Avbilda av Kemiska Micropatterns på Polycarbonaten för PeptideImmobilization

Täckte Ämnen

Abstrakt begrepp
Inledning
Förberedelse av Glidbanor
Resultat
FluorescenceResultat
SARFUS-Resultat
Diskussion av Resultat
Avslutning
Fördelar av SARFUS

Abstrakt begrepp

I denna studie beskrivas en ny metod för micropatterning polycarbonate ytbehandlar för biomolecular växelverkanstudier. Den Sarfus tekniken låter forcharacterisationen av micropatternsna och avslöjer en munk verkställer som har hopefully en minderårig att verkställa på fluorescencen avbildar.

Inledning

Polycarbonaten (PC) används brett som en substrate i förberedelsen av microfluidic apparater. Tack vare har det potentiella bruket av cd-skivor som plattformar för kick-genomgång analys av biomolecular växelverkan, det nytto- av PC:N för bioanalysis för en tid sedan tilldragit mycket uppmärksamhet.

I denna artikel anmälas en ny metod för kemiskt att micropatterning av en polycarbonatesubstrate (figurera 1). Silicananoparticles (1) functionalized med semicarbazidegrupper skrivevs ut på PC, genom att använda en noncontact piezoelectric microarrayer för att ge micropatterns (2). Semicarbazidegruppgåvan på micropatternsna var platsen-specifikt ligated med oskyddade peptides (3) derivatized av - en oxo aldehydegrupp, för att ge substrate (4): peptides anknöt till micropatternsna till och med semicarbazoneförbindelser. Ytbehandla mellan fläckarna lämnades oförändrad.

Bruket av nanoparticles av olika diametrar (27 till 304 nm) till5At påverkan av ytbehandlar krökning signalerar på styrka och tillfångatagandenoggrannhet för att vara utstuderat. Nanoparticlelagrar på PCsubstraten karakteriserades, genom att använda Sarfus.

Figurera 1. Kemisk micropatterning av polycarbonaten ytbehandlar för den specifika immobilizationen för platsen av peptides.

Förberedelse av Glidbanor

Semicarbazide silicananoparticles (1) var förberedda från silicananoparticles av olika diametrar (27, 82, 151, 192, 256 och 304nm) och skrivevs ut på PCglidbanor (75 X.25 x 1 en mm) genom att använda en noncontact piezoelectric arrayer (tre tappar, sammanlagda ~1 nL).

De utskrivavna PCglidbanorna kläcktes under täcka-exponeringsglas med peptides COCHO-HA eller COCHO-FLAG och därefter anti-HA eller anti-SJUNKER antikroppar som följdes av tetramethylrhodamine-märkta sekundära antikroppar.

Resultat

FluorescenceResultat

Fluorescenceanalys (inte-visade data) visar kicknoggrannheten av tillfångatagandet av anti-HA eller - SJUNKA antikroppar vid immobilized peptides, och den högst signalerar erhölls för 82 - och 27 nm-nanoparticles, en högre närmare detalj ytbehandlar antagligen tack vare område.

SARFUS-Resultat

Micropatternsna som bildades, genom att skriva ut semicarbazidenanoparticles på en PCsubstrate, karakteriserades också av Sarfus.

För denna analys användes en Bränning med en polycarbonatetoplayer (som benämndes `-BränningPC:N'). Förberedande åtgärdexperiment visade trögheten av vätskan på toplayeren.

Sarfus analys visade inga viktiga ändringar i storleksanpassa, eller höjd av micropatternen för och efter de olika inkubationerna som är menande, som ingen nanoparticledesorbtion uppstod under den olika tvagningen och inkubationen, kliver, och, som tjockleken av micropatternen dikteras främst av tjockleken av nanoparticlelagrar.

För den Sarfus mätningen utförs en kalibrering från 4' - kristallen för vätska för cyanobiphenylen för noctyl 4 (8CB), som bildar det spontaneously brunn-definierade mång--lagrar, strukturerar med kliver höjd av 32Å (Figurerar 2A & 2B). Figurera shows 2C som Sarfusen avbildar av en micropattern som kläckas med COCHO--FLAGpeptiden, anti-SJUNKA antikroppen och slutligen tetramethylrhodaminelabelled getantimurineantikroppar.

Diskussion av Resultat

Figurera 2. A) Sarfus avbildar av 8CB tappar på PCbränningen. B) Utdraget profilera längs det prickigt fodrar in (A). C) Sarfus avbildar av nanoparticlesmicropattern för semicarbazides 27nm. D) Utdraget profilera längs det prickigt fodrar in (C). Lämnat E) ger överensstämmelse mellan fluorescencestyrka och färgar. Fluorescence avbildar av micropatternen som visas i C). Fjäll på lämnat ger överensstämmelse mellan fluorescencestyrka och färgar.

I Figurera 2C, fläckskärmarna ennågot liknande insättning längs dess omkrets antagligen rakt flyttningen av skingrade heltäckande till peripheryen av tappa under vätskeavdunstning. Dennanoparticle 27 lagrarinsidan micropatternen har en genomsnittlig höjd av 5,3 nm.

Gilla andra optiska tekniker, den Sarfus tekniken är känsligt till antalet av materien per enhet ytbehandlar område. Således ger den Sarfus mätningen av en skulle kompakt monolayer för partikel (radie R) (compacityförhållande av 0,74) en lagrartjocklek av 0.74R. Resultatet erhållande i denna studie föreslogg att ett compacityförhållande av omkring 0,4 (5,3/13.5) som leder till ett medel, distanserar mellan nanoparticles nästan deras diameter (27nm).

Genom att jämföra avbildar båda i Sarfus (figurerar 2C), och funktionsläge för fluorescence (figurera 2E), ett kan se att munkfördelningen av de visualiserade nanoparticlesna genom att använda Sarfus har en minderårig att verkställa på enhetligheten av fluorescencen avbildar. Denna observation föreslår att endast det yttre lagrar av micropatternen är tillgängligt till peptiden eller till antikroppen.

Avslutning

En ny metod för kemiskt att micropatterning av polycarbonaten som baseras på printingen av functionalized silicananoparticles, anmälas. Specifika tillfångataganden av antikroppen bevisas.

Den tillåtna Sarfus tekniken den lätta karakteriseringen av en hel micropattern och beslutsamheten av nanoparticlen varvar tjocklek.

Fördelar av SARFUS

Fördelarna av Sarfus i denna applikation inkluderar:

  • Fasta visualisation av mönstrar ytbehandlar på
  • Kontakta Non märkande den non tekniken
  • Sätta In av beskådar (från 60μm ² till flera en mm²) för statistiska resultat
  • Analysera på rumstemperaturen, och atmosfäriskt pressa

Källa: Nanolane

För mer information på denna källa behaga besök Nanolane

Date Added: Jun 3, 2012 | Updated: Jun 11, 2013

Last Update: 14. June 2013 09:55

Ask A Question

Do you have a question you'd like to ask regarding this article?

Leave your feedback
Submit