Weergave van Chemische Micropatterns op Polycarbonaat voor Peptide Immobilisatie

Besproken Onderwerpen

Samenvatting
Inleiding
Voorbereiding van Dia's
Resultaten
De Resultaten van de Fluorescentie
Resultaten SARFUS
Bespreking van Resultaten
Conclusie
Voordelen van SARFUS

Samenvatting

In deze studie, wordt een nieuwe methode beschreven voor het micropatterning van polycarbonaatoppervlakten voor biomoleculaire interactiestudies. De techniek Sarfus staat snelle karakterisering van micropatterns toe en openbaart een doughnuteffect dat hopelijk een minder belangrijk effect op het fluorescentiebeeld heeft.

Inleiding

Het Polycarbonaat wordt (PC) wijd gebruikt als substraat in de voorbereiding van microfluidic apparaten. wegens het potentiële gebruik van compact-discs als platforms voor hoog-productieanalyse van biomoleculaire interactie, heeft het nut van PC voor bioanalysis onlangs veel aandacht aangetrokken.

In dit artikel, wordt een nieuwe methode voor het chemische micropatterning van een polycarbonaatsubstraat gemeld (figuur 1). Kiezelzuur nanoparticles (1) functionalized met semicarbazidegroepen werd afgedrukt op PC door een noncontact piezoelectric microarrayer te gebruiken om micropatterns (2) te geven. De semicarbazidegroepen huidig op micropatterns werden plaats-specifiek met onbeschermde peptides (3) derivatized door - oxo aldehydegroep, afgebonden om substraat (4) te geven: peptides verbonden met micropatterns door semicarbazonebanden. De oppervlakte tussen de vlekken werd verlaten onveranderd.

Het gebruik van nanoparticles van verschillende diameters (27 tot 304 NM) liet de invloed van oppervlaktekromming op toe signaalsterkte en vangt te bestuderen specificiteit. De nanoparticlelaag op het substraat van PC werd gekenmerkt door Sarfus te gebruiken.

Figuur 1. Het Chemische micropatterning van polycarbonaatoppervlakte voor de plaats-specifieke immobilisatie van peptides.

Voorbereiding van Dia's

Kiezelzuur van Semicarbazide nanoparticles (1) werd voorbereid van kiezelzuur nanoparticles van verschillende diameters (27, 82, 151, 192, 256 en 304nm) en werd afgedrukt op de dia's van PC (75 X25 x 1 mm) door een noncontact piezoelectric arrayer (drie dalingen, ~1 NLtotaal) te gebruiken.

De afgedrukte die dia's van PC werden uitgebroed onder dekking-glas met peptides cocho-HA of cocho-VLAG, en toen anti-Ha of anti-vlagantilichamen door tetramethylrhodamine-geëtiketteerde secundaire antilichamen worden gevolgd.

Resultaten

De Resultaten van de Fluorescentie

De analyse van de Fluorescentie (getoonde niet gegevens) toont de hoge specificiteit van de vangst van anti-Ha of - de antilichamen van de VLAG door geïmmobiliseerde peptides en dat werden hoogste signalen verkregen voor 82 - en 27 NM nanoparticles, waarschijnlijk wegens een hogere specifieke oppervlakte.

Resultaten SARFUS

Micropatterns door het afdrukken semicarbazide nanoparticles op een substraat dat van PC wordt gevormd werden ook gekenmerkt door Sarfus.

Voor deze analyse, werd een Branding met een polycarbonaat toplayer (genoemd PC van de Branding `') gebruikt. De Inleidende experimenten toonden de inertie van oplosmiddel op toplayer aan.

Analyse van Sarfus toonde geen significante veranderingen in de grootte of de hoogte van micropattern before and after de verschillende incubaties, die dat geen nanoparticledesorbtion tijdens de verschillende was en incubatiestappen voorkwam betekenen, en dat de dikte van micropattern hoofdzakelijk door de dikte van de nanoparticlelaag wordt gedicteerd.

Voor de meting Sarfus, wordt een kaliberbepaling uitgevoerd van 4' - noctyl- 4 cyanobiphenyl (8CB) vloeibaar kristal dat spontaan duidelijk omlijnde multi-layer structuren met staphoogte van 32Å vormt (Figuren 2A & 2B). Het Cijfer 2C toont het beeld Sarfus van micropattern uitgebroed met cocho-VLAG peptide, tetramethylrhodaminelabelled het anti-vlagantilichaam en definitief de antilichamen van geitantimurine.

Bespreking van Resultaten

Figuur 2. A) beeld Sarfus van 8CB daling op de branding van PC. B) Gehaald profiel volgens de gestippelde lijn in (a). C) beeld Sarfus van 27nm micropattern semicarbazides nanoparticles. D) Gehaald profiel volgens de gestippelde lijn in (c). E) weggegaan geeft correspondentie tussen fluorescentieintensiteit en kleuren. Het beeld van de Fluorescentie van micropattern getoond in C). De Schaal op linkerzijde geeft correspondentie tussen fluorescentieintensiteit en kleuren.

In Cijfer 2C, toont de vlek een ring-like storting langs zijn perimeter waarschijnlijk toe te schrijven de migratie van verspreide vaste lichamen aan de periferie van de daling tijdens vloeibare verdamping. De laag 27 NM -NM-nanoparticle binnen micropattern heeft een gemiddelde hoogte van 5.3 NM.

Als andere optische technieken, is de techniek Sarfus gevoelig voor de hoeveelheid van kwestie per eenheidsoppervlakte. Aldus, zou de meting Sarfus van compacte deeltjes (straal R) monolayer (compacityverhouding van 0.74) een laagdikte van 0.74R geven. Het resultaat in deze studie wordt stelde een compacityverhouding van ongeveer 0.4 (5,3/13.5) verkregen voor leidend tot een gemiddelde afstand tussen nanoparticles dicht bij hun diameter (27nm die).

Door zowel beelden op Sarfus (cijfer 2C) en fluorescentie (figuur 2E) wijze te vergelijken, kan men zien dat de doughnutdistributie van gevisualiseerde nanoparticles gebruikend Sarfus een minder belangrijk effect op de homogeniteit van het fluorescentiebeeld heeft. Deze observatie stelt voor dat slechts de externe laag van micropattern voor peptide of voor het antilichaam toegankelijk is.

Conclusie

Een nieuwe methode voor het chemische die micropatterning van polycarbonaat op de druk wordt gebaseerd van functionalized kiezelzuur nanoparticles wordt gerapporteerd. Specifiek vangt van antilichaam is gebleken.

De techniek Sarfus stond de gemakkelijke karakterisering van volledige micropattern en de bepaling van de dikte van de nanoparticlelaag toe.

Voordelen van SARFUS

De voordelen van Sarfus in deze toepassing omvatten:

  • Snelle visualisatie van patroon op oppervlakte
  • Contact dat Niet niet techniek etiketteert
  • Gebied van mening (van 60μm ² aan verscheidene mm ²) voor statistische resultaten
  • Analyseer bij kamertemperatuur en luchtdruk

Bron: Nanolane

Voor meer informatie over deze bron te bezoeken gelieve Nanolane

Date Added: Jun 3, 2012 | Updated: Jun 11, 2013

Last Update: 14. June 2013 09:14

Ask A Question

Do you have a question you'd like to ask regarding this article?

Leave your feedback
Submit