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Posted in | Nanomedicine | Nanoanalysis

Virus Que Cuentan y de Clasificaciones Usando los Instrumentos de NanoSight

Published on June 2, 2009 at 7:50 AM

La capacidad del instrumento de NanoSight los virus de contar y de la talla y sus agregados en la suspensión líquida está llegando a ser cada vez más importante para ésas implicadas en el revelado de vacunas virales.

Las vacunas Virales caen bajo 2 categorías principales:

  • Viven las vacunas (atenuadas)
  • Vacunas (desactivadas) Matadas

Una vacuna atenuada viva es una donde la virulencia del virus se ha reducido, tal que cuando la vacuna se administra al paciente, induce una inmunorespuesta sin causar enfermedad clínica. El virus replegará dentro del ordenador principal y por lo tanto proporcionará a inmunidad durante un largo período de tiempo. La mayoría de vacunas virales acertadas se cae bajo categoría incluyendo las vacunas para el sarampión, las paperas, el sarampión, la gripe, la fiebre amarilla y la poliomielitis.

Los virus Desactivados se utilizan en caso de que una vacuna atenuada apropiada no se haya desarrollado o en caso de que el virus es probablemente probable invertir del formulario atenuado, en un formulario más virulento del virus. El virus no puede replegar dentro del cuerpo y por lo tanto hay típicamente una reacción más inferior del ordenador principal a la vacuna y se requieren las dosis a menudo múltiples. Las vacunas virales desactivadas campo común incluyen más tifoideo, rabia y poliomielitis.

El papel de NanoSight en el proceso de la purificación del virus
El revelado de vacunas virales requiere virus ser cultivado en células vivas, ser cosechado y después ser purificado. Los fabricantes Vaccíneos están interesados en vigilar la pureza de la preparación viral en los diversos escenarios dominantes del proceso de la purificación y entienden la concentración de presente del material del virus. Hay donde el instrumento de NanoSight agrega valor real. La aproximación de la partícula-por-partícula a clasificar y a contar virus puede distinguir fácilmente virus de escombros de célula más grandes y las distribuciones de alta resolución del número se pueden utilizar para calcular el número de virus comparado con el número de agregados del virus. El Cálculo de la concentración de virus presentes es esencial en la comprensión de la baja del producto en cada paso de progresión del proceso de la purificación (y por lo tanto se puede utilizar para optimizar el proceso en términos de rendimiento de producto) y también la concentración del virus es esencial al intentar entender la dosificación en el producto final.

Viva comparado con título y la comparación virales totales con análisis de la contagiosidad
La capacidad de la técnica de NanoSight de clasificar y de contar un virus si está viva o inactiva permite que los utilizadores obtengan una idea de las concentraciones relativas de partículas contagiosas comparado con partículas totales cuando está utilizada conjuntamente con análisis de la contagiosidad. Los análisis de la Contagiosidad tales como análisis de la placa son la técnica más ampliamente utilizada para estimar títulos virales vivos en manufactura vaccínea. Para cuantificar exactamente títulos virales infecciosos, estas técnicas confían en un único virion que infecta una célula en una cultura, réplica subsiguiente y la infección de células circundantes hace una placa formar que pueda entonces ser cuantificada.

Estos análisis requieren Sin Obstrucción el virus ser infeccioso y pues tales no son aplicables para las vacunas desactivadas. Estos análisis no explican los virus que han perdido contagiosidad durante el proceso de la purificación en una vacuna atenuada viva. Como tal, porque las vacunas atenuadas vivas, un título viral según lo calculado por un análisis de la contagiosidad variará considerablemente del título viral total según lo contado por la técnica de NanoSight. Se encuentra con frecuencia que la relación de transformación de contagioso a las partículas no-contagiosas puede variar sea 2 o aún 3 órdenes de magnitud tales que la relación de transformación de virus contagiosos es 1/1000 del contenido total de la partícula. Esto tiene implicaciones sin obstrucción, cuando la comprensión de la eficacia del proceso de fabricación y de pasos de progresión se puede hacer para mejorar y para optimizar el rendimiento de producto basado en los datos de NanoSight. Semejantemente sobre la administración del producto final, la presencia de virus no contagiosos también inducirá una inmunorespuesta (según una vacuna desactivada), un factor que necesite ser considerado al entender la dosificación en el producto final.

Agregación de Comprensión de virus
La talla de partícula de las dimensiones de la técnica de NanoSight sobre una base de la partícula-por-partícula y como tal puede generar distribuciones dimensionales de alta resolución de partícula. La distribución dimensional se puede utilizar para estimar concentraciones relativas de monomérico comparado con el material agregado debido al hecho de que la talla de partícula de las dimensiones de la técnica no sólo pero cuenta el número de partículas de una talla específica. El aspecto cualitativo de la técnica también proporciona a un discernimiento rápido en el estado de la agregación, como puede ser visto en las imágenes abajo. La primera imagen muestra una preparación altamente purificada del virus de gripe mientras que la segunda imagen muestra una muestra con un alto nivel de agregación. Independiente de una distribución del número, el utilizador puede entender rápidamente y seguro el estado de la agregación dentro de una preparación.

Los análisis de la Contagiosidad no pueden distinguir entre el material agregado y no-agregado en una preparación viral. Una placa que forma la unidad puede ser un único virion o un único agregado que contiene muchos virus potencialmente contagiosos. Si puede el material viral agregado administrado de-agregado in vivo y como tal, un análisis de la contagiosidad puede subestimar grueso el contenido viral infeccioso dentro de una preparación.

Resumen

  • La técnica de NanoSight se puede utilizar como herramienta para cuantificar el contenido viral total y se puede utilizar junto a análisis de la contagiosidad para calcular las concentraciones relativas de infeccioso a los virus no contagiosos en una vacuna atenuada viva
  • La técnica de NanoSight se adapta idealmente para calcular títulos virales en vacunas desactivadas - los análisis de la contagiosidad no se pueden utilizar para estas vacunas
  • Las concentraciones Virales son importantes al intentar entender el rendimiento de producto, la inmunorespuesta y la reacción alergénica potencial a la vacuna
  • El estado de la agregación en cada paso de progresión del proceso de fabricación y en el producto final y se vigile y se mide usando la técnica de NanoSight
  • Los análisis de la Contagiosidad no tienen ninguna capacidad de discriminar únicos virions del material viral agregado

Last Update: 14. January 2012 01:59

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