AZoNano 편집자에 의해
차례
분자 인식 측정의 주요 원칙 요소 팁 작용화 동안 고려해야 할 팁 작용화에 관련된 단계 에스테르화 및 Silanization 통해 Amination 자기 조립 Monolayer를 통해 애니메이션 링커 분자의 소개 결론 Bruker 분자 인식 측정의 주요 원칙
AFM을 사용하여 분자 인식 측정은 두 분자 사이의 상호 작용에 기초하고 있습니다. 두 번째 분자가 샘플 표면에 부착된 반면 한 분자는 (그룹 참조 그림 1의 A와 B) AFM의 끝에 첨부되어 있습니다. 팁 작용화은 AFM의 팁에 분자를 부착로 이어질 여러 화학적 단계입니다.
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그림 1 : AFM 팁은 방향으로 확장하고 캔틸레버의 편향으로 표면 철회있다는 거리의 함수로 감시하고 있습니다. 커브 (빨간색)의 철회 부분은 팁 및 샘플 사이의 유착 력을 보여줍니다. 에서 분자 인식 힘 측정, 리간드 분자 수용체 분자는 (B) 샘플 표면에 존재하는 반면 (가), AFM 팁에 붙어 있습니다. A와 B (삽입 대표 곡선 참조) 사이의 구체적인 unbinding의 상호 작용 쉽게 식별을 가능하게, 링커 펼쳐진으로 특성 곡선 unbinding 피크에서 링커 분자 (예 : PEG) 결과 중 하나를 사용하십시오.
그림 1의 오른쪽 반 강제로 거리 곡선입니다. 이 접촉하게 때까지 팁을 먼저이를 표면에 긍정적인 부하를 exerting, 표면 근처에 가져온 것입니다. 팁 다시 철회하고이 작업을하는 동안, 아래 피크는 철회 곡선에서 일어날 가능성이다. 이것은 접착력이 샘플과 끝 사이에 자리를 차지하게되지 나타냅니다. 편향 감도와 캔틸레버의 스프링 정수가 알려져있다면 팁 - 샘플 접착을 계산하실 수 있습니다.
비 기능화 도움말을 이용하면서 팁 및 샘플 사이의 접착력은 보통 관찰됩니다. 원하는 특정 상호 작용이 아닌 구체적인 상호 작용을 사이에 구별하는 것은 종종 작용 팁이 분자 인식 측정에 사용되는 도전입니다. 이 문제를 극복하기 위해 중간 분자 linkers 전화를하거나 공백은 분자와 AFM 팁 사이에 사용됩니다. 링커의 유연성은 바인딩 수용체에 액세스할 수있는 리간드 분자 이동성을 제공합니다.
요소 팁 작용화 동안 고려해야 할
몇 가지 기술은 AFM 프로브에 분자를 부착하는 이용되고 있지만, 문제의 수를 고려되어야합니다 :
- 적당한 AFM 프로브의 선택 중요, 핵심 요소는 팁 및 캔틸레버의 봄 상수 선명도되고.
- 리간드 분자는 팁과 분자 사이의 바인딩 강도가 표면 수용체와 리간드 분자 사이의 상호 작용을보다가되도록 팁에 연결해야합니다 때문에 팁 작용화 화학의 선택은 중요하다.
- 리간드의 표면 밀도를 감소 기법은 단일 바인딩 이벤트를 측정 중요한 있습니다.
- 같은 온도, 버퍼 구성, 그리고 산도와 같은 요인 측정 및 분자 바인딩의 바인딩 활동이 변경되지 않도록 팁 작용화 동안 적절해야합니다.
팁 작용화에 관련된 단계
팁 작용화 항상 실리콘 질화물 또는 AFM 프로브에 실리콘 팁과 함께 시작됩니다. 에스테르화 또는 silanization하여 thiol 기반 자체 조립 monolayer (SAM)와 직접 팁 amination을 통해 일반적인 두 가지 접근 방식, 즉 amination는 팁 작용화을위한 출발점을 선택하는 데 사용됩니다.