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Posted in | Nanomedicine | Nanoanalysis

Virus di Conteggio e d'Incollatura Facendo Uso degli Strumenti di NanoSight

Published on June 2, 2009 at 7:50 AM

La capacità dello strumento di NanoSight virus di dimensione e di contare ed i loro cumuli nella sospensione liquida sta diventando sempre più importante a quelle in questione nello sviluppo dei vaccini virali.

I vaccini Virali rientrano in 2 categorie principali:

  • Vivono i vaccini (attenuati)
  • Vaccini (inattivati) Uccisi

Un vaccino attenuato in tensione è uno dove la virulenza del virus è stata diminuita, tale che quando il vaccino è amministrato al paziente, induce una risposta immunitaria senza causare la malattia clinica. Il virus ripiegherà all'interno del host e quindi fornirà l'immunità per un periodo esteso. La maggior parte di riusciti vaccini virali rientra nella categoria compreso i vaccini per il morbillo, la parotite epidemica, la rosolia, l'influenza, la febbre gialla e la polio.

I virus Inattivati sono usati nei casi in cui un vaccino attenuato appropriato non è stato sviluppato o nei casi in cui il virus è probabilmente probabile ritornare dal modulo attenuato, in un modulo più virulento del virus. Il virus non può ripiegare all'interno dell'organismo e quindi c'è tipicamente una risposta più bassa ospite al vaccino e le dosi spesso multiple sono richieste. Più i vaccini virali inattivati terreno comunale includono tifoide, la rabbia e la polio.

Il ruolo di NanoSight nel trattamento di depurazione del virus
Lo sviluppo dei vaccini virali richiede i virus di essere coltivato in celle in tensione, di essere raccolto e poi di essere depurato. I produttori Vaccino sono interessati nel video della purezza del preparato virale nelle varie fasi chiave del trattamento di depurazione e capiscono la concentrazione di presente del materiale del virus. C'è dove lo strumento di NanoSight aggiunge il valore reale. L'approccio della particella-da-particella all'incollatura ed a contare dei virus secondo la misura può distinguere facilmente i virus dai più grandi detriti delle cellule e le distribuzioni di alta risoluzione di numero possono essere usate per calcolare il numero dei virus contro il numero dei cumuli del virus. La Stima della concentrazione di virus presenti è essenziale nella comprensione della perdita di prodotto ad ogni punto del trattamento di depurazione (e quindi può essere usata per ottimizzare il trattamento in termini di rendimento di prodotto) ed egualmente la concentrazione del virus è essenziale quando prova per capire il dosaggio nel prodotto finito.

Viva contro il titolo ed il confronto virali totali con le analisi di infettività
La capacità della tecnica di NanoSight di graduare e contare un virus secondo la misura se è in tensione o inattiva permette che gli utenti ottengano un'idea delle concentrazioni relative di particelle infettive contro le particelle totali una volta usata insieme con le analisi di infettività. Le analisi di Infettività quali le analisi della placca sono la tecnica più ampiamente usata per stimare i titoli virali in tensione nella lavorazione vaccino. Per quantificare esattamente i titoli virali contagiosi, queste tecniche contano su un singolo virion che infetta un unicellulare in una cultura, replica successiva e l'infezione delle celle circostanti induce una placca a formarsi che può poi essere quantificata.

Queste analisi richiedono Chiaramente il virus di essere contagioso e poichè tali non sono applicabili per i vaccini inattivati. Queste analisi non rappresentano i virus che abbiano perso l'infettività durante il trattamento di depurazione in un vaccino attenuato in tensione. Come tale, dato che vaccini attenuati in tensione, un titolo virale come calcolato da un'analisi di infettività varierà considerevolmente dal titolo virale totale come contato dalla tecnica di NanoSight. È trovato frequentemente che il rapporto di infettivo alle particelle non infettive può variare è 2 o persino 3 ordini di grandezza tali che il rapporto dei virus infettivi è 1/1000 del contenuto totale della particella. Ciò ha chiare implicazioni quando capire l'efficacia del processo di fabbricazione ed i punti può essere fatta per migliorare ed ottimizzare il rendimento di prodotto basato sui dati di NanoSight. Similmente sopra l'amministrazione del prodotto finito, la presenza di virus non infettivi egualmente indurrà una risposta immunitaria (secondo un vaccino inattivato), un fattore che deve essere considerato quando capisce il dosaggio nel prodotto finito.

Aggregazione di Comprensione dei virus
La dimensione delle particelle delle misure di tecnica di NanoSight su una base della particella-da-particella e come tali può generare le distribuzioni di dimensione delle particelle di alta risoluzione. La distribuzione per ampiezza può essere usata per stimare le concentrazioni relative di monomerico contro materiali cumulati dati che la dimensione delle particelle delle misure di tecnica non solo ma conti il numero delle particelle di una dimensione specifica. L'aspetto qualitativo della tecnica egualmente fornisce una comprensione rapida nello stato dell'aggregazione, può essere veduto nelle immagini qui sotto. La prima immagine mostra un preparato altamente depurativo del virus dell'influenza mentre la seconda immagine mostra un campione con un alto livello di aggregazione. Indipendente da una distribuzione di numero, l'utente può capire rapidamente ed attendibilmente lo stato di aggregazione all'interno di un preparato.

Le analisi di Infettività non possono distinguere fra materiale cumulato e non cumulato in un preparato virale. Una placca che forma l'unità può essere un singolo virion o un singolo cumulo che contiene molti virus potenzialmente infettivi. Se il materiale virale cumulato amministrato può de-cumulo in vivo e come tale, un'analisi di infettività può grossolanamente sottovalutare il contenuto virale contagioso all'interno di un preparato.

Riassunto

  • La tecnica di NanoSight può essere usata come strumento per quantificare il contenuto virale totale e può essere usata accanto alle analisi di infettività per calcolare le concentrazioni relative di contagioso ai virus non infettivi in un vaccino attenuato in tensione
  • La tecnica di NanoSight è adatta idealmente per calcolare i titoli virali in vaccini inattivati - le analisi di infettività non possono essere usate per questi vaccini
  • Le concentrazioni Virali sono importanti quando prova da capire il rendimento di prodotto, la risposta immunitaria e la reazione allergene potenziale al vaccino
  • Lo stato dell'aggregazione ad ogni punto del processo di fabbricazione e nel prodotto finito ed è riflesso e misurato facendo uso della tecnica di NanoSight
  • Le analisi di Infettività non hanno capacità di discriminare i singoli virions da materiale virale cumulato

Last Update: 17. January 2012 00:49

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