Serrage de Correction Visé - Utilisant la Microscopie de Conductibilité d'Ion Pour Appliquer la Correction Se Serrant aux Structures Submicroniques

par AZoNano

Table des matières

Introduction au Serrage de Correction Visé
Principe De Fonctionnement du Serrage de Correction Visé
Instrumentation pour le Serrage de Correction Visé
Échantillons et Méthodes
Enregistrement de Canal Ionique du Serrage de Correction Visé
Références
Auteurs
Au Sujet des Systèmes de Parc

Introduction au Serrage de Correction Visé

Correction Visée de cartels (TPC)1 de serrage de correction se serrant avec la microscopie de conductibilité d'ion (ICM)2 pour guider la pipette à une position de serrage particulière de correction. Le serrage de Correction est indispensable à l'étude des cellules excitables telles que des neurones, des cardiomyocites, et la fibre musculaire en électrophysiologie parce que la technique permet au chercheur d'examiner les canaux ioniques uniques ou multiples en ces cellules. Mais le serrage de correction ne peut pas être appliqué aux petites cellules ou aux structures de submicronique-taille sur la surface de cellules, due à la limite de définition du microscope optique comporté, qui est utilisé pour manoeuvrer la pipette de bride de correction près de la surface de cellules. Puisque le MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES peut recenser la surface de cellules à l'échelle submicronique utilisant la même pipette de serrage de correction, TPC surmonte le saut de définition optique, et améliore grand les possibilités d'application de la bride de correction et son exactitude au delà de la technique classique. En cet article, des cellules ventriculaires de cardiomyocyte de rat sous tension ont été examinées avec la correction visée se serrant utilisant un MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES de Parc. Des signes de Canal ionique ont été avec succès enregistrés à un emplacement choisi d'incision de Z sur le cardiomyocyte ventriculaire.

Principe De Fonctionnement du Serrage de Correction Visé

L'idée principale de TPC est d'exécuter la correction se serrant sur de petites structures cellulaires utilisant le MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES pour le dépistage de submicronique-échelle. Le MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES emploie la même pipette et le circuit électrique utilisé avec la correction traditionnelle se serrant pour trouver la topographie de cellules utilisant le logiciel de gestion du Parc XEP en mode de représentation de MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES, topographie de haute résolution de cellules est saisi avec le contrôle de contrôle par retour de l'information. Une Fois Qu'une structure intéressante pour le serrage de correction est recensée par l'intermédiaire de la représentation de MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES, le balayeur du MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES Z positionne la pipette sur la structure. Un visa de giga-ohm est constitué en appliquant l'aspiration. L'enregistrement de Canal ionique peut alors être exécuté comme dans le serrage de correction conventionnel. Puisque la pipette approche la surface de cellules dans le sens vertical avec la précision d'échelle de nanomètre, TPC améliore la probabilité de rendre le visa d'agiga-ohm avec l'élan incliné utilisé dans le serrage de correction conventionnel3.

Le Schéma 1. Illustration des phases de fonctionnement pour le serrage de correction visé : (a) Le MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES de Parc saisit la topographie de la surface de cellules de cardiomycyte. (b) La nano-pipette est positionnée sur la région choisie (incision de z) par le balayeur DE X/Y du MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES. (c) Les élans et les formes de nano-pipette qu'un giga-ohm scellent pour enregistrer le tunnel ouvrant le signe actuel.

Instrumentation pour le Serrage de Correction Visé

Pour mettre en application TPC, le MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES est intégré avec un système de bride de correction en partageant la pipette et son circuit actuel ionique. Le MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES reçoit le signe actuel ionique pour la représentation du détecteur actuel de l'ion de bride de correction (préampli.). Le courant ionique traverse la nano-pipette, il est trouvé par l'amplificateur de bride de correction, et alors il est divisé en deux : un pour la représentation de cellules de MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES (contrôle de contrôle par retour de l'information) et l'autre pour l'enregistrement électrophysiologique.

Le Schéma 2. Configuration du serrage de correction visé : (a) XE-Bio MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES intégré avec l'Axone Axopatch 200B. (b) Un schéma de principe de connexion de bride de correction avec le XE-Bio MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES.

Échantillons et Méthodes

Des cellules ventriculaires de cardiomyocyte de rat Sous Tension ont été isolées comme décrit précédemment4. On a permis à des des Cellules de fixer aux paraboloïdes de culture cellulaire de polystyrène remplis de solutions de bain composées de 120 NaCl, 5,4 KCl, 5 MgSO4, 0,2 CACL2, 5 Na-Pyryvate, 5,5 le Glucose, 20 la Taurine, 10 Hepes, et 29 Manitol, réglé sur PH 7,4 avec du NaOH. La solution remplissante de Pipette était identique que la solution de bain. Une image sous tension de cellules a été saisie en mode d'ICM-ARS5. La pipette utilisée pour le MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES a été tirée de la glace de borosilicate (O.D., 1,0 millimètres, IDENTIFICATION., 0,58 millimètres, longueur 90 millimètres ; Instruments de Warner, USA) utilisant2 un extracteur Co-laser-basé de micropipette (P-2000, Instruments de Sutter, Novato, USA). Le diamètre interne de la pipette était environ 500 nanomètre.

Le Schéma 3. (a) image Optique (première vignette) et topographie de MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES d'un cardiomyocyte ventriculaire de rat sous tension. Le petit cercle rouge indique une structure d'incision de Z où le serrage de correction a été exécuté. (b) Transitoire Actuel (PA 3,45) de cellule jointe, enregistrant à la tension de ±0 système mv. (c) La mesure de conductibilité du tunnel enregistré. On a estimé que la conductibilité est de 44 picosecondes, et est le tunnel du vers l'intérieur-redresseur K.

Enregistrement de Canal Ionique du Serrage de Correction Visé

Le Schéma 3 affiche un exemple de la correction visée se serrant utilisant le MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES. La topographie de MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES illustre les incisions particulières de Z de manière dégagée, avec des petits groupes. À la position sur la structure d'incision de Z (cercle rouge) choisie parmi l'image de topographie de MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES, nous avons examiné l'enregistrement joint de cellules et avons avec succès mesuré un courant passager de la PA environ 3,45 à une tension de ±0 système mv. Ce résultat indique que le XE-Bio MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES de Parc est bien adapté pour précisent la désignation d'objectifs et la correction se serrant sur la membrane cellulaire. Le MISSILE AUX PERFORMANCES AMÉLIORÉES est particulièrement utile pour la recherche sur des petites cellules telles que des spermatozoïdes, des structures sous-cellulaires telles que des microvilli6, et même des cellules opaques comme les tissus intacts, la trachée, et les parts de cerveau.

Références

1. J. Gorelik, G. Yuchun et autres Biophys. J. 83, 3296 (2002)
2. P.K. Hansma, B. Drake, O. Marti, S.A. Gould, C.B. Prater, la Science 243, 641 (1989)
3. O.P. Hamill, A. Marthy, E. Neher, B. Sakmann, F.J. Sigworth, J. Physiol. 391, 85 (1981)
4. S.E. Harding, G. Vescovo, M. Kirby, S.M. Jones, J. Gurden, et P.A. Poole-Wilson, J.Mol. Cellule. Cardiol. 20. 635 (1988).
5. C. Myunghoon, XE-Bio Note d'Application 1, Systèmes de Parc (2012)
6. G. Yuchun, G. Julia, et autres FASEB J. 16, 748 (2002)

Auteurs

Myung Hoon Choi, Substance gluante Eun Jung (Gestion Du Produit, Recherche et Développement De Recherches de Systèmes de Parc, Séoul, Corée)

Au Sujet des Systèmes de Parc

Les Systèmes de Parc est les principales solutions de nanotechnologie partner pour les problèmes les plus provocants des applications de recherches et d'industriel de nanoscale.

Les Systèmes de Parc fournit les solutions initiales et novatrices d'AFM pour la mesure de nanoscale la plus précise. En métrologie de nanoscale, avoir des données qui sont reproductibles, reproductible, et fiable est juste comme essentiel que réalisant la haute définition. La plate-forme novatrice de métrologie de l'interférence-élimination (XE) déclenchée une ère neuve du nanometrology qui surmonte la non-linéarité et la non-orthogonalité associées avec les systèmes basés de piezotube conventionnel. La technologie novatrice d'AFM de Systèmes de Parc est une force du marché disruptive et elle augmente l'application du nanometrology au delà des limites de la technologie conventionnelle d'AFM.

Cette information a été originaire, révisée et adaptée des matériaux fournis par des Systèmes de Parc.

Pour plus d'informations sur cette source, visitez s'il vous plaît les Systèmes de Parc.

Date Added: May 11, 2012 | Updated: Sep 20, 2013

Last Update: 20. September 2013 06:23

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