Sømløs integrasjon av lysmikroskopi og AFM bilder

Published on April 19, 2011 at 7:20 PM

JPK Instruments , en verdensledende produsent av nanoanalytic instrumentering for forskning innen biovitenskap og myke materie, gir en unik programvarepakke for å gjøre visningen av lysmikroskopi bilder sammen med atomic force mikroskopi bilder en sømløs øvelse. Denne pakken heter DirectOverlay.

Atomic force mikroskopi (AFM) er et kraftig verktøy for å undersøke et stort utvalg av forskjellige prøver med nanometer skala vedtak under fysiologiske forhold. Samt gi topografiske målinger, informasjon om interaksjon krefter og mekaniske egenskaper som vedheft og elastisitet kan også fås. Perfekt integrering av AFM med en optisk oppsett kan øke omfanget av applikasjoner og åpner opp mange muligheter for sammenfaller strukturell informasjon med optisk informasjon som functionalized merking av visse komponenter.

Et eksempel på kraften i DirectOverlay fra JPK: En fluorescens image høydepunkter tre individuelle merket DNA-molekyler, mens 3D-bildet zoomer inn til en høy oppløsning 700nm AFM bilde. (Eksempel courtesy of Dr. M. Modesti, CNRS Marseilles)

For å oppnå den perfekte kombinasjon av optikk og AFM på molekylært skala, må forvrengninger unngås. Dette vil resultere i to bilder, slik som optisk og AFM bilder, som ikke perfekt overlegg. Grunner for forvrengninger inkluderer avvik som følge av linser og speil av optikken systemet. Denne ikke-lineære stretching, roterende og motregning av optiske bilder er til stede i nesten alle typer optiske oppsett.

For å generere en sømløs overlapping av begge teknikkene, utviklet JPK en cutting-edge kalibrering metoden, som kalles DirectOverlay, som bruker nøyaktigheten av AFM lukket skanning system for å muliggjøre en sann visning av absolutt vinkler og lengde koordinater. Kalibreringen er gjort automatisk og bruker de kjente posisjoner og forskyvninger av cantilever å kalibrere den optiske bildet inn i AFM koordinater. For å generere en perfekt match av optiske og AFM bilde, er 25 eller flere poeng som brukes i kalibrering algoritmen. På hvert punkt, er en optisk bilde anskaffet og plasseringen av cantilever spissen er automatisk registreres i hver optisk bilde uten inngang på cantilever vinkel, form eller forstørrelse. Algoritmen utfører deretter en ulineær konvertering, og som et resultat, er den optiske bildet korrigert for eventuelle objektiv ufullkommenhet og omgjort til lineært AFM lengden koordinater. Dette gir en perfekt integrering av optisk og AFM data med sub-diffraksjon grensen presisjon.

Endelig er kalibrert optiske bildet overført til JPK SPM-programvaren, slik at AFM scan regioner kan velges innenfor optiske bildet. Direkte "i optisk bilde" utvalg av AFM målinger (imaging, kartlegging og kraft spektroskopi) fører til mer effektiv eksperimenter, og reduserer dramatisk oversiktsbilde skanning i AFM.

Last Update: 4. October 2011 19:19

Tell Us What You Think

Do you have a review, update or anything you would like to add to this news story?

Leave your feedback
Submit