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Posted in | Nanomedicine | Nanoanalysis

計數和漿紗病毒使用NanoSight儀器

Published on June 2, 2009 at 7:50 AM

NanoSight儀器數量和尺寸懸浮液中的病毒,其聚集的能力參與病毒疫苗的發展正變得越來越重要。

病毒疫苗屬於 2個主要類別:

  • 演唱會(減毒)疫苗
  • 死亡(滅活)疫苗

一種減毒活疫苗病毒的毒性已經降低,例如,當疫苗,對病人,誘導而不引起臨床疾病的免疫反應。該病毒會複製主機內,從而提供一個長時間的免疫力。大多數成功的病毒疫苗屬於類別,包括麻疹,腮腺炎,風疹,流感,黃熱病和小兒麻痺症疫苗。

滅活病毒在尚未制定相應的弱毒疫苗的情況下,或在該病毒被認為是有可能恢復從減毒形式的病毒更致命的形式,案件。該病毒不能在體內複製,因此通常有一個較低的宿主反應的疫苗,往往則需要多劑量。最常見的病毒滅活疫苗,包括傷寒,狂犬病,小兒麻痺症。

NanoSight的病毒純化過程中的作用
病毒在活細胞進行培養,收穫,然後純化病毒疫苗的發展需要。疫苗生產商的興趣監測在純化過程中的各個關鍵階段的病毒準備的純度和了解病毒物質目前的濃度。有NanoSight儀器增加真正的價值。從更大的細胞碎片和高分辨率的數量分佈,可用於病毒聚集人數計算 VS病毒數量,大小和計數病毒粒子,粒子的方法可以很容易地分辨病毒。濃度的病毒目前的估計是必不可少的,在了解產品的損失,在淨化過程的每個步驟(,因此可以用在產品產量方面的優化過程)和病毒濃度是必要時,試圖了解在劑量最終產品。

現場與總的病毒滴度和傳染性分析比較
NanoSight技術能力的大小和計數的病毒,無論是居住或活動,可以讓用戶獲得感染傳染性檢測一起使用時的粒子與總顆粒的相對濃度的想法。如斑塊檢測的感染實驗是使用最廣泛的技術,估計在活疫苗生產的病毒滴度。為了準確地量化傳染性病毒滴度,這些技術依賴單一的病毒粒子感染了一種文化的單細胞,隨後的複製和感染周圍的細胞會導致形成斑塊,然後可以量化的。

顯然,這些檢測需要病毒的傳染性,因此不適用滅活疫苗。這些分析沒有考慮到它已經失去了傳染性病毒減毒活疫苗在淨化過程。因此,為減毒活疫苗,傳染性檢測計算病毒滴度會有所不同從總的病毒滴度大大NanoSight技術計算。這是經常發現,感染非感染性顆粒的比例可以有所不同幅度等,感染病毒的比例是1 / 1000的總顆粒含量是2或3,甚至訂單。這有明顯的影響,了解製造過程中的功效,可改善和優化產品產量的基礎上NanoSight數據的步驟。根據最終產品的管理,非感染性病毒的存在同樣也會誘發的免疫反應(如每一種滅活疫苗),理解在最終產品中的用量時,需要考慮的一個因素。

了解病毒的聚合
NanoSight技術措施,對一個粒子,粒子的基礎上粒子的大小,因此可以產生高分辨率粒度分佈。可以用來估計單體與聚合材料,由於這樣的事實,該技術不僅測量顆粒大小,但計算一個特定大小的顆粒的數量相對集中的發行規模。該技術的質的方面也提供快速洞察到聚集狀態,可以看到下面的圖片。第一個圖像顯示高度純化的流感病毒的準備,而第二幅圖像顯示了一個樣本的高度聚集。一個獨立的分佈數量,用戶可以快速,可靠地了解在準備聚集狀態。

感染性的實驗是無法區分聚合和非聚合材料在病毒的準備。一個空斑形成單位,可能是一個單一的病毒粒子或包含許多潛在的感染病毒的一個聚合。如果管理病毒聚合材料骨料體內,傳染性檢測可能低估傳染性的病毒含量在準備。

摘要

  • NanoSight技術可以被用來作為工具,以量化總病毒含量和可一起傳染性檢測減毒活疫苗用於計算非傳染性感染病毒的相對濃度
  • NanoSight技術非常適合計算病毒滅活疫苗滴度 - 傳染性檢測不能使用這些疫苗
  • 病毒的濃度是重要的,當試圖了解產品的產量,免疫反應和潛在的過敏性反應的疫苗
  • 在製造過程中的每一步,並在最終產品中的聚集狀態和使用NanoSight技術監測和測量
  • 感染性的實驗並沒有歧視,從單一的病毒粒子聚合病毒材料的能力

Last Update: 4. October 2011 19:14

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