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Posted in | Nanomedicine | Nanoanalysis

Virus de Compte et de Classement Par Taille Utilisant des Instruments de NanoSight

Published on June 2, 2009 at 7:50 AM

La capacité de l'instrument de NanoSight de compter et classer des virus et leurs agrégats dans la suspension liquide devient de plus en plus importante pour ceux concernées dans le développement des vaccins viraux.

Les vaccins Viraux tombent au-dessous de 2 catégories principales :

  • Vivent les vaccins (atténués)
  • Vaccins (inactivés) Détruits

Un vaccin atténué sous tension est un où la virulence du virus a été réduite, tel que quand le vaccin est géré au patient, il induit une réaction immunitaire sans entraîner la maladie clinique. Le virus reproduira dans l'hôte et par conséquent fournira l'immunité pendant un laps de temps étendu. La majorité de vaccins viraux réussis tombent sous la catégorie comprenant des vaccins pour la rougeole, l'oreillons, la rubéole, la grippe, la fièvre jaune et la poliomyélite.

Des virus Inactivés sont utilisés dans les cas où un vaccin atténué approprié n'a pas été développé ou dans les cas où le virus est susceptible vraisemblablement de retourner de la forme atténuée, dans une forme plus virulente du virus. Le virus ne peut pas reproduire dans le fuselage et par conséquent il y a type une réaction inférieure d'hôte au vaccin et des doses souvent multiples sont exigées. Plus les vaccins viraux inactivés par terrain communal comprennent typhoïde, la rage et la poliomyélite.

Le rôle de NanoSight dans le procédé de purification de virus
Le développement des vaccins viraux exige des virus d'être cultivés en cellules sous tension, d'être moissonnés et puis épurés. Les constructeurs Vacciniques sont intéressés à surveiller la pureté de la préparation virale aux étapes clé variées du procédé de purification et comprennent la concentration du présent de matériau de virus. Il y a où l'instrument de NanoSight ajoute la valeur réelle. L'élan de particule-par-particule à classer et à compter des virus peut facilement discerner des virus de plus grandes saletés de cellules et des distributions de haute résolution de numéro peuvent être employées pour prévoir le nombre de virus contre le nombre d'agrégats de virus. L'Estimation de la concentration des virus présents est essentielle en comprenant la perte de produit à chaque phase du procédé de purification (et par conséquent peut être utilisée pour optimiser le procédé en termes de rendement de produit) et également la concentration de virus est essentielle en essayant pour comprendre le dosage dans le produit fini.

Vivez contre le titre et la comparaison viraux totaux avec des analyses de pouvoir infectant
La capacité de la technique de NanoSight de classer et compter un virus si elle est sous tension ou inactive permet aux utilisateurs d'obtenir une idée des concentrations relatives des particules contagieuses contre les particules totales une fois utilisée conjointement avec des analyses de pouvoir infectant. Les analyses de Pouvoir infectant telles que des analyses de plaque sont la technique la plus très utilisée pour estimer des titres viraux sous tension dans la fabrication vaccinique. Pour mesurer exactement des titres viraux infectieux, ces techniques se fondent sur un virion unique infectant une cellule dans une culture, réplication ultérieure et l'infection des cellules environnantes fait former une plaque qui peut alors être mesurée.

De Manière Dégagée ces analyses exigent du virus d'être infectieux et car telles ne s'appliquent pas pour les vaccins inactivés. Ces analyses ne représentent pas les virus qui ont détruit le pouvoir infectant pendant le procédé de purification dans un vaccin atténué sous tension. En soi, parce que les vaccins atténués sous tension, un titre viral comme prévu par une analyse de pouvoir infectant variera considérablement de tout le titre viral comme compté par la technique de NanoSight. On le constate fréquemment que le rapport de contagieux aux particules non-contagieuses peut varier soit 2 ou même 3 ordres de grandeur tels que le taux des virus contagieux est 1/1000 de tout le teneur de particules. Ceci a des implications dégagées, quand la compréhension de l'efficacité du processus de fabrication et des phases peut être effectuée pour améliorer et optimiser le rendement de produit basé sur des données de NanoSight. De Même lors de la gestion du produit fini, la présence des virus non contagieux induira également une réaction immunitaire (selon un vaccin inactivé), un facteur qui doit être considéré en comprenant le dosage dans le produit fini.

Totalisation de Compréhension des virus
La dimension particulaire de mesures de technique de NanoSight sur une base de particule-par-particule et en tant que tels peut produire des distributions de dimension particulaire de haute résolution. La distribution de grandeurs peut être employée pour estimer des concentrations relatives de monomérique contre les matériaux totalisés étant donné que la dimension particulaire de mesures de technique non seulement mais compte le nombre de particules d'une taille particulière. L'aspect qualitatif de la technique fournit également une analyse rapide dans la condition de la totalisation, comme peut être vu dans les images ci-dessous. La première image affiche une préparation fortement épurée de virus de la grippe tandis que la deuxième image affiche un échantillon avec un niveau élevé de totalisation. Indépendant d'une distribution de numéro, l'utilisateur peut rapidement et sûrement comprendre la condition de la totalisation dans une préparation.

Les analyses de Pouvoir infectant ne peuvent pas distinguer le matériau totalisé et non-totalisé dans une préparation virale. Une plaque formant l'ensemble peut être un virion unique ou un agrégat unique contenant beaucoup de virus potentiellement contagieux. Si le matériau viral totalisé géré peut De-agrégat in vivo et en tant que, une analyse de pouvoir infectant peut excessivement sous-estimer le teneur viral infectieux dans une préparation.

Résumé

  • La technique de NanoSight peut être employée comme outil pour mesurer tout le teneur viral et peut être utilisée à côté des analyses de pouvoir infectant pour prévoir les concentrations relatives d'infectieux aux virus non contagieux dans un vaccin atténué sous tension
  • La technique de NanoSight est idéalement adaptée pour prévoir des titres viraux dans les vaccins inactivés - des analyses de pouvoir infectant ne peuvent pas être utilisées pour ces vaccins
  • Les concentrations Virales sont importantes en essayant pour comprendre le rendement de produit, la réaction immunitaire et la réaction allergène potentielle au vaccin
  • La condition de la totalisation à chaque phase du processus de fabrication et dans le produit fini et soit surveillée et mesurée utilisant la technique de NanoSight
  • Les analyses de Pouvoir infectant n'ont aucune capacité de distinguer les virions uniques du matériau viral totalisé

Last Update: 17. January 2012 01:20

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