KickUpplösning och att Avbilda för KickGenomgång av Silkespappret Tar Prov genom Att Använda ATLAS™EN av Carl Zeiss

Täckte Ämnen

ATLAS™EN från Carl Zeiss
Är Vad ATLAS™EN?
Gynnar av Att Använda ATLAS™EN
Maximat Strålar Energi i FE-SEM
inställning - upp och Typiska ATLAS™ Jobb för Spring
MultipelPlatser inom ett SingelRaster
Inbyggd TittareProgramvara
Summariskt
Bekräftelser

ATLAS™EN från Carl Zeiss

Carl Zeiss har nyutvecklat en roman att att närma sig: ”ATLAS™” - en enhet för att den Automatiserade Scanningen för Stort Område ska tilltala utmaningen av att få ett stort nummer av högkvalitativ följetong avbildar på den hög hastigheten. ATLAS™-sammanslutningar mikroskopet för scanningöverföringselektronen som (STEM) avbildar funktionsläge (eller faktiskt någon annan upptäcktsintrig) av ett mikroskop för elektron för sätta inutsläppscanning (FE-SEM) med en extremt stor digital bildläsningsgenerator och avbildar förvärvsystemet med upp till 32 PIXEL för K-× 32 K.

Kombinationen av den FE-SEM baserade STEMEN som avbildar med ATLAS™, en stor provkammare, arrangerar rörelse, tar prov multipelrastret hållare, och de högt automatiserade särdragen som är tillgängliga på Carlen Zeiss FE-SEM, är tvinga mycket alternativ till konventionellt avbilda för TEM. Givet passande tar prov, den obevakade funktionen kan utföras över en period av dagar. Det motsvarande ansökningsförfarandet ska introduceras och framläggas här.

Är Vad ATLAS™EN?

ATLAS™EN är en godtycklig bildläsningsgenerator, och digitalt avbilda förvärvsystemet som är kapabelt av singel, avbildar lagring upp till 32 PIXEL för K-× 32 K. ATLAS™ ger preciserar kontrollerar av strålar avböjning, bor tid (100 ns ökar) såväl som jämnar higher filtrera och binning algoritmer. Det finns färdigt kontrollerar av den total- mosaikbredden, höjd, storleksanpassar belägger med tegel belägger med tegel PIXELet, upplösning och överlappning inom ATLAS™-programvaran.

Dessutom kontrollerar ATLAS™-erbjudanden av FE--SEMautomatiskn fungerar liksom autofocus, ljusstyrka & kontrast, strålar stigmation och avläser rotationsminne för att se till att den nanometerupplösning och kicken avbildar kvalitets- över millimeterfjäll. Det finns extra fungerar för realtidsutfrågning av avbildar, for repetition av närmare detalj belägger med tegel och även en e-postserver för framsteguppdateringar till den avlägsna användaren.

Figurera shows 1 som det mång- tar prov karusellhållaren, som kan utvidgas in i 12 tar prov hållaren (överträffa), föreställa av TEM-rastret (en mitt), och ett formvar täckt springaraster med följetong 17 delar upp ultra (botten). Den mycket låga förstoringsprojektionen av DF- och BF-avkännare under ta prov är synlig, som en ljusa mörkerarg-Shape och central cirklar respektive från rätten avbildar.

Figurera 1. Avbildar av ett mång- tar prov karusellhållaren, en hållare för TEM-rasterkarusell, och en formvar följetong för springaraster with17 delar upp ultra.

Gynnar av Att Använda ATLAS™EN

FEN-SEM presenterar en digital bildläsningsgenerator, och a PIXEL-vid PIXELet avbildar förvärvsystemet i kontrast till CCDEN eller filmakameran i TEMEN. En gynnar av att använda FEN-SEM är att moderna digitala förvärvsystem kan ge extremt stort och - i fallet av ATLAS™EN - giga-PIXELet inramar lagret storleksanpassar i en singel avbildar.

Ett typisk stor-formaterar CCD-kameran för en TEM ger endast 2 K x 2 K, inramar lagret storleksanpassar med större formaterar är endast tillgängligt på drastiskt ökande kostar.

Det mycket avlästa större högkvalitativa digitalt avbildar erhållande från FEN-SEM översätter till effektivare belägga med tegel för att täcka mycket stora områden. Emellertid kan att belägga med tegel inte vara nödvändigt med singel avbildar ge en sätta in av beskådar av 60 till 100 mikroner på 2- eller för 3 nm PIXELupplösning.

Figurera 2. Den unika ordningen av både brightfield- (BF) och darkfield (DF)dioder i det ZEISS Mång--Funktionsläget STEM avkännaren. BF- och DF-elektroner kan samlas samtidigt och bearbetas tillsammans. BF inverterad DF är en typisk konfiguration för stort sätter in av beskådar överstigande 100 mikroner med även belysning.

Upplösning i STEMfunktionsläge kan vara som kick som 0,6 nm med FE-SEM som att närma sig det av TEMEN, och STEMEN avbildar kvalitets- kan faktiskt överskrida det av TEM i några aspekter (e.g kontrast). Showen för Några exempel avbildar kvalitets- lätt uppnåeligt med FEN-SEM i STEMfunktionsläge i efter.

Figurera 3. STEMEN avbildar av 10 märkt som nm-immunogold tjaller hypothalamusen i Lowicryl HM20 epoxy som är ingen postar fläck.

Figurera 4. STEMEN avbildar av en myelinated axonskida i unstained tjaller hippocampusen delar upp ultra med att göra mellanslag för 3 nm.

Maximat Strålar Energi i FE-SEM

att Avbilda av ultramicrotome tvärsnitt med STEMavkännaren i en FE-SEM är mycket liknande till avbildainspelningen i en TEM som både unscattered elektroner (brightfield modellerar), och spridda elektroner (darkfield modellerar), kan samlas. Emellertid begränsas upplösning i FEN-SEM endast vid strålar storleksanpassar. Frånvaroen av en lins under ta prov i FEN-SEM avlägsnar sfäriska avvikelser som framkallas av spridningen, metar och krom- energiförlust för avvikelser tack vare. I FEN-SEM som maximat strålar energi, begränsas typisk till 30 kV, och det finns inte något behov för en CCD eller en filmakamera.

Maximat strålar energi av FEN-SEM begränsar maximat strålar genomträngningsdjup som beror på materiell sammansättning främst. Heavy metal befläckte material som den biologiska något liknande tar prov, är idealkandidater för STEM för låg spänning i FEN-SEM.

inställning - upp och Typiska ATLAS™ Jobb för Spring

Ett typisk ATLAS™-jobb kan vara ställer in inom några timmar och kör därefter obevakat över en period av dagar. Mosaikalternativpanelen låter definitionen av mosaikparametrarna, och automatiskn fungerar. Som visat in Figurera 5, dimensionerar mosaiken, belägger med tegel singeln PIXELet storleksanpassar, belägger med tegel singeln upplösning, bor tid, och överlappningsområde storleksanpassar Etc., kan väljas i det initialt ställer in tillvägagångssätt enligt kraven av jobbet att utföras. I allmänhet är ansökningsförfarandet av ATLAS™EN som följer:

  • Ladda ta prov in i FEN-SEM. Välj ”Skapar en mosaik” från ATLAS™-användaren har kontakt följt av ställa in av ”Mosaiken Grupperar att Bearbeta Arrangerar” däribland ”Läge”, ”Mosaiska Parametrar”, och ”Fungerar Automatiskn” Etc.
  • Når det har definierat mosaikjobbparametrarna enligt kraven, startar avbildaförvärvet som automatiskt ska, genom enkelt att klicka ”, Utför”.
  • Frambragda avbildar belägger med tegel med kickPIXELupplösning kan behandlas och sys av den inbyggda tittareprogramvaran.
  • Den sydde mosaiken kan beskådas och navigeras, tillverkas och sparas av tittaren med den krävda upplösningen.

Figurera 5. Mosaikalternativpanelen visar att den godtyckliga parameterinställningen och automatiskn fungerar.

Figurera 6 shows som en typisk mosaik för × 2 för singelplats som 6 täcker en 250 mikron brett delar upp ultra. Varje av 12na belägger med tegel har en 48 mikron att sätta in av beskådar, och ett PIXEL för × 24 K för singel 24 K avbildar PIXELupplösning för skärmar 2 nm.

Figurera 6. 6 mosaiken för × 2 avbildar av ultramicrotome tvärsnitt av tjaller hippocampusen som antecknas med STEMavkännaren.

Figurera 7. Tjalla hippocampuszoomen avbildar från en singel belägger med tegel av 24 PIXEL för K-× 24 K.

KickPIXELtätheten av singeln belägger med tegel kan visualiseras av fortlöpande zoom-i. En simulerad zoom från en singel som 24 PIXEL för K-× 24 K belägger med tegel, illustrerar ytterligheten sätter in av beskådar PIXELtäthetkapacitet, som visat in Figurera 7. Till exempel här belägger med tegel singeln förvärvtid är omkring 19 noterar, och det hela jobbet tar endast 3,8 timmar. Med 10 en kamera för megapixel TEM skulle det tar mer, än 300 avbildar för att täcka detta område på en likvärdigt PIXELupplösning som leder också till en i motsvarande grad mycket mer stor arbetsbörda posta-avbildar in, att bearbeta.

MultipelPlatser inom ett SingelRaster

Det är möjligheten som gör multipelplatser inom ett singelraster, och repetition som det processaa på multipeln placerar på multipelraster med hållaren för karusell som 12 in visas, Figurerar 8. Platsvalet göras manuellt och utförs av operatören före en automatiserad körning. Det Enkla bildläsningsrotationsminnet på varje plats ser till att justeringen av följetongen delar upp inom ett raster såväl som raster till rastret.

Figurera 8. Konfigurationen av den mång- karusellhållaren med insida för 12 raster arrangeranavigeringen av ”Smart SEM®”.

Inbyggd TittareProgramvara

Och sytt tillsammans av den inbyggda Tittareprogramvaran för att erhålla ett panorama- avbilda av ett stort område, När det automatiserade jobbet är färdigt, frambragda avbildar belägger med tegel kan beskådas. Tittaren låter användaren effektivt öppna, syr, navigerar, tillverkat/räddningen och beträffande-framför intelligent de stora tvådimensionella datasetsna producerade av ATLAS™.

Summariskt

Den FE-SEM baserade STEMEN som avbildar i kombination med ATLAS™, är en ny kickupplösning, tar prov ger kickgenomgång som avbildar tekniken för silkespapper, och ett alternativ till traditionellt avbilda för TEM av biologiskt tar prov. Du ej längre begränsas till endast att avbilda ett litet område av ta prov i kickupplösning. Den Här FE-SEM 2000-baserade STEMEN i kombination med ATLAS™ är en överlägsen lösning till stor volym avbildar förvärvet.

Bekräftelser

Vi uppskattar Dr. Doug Wei och hans lag för deras banbrytande idéer och full service i ATLAS™-utvecklingen.

John Mendenhall, Centrerar för Att Lära, och Minnet, Texasuniversitetet på Austin bekräftas tacksamt för att ge tar prov och den viktiga diskussionen.

Källa: ”Sätter In den Automatiserade Ytterligheten av Beskådar för Mång--Funktionsläge för Låg Spänning att Avbilda STEM av Biologiska Ultramicrotome Tvärsnitt med ATLAS™” vid Carl Zeiss

Behaga besök Carl Zeiss För mer information på denna källa.

Date Added: Nov 17, 2010 | Updated: Jun 11, 2013

Last Update: 14. June 2013 04:48

Ask A Question

Do you have a question you'd like to ask regarding this article?

Leave your feedback
Submit