Karakterisering af Biocrystalline Materialer med Absorbans microspectroscopy

Ved AZoNano Editors

Indholdsfortegnelse

Indledning

UV microspectroscopy bruges i studiet af optiske egenskaber af de enkelte krystaller og også for kvalitetskontrol af voksende krystaller. UV-synlige område microspectroscopy er en vigtig teknik til individuel protein krystal analyse. I øjeblikket er protein krystaller, der anvendes i kontrollerede drug delivery, strukturel biologi og drug design, og bioseparations.

For lokalisering, kvalificerede og analysere biocrystalline materialer i en hurtig, nem og ikke-destruktiv måde, tilbyder craic Technologies den 20/20 PV microspectrophotometer .

Eksperiment

I dette eksperiment serie, blev fire forskellige prøver undersøgt ved hjælp af absorbans microspectroscopy. Prøverne 1, 2, 3 og 4 består DNA krystaller, flavoprotein krystaller, Co saltkrystaller i opløsning, og DNA-protein krystaller, hhv. Den 20/20 PV blev konfigureret for transmittans og fluorescens til denne serie af eksperimenter. De anvendte mål var af den 15x Schwarzchild type, da det har en meget lang arbejdsdag afstand og spektral sammenhæng på tværs af hele UV, synligt og NIR regioner.

Fra hver prøve, var 200 μl af opløsning udtaget og placeret i en CoStar 96 brønds plade, som udviser god UV-transmission egenskaber. Placeringen af ​​en krystal blev identificeret, og systemet er optimeret ved hjælp af Kohler belysning. En reference blev kørt ind til siden af ​​hver krystal, før de får spektret af krystal. Således er de spektrale egenskaber af brønden pladen, løsningen og instrumentet elimineret. Den endelige spektrum vil være af krystal kun.

Resultater

Absorbansen spektre af de fire prøver blev målt (se figur 1). Prøverne 1, 2, 3 og 4 var mærket som DNA-krystal, flavoprotein, salt krystal i opløsning, og DNA / protein krystal, hhv. Alle spektre undtagen salt udstillede en absorbans højdepunkt på 286 nm. DNA-krystal udstillet et meget intenst højdepunkt, hvilket indikerer en høj optisk tæthed. Også dette var den eneste højdepunkt for DNA krystal.

Figur 1. Overlejring af absorbans spektre af prøver 1-4.

Den flavoprotein udstillet topper ved bølgelængder på 354, 414, 442 og 446 nm under den indledende undersøgelse. Men i gentagne undersøgelser, viste flavoprotein spektrum nogle ændringer (se figur 2). Spektret af DNA / protein krystal viste et højdepunkt på 352 nm.

Figur 2. Overlejring af flavoprotein krystal absorbans spektre på kort og længere tids udsættelse for ilt.

Billeder af hver af de krystaller blev også opnået (se figur 3). Den sorte firkant angiver indgangen blænde af microspectrophotometer, som var 15x15 μm.

Figur 3. Crystal billeder. Med uret fra øverst til venstre: DNA-krystal, flavoprotein krystal, efter den var begyndt at opløse, salt krystal i opløsning, og DNA / protein krystal.

Konklusioner

UV-synlige absorbans spektre af en DNA-krystal, en flavoprotein krystal, en salt krystal, og en DNA / protein krystal blev opnået ved brug af 20/20 PV microspectrophotometer . Alle spektre kan være let at skelne, og de optiske densiteter var også sammenlignelige. Endvidere blev ændringen i flavoprotein spektre også overvåges ved hjælp af 20/20 PV .

Om craic Technologies

Craic Technologies ™ er den førende udvikler af fineste instrumenter til UV-synlig-NIR mikroanalyse. Spektre og billeder af prøven funktioner lige fra sub-micron til hundredvis af mikrometer kan analyseres. craic Technologies produkter omfatter UV-og NIR mikroskoper, UV-synlig-NIR microspectrophotometers, instrumenter til at måle tynd lagtykkelse og kolorimetri på mikroskopisk skala, Raman microspectrometers , automationsløsninger, sporbare standarder og mere. Specialiserede systemer er udviklet for en række områder, herunder vitrinitmiddelreflektans kul analyse, protein krystaller, retsmedicinske og halvleder metrologi.

Denne information er skovet, revideret og tilpasset fra materialer leveret af craic Technologies.

For mere information om denne kilde, kan du besøge craic Technologies .