Universiteit van St Andrews Gebruik NanoSight NTA om Exosomes karakteriseren

Published on May 10, 2011 at 6:53 PM

NanoSight , wereldwijd toonaangevende fabrikanten van unieke nanodeeltjes karakterisering technologie meldt dat de School of Medicine van de Universiteit van St Andrews is nanodeeltjes tracking analyse, NTA, gebruiken om exosome gedrag te karakteriseren.

Dr. Simon Powis en zijn collega's aan de universiteit van St Andrews werken om te begrijpen hoe een reeks van moleculen die betrokken zijn bij de verdediging van het immuunsysteem tegen intracellulaire pathogenen functie. Deze moleculen worden genoemd major histocompatibility complex (MHC) klasse I moleculen, en ze zijn uitgedrukt op bijna elke cel in het lichaam. Hun relevantie voor de geneeskunde is het meest bekend omdat ze een van de belangrijkste sets van genen die moeten nauw worden afgestemd wanneer een orgaantransplantatie is gemaakt, omdat anders de transplantatie kunnen worden geweigerd.

Dr Simon Powis met zijn NanoSight LM10 systeem om exosome gedrag te bestuderen

Het is nu bekend dat hun exacte rol in het normale immuunsysteem te binden kleine fragmenten van aangetaste virale eiwitten die ze tonen aan T-lymfocyten van het immuunsysteem. Hierdoor kan de specifieke detectie van 'vreemde' eiwitten, dat wil zeggen van potentiële pathogenen, en maakt het immuunsysteem specifiek te detecteren en geïnfecteerde cellen te doden, terwijl het verlaten van een naburige niet-geïnfecteerde cellen alleen. Daarnaast is er is een fascinerende auto-immuunziekte nauw verbonden met een bepaald type van MHC klasse I molecuul. Meer dan 90% van de patiënten met een vorm van inflammatoire artritis genoemd de ziekte van Bechterew, die de wervelkolom aantast, drukt een specifiek type van de MHC klasse I molecuul genaamd HLA-B27. De link tussen deze artritis conditie en HLA-B27 is bekend voor bijna 40 jaar, maar de ziekte-mechanisme en hoe HLA-B27 is betrokken is nog niet begrepen.

Terwijl de Powis groep waren MHC klasse I moleculen tot expressie gebracht op exosomes studeren, werd ontdekt dat ze een nieuw type van structuur uit te drukken. De staart regio van de MHC klasse I molecuul, die zit binnen in de exosome, kan vaak vormen een disulfide-binding koppeling met een andere MHC klasse I molecuul, waarmee twee moleculen dicht bij elkaar in een dimeer structuur. Dit betekent normaal gesproken niet gebeuren op cellen, omdat het cytoplasma heeft een reducerende omgeving, het voorkomen van disulfidebindingen van het vormen. Echter, in exosomes de capaciteit om een ​​reducerend milieu te handhaven lijkt te zijn verloren gegaan.

De groep is nu onderzoekt of de cellen van het immuunsysteem deze MHC klasse zie ik dimeren structuren op exosomes en reageren op hen. Een andere belangrijke vraag is wat peptiden worden gevonden gebonden aan MHC klasse I moleculen op exosomes. De exosome productie route is niet de normale route voor de MHC klasse I moleculen om naar het celoppervlak, waardoor de mogelijkheid dat verschillende peptiden worden gevonden in deze subgroep van exosomal MHC klasse I moleculen is een reële mogelijkheid. Om deze exosomes bestuderen van een verscheidenheid van immuuncellen, is het noodzakelijk om hun aanwezigheid en de grootte te detecteren in culturen. Dit is de reden voor het team de keuze van de NanoSight NTA aanpak met de LM10-systeem.

Voorafgaand aan het gebruik van NanoSight, had flow cytometrie bleek een waardevol instrument in de voorlopige karakterisering van de exosomes vrijgegeven door immuuncellen. Dr Powis zegt: "De NanoSight benadering maakt een meer nauwkeurige bepaling van de grootte en relatieve concentratie, zowel voor als na zuivering. Dit stelt ons in staat om de vrijlating van exosomes in het bereik van 30-150nm-monitor na activering met een verscheidenheid van immuun stimuli die relevant zijn voor zowel de normale en afwijkende immuunrespons op een manier die niet eerder zichtbaar met flowcytometrie. "

Last Update: 6. October 2011 05:26

Tell Us What You Think

Do you have a review, update or anything you would like to add to this news story?

Leave your feedback
Submit