario, casquillos múltiples del VÁSTAGO de la muestra de la matriz y las características altamente automatizadas disponibles en Carl Zeiss FE-SEM son una opción muy que obliga a la proyección de imagen convencional de TEM. Las muestras convenientes Dadas, funcionamiento sin atención se pueden realizar durante días. El procedimiento correspondiente de la aplicación será introducido y presentado aquí.

¿Cuál es El ATLAS™?

El ATLAS™ es un sistema de adquisición del generador arbitrario de la exploración y de imagen digital capaz de único almacenamiento de la imagen hasta 32 pixeles del × 32 k de k. ATLAS™ proporciona al mando exacto de la desviación de haz, del tiempo de intervalo (100 incrementos del ns) así como de los algoritmos de filtración y binning de alto nivel. Hay control total del ancho del mosaico, de la altura, de la talla del pixel, de la resolución de la teja y del traslapo totales de la teja dentro del software de ATLAS™.

Además, ATLAS™ ofrece el mando de las funciones autos de FE-SEM tales como autofocus, brillantez y contraste, stigmation del haz y memoria de la rotación de la exploración para asegurar la resolución del nanómetro y la alta calidad de la imagen sobre escalas del milímetro. Hay funciones adicionales para la interrogación en tiempo real de las imágenes, para la repetición de tejas específicas e incluso de un servidor del email para las actualizaciones del progreso al utilizador alejado.

El Cuadro 1 muestra a casquillo multi del carrusel de la muestra cuál se puede desplegar en un casquillo de 12 muestras (parte superior), el retrato de la matriz de TEM (central) y de una matriz revestida formvar de la muesca con 17 de la serie secciones ultra (parte inferior). La proyección muy inferior de la magnificación de los detectores del DF y del FB por debajo la muestra es visible como una cruz-dimensión de una variable oscura y círculo brillante central respectivamente de la imagen correcta.

Cuadro 1. Las imágenes de un casquillo multi del carrusel de la muestra, de un casquillo del carrusel de la matriz de TEM y de las secciones formvar de la muesca de una serie de la matriz with17 ultra.

Ventajas de Usar El ATLAS™

El FE-SEM ofrece un generador de la exploración y una a digitales pixel-por sistema de adquisición de imagen de pixel en contraste con el CCD o la cámara de la película en el TEM. Una ventaja de usar el FE-SEM es que los sistemas digitales modernos de la adquisición pueden proporcionar a tallas de memoria de trama extremadamente grandes y - en el caso del ATLAS™ - giga-pixel en una única imagen.

Una Cámara CCD típica del grande-formato para un TEM provee solamente de 2 k x 2 k, las tallas de memoria de trama formatos más grandes está solamente disponible en el costo drástico creciente.

Las imágenes exploradas digitales mucho más grandes, de alta calidad obtenidas del FE-SEM traducen a un embaldosado más eficiente para revestir mismo áreas extensas. Sin Embargo, el tejar puede no ser necesario con las únicas imágenes que proporcionan a un campo visual de 60 a 100 micrones en los píxeles de resolución de 2 o de 3 nanómetro.

Cuadro 2. La ordenación única de los diodos (BF) del brightfield y (DF) del darkfield en el detector Con Varios Modos De Funcionamiento del VÁSTAGO de ZEISS. Los electrones del FB y del DF se pueden cerco simultáneamente y tramitar juntos. El DF invertido FB es una configuración típica para los campos visuales grandes superior a 100 micrones con la iluminación uniforme.

La Resolución en modo del VÁSTAGO puede ser tan alta como 0,6 nanómetros con FE-SEM que se acerca al calidad de la imagen de TEM y del VÁSTAGO pueden exceder real el de TEM en algunos aspectos (e.g contraste). Algunos ejemplos muestran la calidad de la imagen fácilmente alcanzable con el FE-SEM en modo del VÁSTAGO en el siguiente.

Cuadro 3. La imagen del VÁSTAGO del immunogold de 10 nanómetro etiqueta el hipotálamo de la rata en el epóxido de Lowicryl HM20, ninguna mancha de óxido del poste.

Cuadro 4. La imagen del VÁSTAGO de una vaina myelinated del axón en de la rata del hipocampo la sección sin manchas ultra con la separación de 3 nanómetro.

Energía Máxima del Haz en FE-SEM

La Proyección De Imagen de cortes transversales ultramicrótomos con el detector del VÁSTAGO en un FE-SEM es muy similar al registro de la imagen en un TEM como electrones unscattered (modelo del brightfield) y los electrones dispersos (modelo del darkfield) pueden cerco. Sin Embargo, la resolución en el FE-SEM es limitada solamente por talla del haz. La ausencia de un lente debajo de la muestra en el FE-SEM elimina las aberraciones esféricas inducidas por el ángulo que dispersa y las aberraciones crómicas debido a la pérdida de energía. En el FE-SEM la energía máxima del haz se limita típicamente a 30 kilovoltios y no hay necesidad de un CCD o de una cámara de la película.

La energía máxima del haz del FE-SEM limita la profundidad de penetración máxima de haz que depende de la composición material principal. Los materiales manchados Metal pesado como muestras biológicas son candidatos ideales a VÁSTAGO de la baja tensión en el FE-SEM.

Trabajos Típicos de ATLAS™ que fijan y Que Se Ejecutan

Un trabajo típico de ATLAS™ puede ser fijado dentro de algunas horas y después ejecutar desatendido durante días. El panel de la opción del mosaico permite la definición de los parámetros del mosaico y de las funciones autos. Tal y como se muestra en del Cuadro 5, la dimensión del mosaico, la única talla del pixel de la teja, la única resolución de la teja, el tiempo de intervalo y la talla Etc. del área de traslapo, se pueden elegir en el procedimiento inicial del ajuste según los requisitos del trabajo de ser realizado. El procedimiento de la aplicación del ATLAS™ está Generalmente como sigue:

  • Cargue la muestra en el FE-SEM. Elija “Crean un mosaico” de la interfaz de usuario de ATLAS™ seguida por el ajuste “del Procesamiento Por Lotes Del Mosaico” incluyendo la “Ubicación del Escenario”, “Parámetros del Mosaico” y las “Funciones Autos” Etc.
  • Después de definir los parámetros del trabajo del mosaico según los requisitos, la adquisición de la imagen comenzará automáticamente simple haciendo clic “Ejecuta”.
  • Las tejas generadas de la imagen con altos píxeles de resolución se pueden manejar y coser por el software integrado del espectador.
  • El mosaico cosido se puede ver y navegar, hacer salir y salvar por el espectador con la resolución requerida.

Cuadro 5. El panel de la opción del mosaico muestra la configuración del parámetro arbitrario y las funciones autos.

El Cuadro 6 muestra un único mosaico típico del × 2 del sitio 6 que reviste una ultra sección de 250 micrones de ancho. Cada Uno de las 12 tejas tiene un campo visual de 48 micrones, y únicos 24 píxeles de resolución de las visualizaciones de imagen de pixel del × 24 k de k 2 nanómetro.

Cuadro 6. 6 la imagen de mosaico del × 2 del corte transversal ultramicrótomo del hipocampo de la rata registrado con el detector del VÁSTAGO.

Cuadro 7. imágenes del zoom del hipocampo de la Rata de una única teja de 24 pixeles del × 24 k de k.

La alta densidad del pixel de la única teja se puede visualizar por encabritado contínuo. Un zoom simulado de única 24 tejas de los pixeles del × 24 k de k ilustra la capacidad extrema de la densidad del pixel del campo visual tal y como se muestra en del Cuadro 7. Por ejemplo, aquí el único tiempo de la adquisición de la teja es cerca de 19 minutos y el trabajo entero tarda solamente 3,8 horas. Con 10 una cámara del megapíxel TEM, tomaría más de 300 imágenes para revestir esta área en píxeles de resolución equivalentes, también llevando a una carga de trabajo correspondientemente mucho mayor en el tramitación de la poste-imagen.

Sitios Múltiples dentro de una Única Matriz

Es posible hacer sitios múltiples dentro de una única matriz y relanzar el proceso en los sitios múltiples en matrices múltiples con el casquillo de 12 carruseles mostrado en el Cuadro 8. selección de Sitio se hace manualmente y es realizado por el operador antes de una corrida automatizada. La memoria Simple de la rotación de la exploración en cada sitio asegura la alineación de secciones seriales dentro de una matriz así como de la matriz a la matriz.

Cuadro 8. La configuración del casquillo multi del carrusel con 12 matrices dentro de la navegación del escenario de “Smart SEM®”.

Software Integrado del Espectador

Una Vez Que se acaba el trabajo automatizado, las tejas generadas de la imagen se pueden ver y coser juntas por el software integrado del Espectador para obtener una imagen panorámica de una área extensa. El Espectador permite que el utilizador se abra eficientemente, coser, navega, lo hizo salir/salvaguardia e inteligente re-rinde los grupos de datos bidimensionales grandes producidos por ATLAS™.

Resumen

La proyección de imagen basada FE-SEM del VÁSTAGO conjuntamente con ATLAS™ es una nueva técnica de proyección de imagen de alta resolución, alta de la producción para las muestras de tejido y proporciona a una opción a la proyección de imagen tradicional de TEM de muestras biológicas. Le limitan no más solamente a la proyección de imagen a la pequeña área de la muestra en la alta resolución. El VÁSTAGO Aquí FE-SEM-basado conjuntamente con ATLAS™ es una solución superior a la adquisición de gran capacidad de la imagen.

Acuses De Recibo

Apreciamos al Dr. Doug Wei y sus personas para sus ideas pioneras y apoyo total en el revelado de ATLAS™.

Reconocen Juan Mendenhall, Centro para Aprender y Memoria, Universidad de Texas en Austin agradecido para proporcionar a las muestras y a la discusión importante.

Fuente: “Proyección De Imagen Con Varios Modos De Funcionamiento Extrema Automatizada del VÁSTAGO de la Baja Tensión del Campo visual de Cortes Transversales Ultramicrótomos Biológicos con ATLAS™” por Carl Zeiss

Para más información sobre esta fuente, visite por favor a Carl Zeiss.

Date Added: Nov 17, 2010 | Updated: Jun 11, 2013

Last Update: 14. June 2013 04:44

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