Биохимические «О-Switch" может решить вызов очистки белков

Published on October 20, 2009 at 6:53 PM

Препаратов на основе инженерных белков представляют собой новый рубеж для фармацевтических производителей. Даже после того как они обнаружили белок, который может лечь в основу очередного наркотиков Интересно, однако, они должны противостоять давнюю проблему: как производить большое количество белка в очень чистом виде. Теперь, несколько институциональных исследовательская группа в том числе биохимик из Национального института стандартов и технологий (NIST) , возможно, нашли * новое решение в ферментативных "кухонный комбайн" они могут активировать по собственному желанию.

Оболочкой (в зеленом вверху), с нужный белок с ним связано (желтым цветом справа), во-первых прилипает к инженерии фермента (в синем atbottom слева) - позволяет примесей и других белков, которая будет смыта. Затем настой инициирования молекул (красные точки) вызывает фермент отрезать нужный белок (в точке, где оболочки и белка подключения), которая может быть собрана в чистом виде. Оболочка может быть смыт, и процесс повторяется. Фото: NIST

Команда нашла эффективный способ уборки очищенной молекул белка путем изменения фермента, который почвенных бактерий использовать, чтобы сломать их пищу. В своем естественном виде, этот фермент будет мало пользы разработчиков лекарств, но команда изменила его так, что ее можно активизировать в нужный момент. Создавая по существу "на переключатель" для активности фермента, команда нашла способ отделить один, нужный белок из смеси тысяч порожденные живой клетки, которая остается природный завод белка биотехнологии выбора.

Бактерии используют фермент, называемый субтилизина, как своего рода кухонный комбайн: После его производства внутри страны, они выделяют фермент в почву, где она использует крохотные "лезвием" изрубить белков в удобоваримый куски. Потому что это может повредить интерьер бактерии, в лезвие имеет защитную оболочку, которая приходит только выключается один раз фермент имеет выход ячейки.

"Фермента и оболочка сильно притягиваются друг к другу. Первый акт фермента является сокращение оболочки прочь," говорит NIST в Трэвис Галлахер. "Метод использует свою привлекательность для того, чтобы изолировать белок мы хотим."

Команда сначала создает много "без футляра" копий фермента, которые модифицированы функционировать только в присутствии запуска молекулы, такие как фтор. Измененные ферменты связаны с поверхности фильтра. Затем команда использует измененных клеток для создания массовых количествах потенциально терапевтических белков, каждый экземпляр которого имеет субтилизина влагалище прикрепляется к ней. После сбора урожая этих белков, а также тысячи других, которые растут в сотовой интерьер, они фильтруют смесь через сито, где белка оболочки пары поймали и увяз в субтилизина в то время как остальная смесь стекает.

На данный момент, команда щелчки их коммутатор. Они добавляют, немного фтора и фермента ножницы связь между оболочкой и белка, высвобождая нужный белок свободных практически всех примесей. "Этот метод может предположительно быть использованы для получения какого-либо белка вам нравится, и процесс повторяется, а оболочка может быть снята для очередного раунда очистки", говорит Галлахер. "Для большинства белков, метод может достичь большего, чем 95-процентной чистоты на один шаг."

Исследовательская группа также включает в себя членов из Потомака Affinity Белки, LLC (PAP) и Университета штата Мэриленд Институт биотехнологии (UMBI). UMBI держит патент, который был разрешен к PAP. Работа выполнена при поддержке грантов от Национального института здоровья и Фонд Билла и Мелинды Гейтс.

* Т. Галлахер, Б. Руан, М. Лондоне, Брайан М. и П. Н. Брайан. Структура переключаемый субтилизина комплекса с субстратом и с азид активатор. Биохимия, DATE, страниц, DOI.

Last Update: 5. October 2011 10:23

Tell Us What You Think

Do you have a review, update or anything you would like to add to this news story?

Leave your feedback
Submit