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Evaluación Directa de la Cinasa en Muestras de Tejido Usando la Plataforma Integrada de Microfluidic y de la Proyección De Imagen

Published on November 2, 2010 at 4:08 AM

La transmisión de señales Inadecuada del incremento y de la supervivencia, que lleva al incremento aberrante de células cancerosas, es una fuerza impulsora detrás de tumores.

Mucha de investigación de cáncer actual se centra en las enzimas de la cinasa cuyas mutaciones son responsables de tal transmisión de señales disregulated, y mucho la terapéutica anticáncer molecular apuntada acertada se dirige en la actividad de inhibición de la cinasa.

Ahora, los investigadores del UCLA del Instituto del Crump para la Proyección De Imagen Molecular, el Instituto para el Remedio Molecular, el Instituto de California NanoSystems, el Centro Completo del Cáncer de Jonsson y el departamento de la farmacología molecular y médica han desarrollado un método in vitro para evaluar actividad de la cinasa en muestras de tejido minuciosas de pacientes. El método implica una plataforma integrada del microfluidics y de la proyección de imagen que pueda reproductivo medir actividad enzimática de la cinasa de únicamente 3.000 células.

En un papel el 1 de noviembre publicado en la Investigación de Cáncer del gorrón, los investigadores del UCLA describen varios nuevos avances tecnológicos en la detección del microfluidics y de la proyección de imagen que co-desarrollaron para medir actividad de la cinasa en muestras de la pequeño-entrada de información. Las personas aplicaron su análisis microfluidic de la cinasa a las muestras humanas del paciente de la leucemia.

“Porque el dispositivo requiere solamente una muestra de tejido muy pequeña dar resultados, este método crea el nuevo potencial para la experimentación directa de la cinasa y los diagnósticos en sangre paciente, la médula y la aguja hacen una biopsia muestras,” dijo al principal investigador Thomas Graeber, profesor del UCLA de la farmacología molecular y médica. “Por ejemplo, las propiedades de la célula madre de la leucemia se pueden estudiar directamente de muestras pacientes.”

Para mejorar la detección de la radio-señal, las personas utilizaron un detector nuevo de la proyección de imagen, bajo la forma de cámara beta de estado sólido, que puede detectar sensible y espacial resolver la señal radioactiva directamente de una viruta microfluidic. La cámara beta proporciona a un retrato de la actividad en la viruta, permitiendo la supervisión en tiempo real del funcionamiento y del resultado del análisis. Es altamente sensible y cuantitativa.

En su primera aplicación del dispositivo, las personas midieron la actividad de la cinasa transformada responsable de leucemia mielógena crónica. Esta mutación es apuntada por el inhibidor clínico acertado Gleevec de la cinasa.

“No somos conscientes del otro trabajo que demuestra proyección de imagen radioactiva integrada de estado sólido de una plataforma microfluidic,” dijo Arion Chatziioannou, profesor del co-investigador del UCLA de la farmacología molecular y médica.

El radioanálisis in vitro microfluidic resultante de la cinasa mejora la eficiencia de la reacción, comparada con análisis estándar, y se puede tramitar en mucho menos tiempo. Esta mayor eficiencia, acoplada con la alta sensibilidad de la cámara beta, reduce el periodo de la célula de muestra entrado por dos a tres órdenes de magnitud, comparados con análisis convencionales y 96 bien. El análisis incluye un paso de progresión del immunocapture de la cinasa para aumentar especificidad hacia la cinasa del interés.

“Para conseguir el análisis de la cinasa para trabajar en un ambiente microfluidic, necesitamos desarrollar nuevos protocolos y los reactivos para los bordes eficientemente de manipulación de la captura de la cinasa del sólido-soporte usando las válvulas microfluidic del desvío-y-desbloquear,” dijo al co-investigador Hsian-Rong Tseng, profesor del UCLA de la farmacología molecular y médica.

La “Integración de la cámara beta de estado sólido permite que los investigadores vigilen el análisis en el tiempo real, que probó útil durante nuestro revelado y la prueba del protocolo,” dijo el Colmillo de Cong, el estudiante de tercer ciclo de cabeza en el proyecto. “La plataforma microfluidic y de la proyección de imagen integrada abre nuevas posibilidades y hace la miniaturización de muchas pruebas biológicas radiactividad-basadas comunes al reino microfluidic posible.”

“Con la integración de la cámara compacta, el análisis microfluidic del formato tiene el potencial de ser convertido en banco de trabajo-parte superior barata, las unidades independientes,” dijo al becario postdoctoral Nam Vu del UCLA, que llevó el revelado de la proyección de imagen.

“Tomado junta, la entrada de información reducida de la muestra requerida, la época disminuida del análisis, y la reproductibilidad de control digital del radioanálisis microfluidic de la cinasa de las personas facilita la experimentación directa en las muestras clínicas que son preciosas o perecederas,” dijeron al becario postdoctoral Yanju Wang del UCLA, que llevó el diseño de la red de los componentes microfluidic que funcionan con el análisis.

Los experimentos Futuros desarrollarán las condiciones reproductivas de la colección y de la medición de la muestra para las muestras pacientes primarias.

Otras aplicaciones podían incluir el perfilado de las muestras modelo pacientes y animales para su sensibilidad de la droga del cinasa-inhibidor, o la medición de la actividad de la cinasa de las células madres, de las células madres de cáncer y de otras células inmunes raras.

Fuente: http://www.newsroom.ucla.edu/

Last Update: 11. January 2012 19:49

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