Universidade do Uso Nanosight NTA de St Andrews Caracterizar Exosomes

Published on May 10, 2011 at 6:53 PM

NanoSight, fabricantes mundo-principais da tecnologia original da caracterização do nanoparticle relata que a Faculdade de Medicina na Universidade de St Andrews está usando a análise de seguimento do nanoparticle, NTA, para caracterizar o comportamento exosome.

O Dr. Simon Powis e seus colegas na Universidade de St Andrews está trabalhando para compreender como um grupo de moléculas envolvidas na defesa do sistema imunitário contra os micróbios patogénicos intracelulares funciona. Estas moléculas são-me chamadas a classe complexa do histocompatibility (MHC) principal moléculas, e são expressadas em quase cada pilha no corpo. Sua importância à medicina é sabida o mais geralmente porque são um dos grupos chaves de genes que têm que pròxima ser combinados quando uma transplantação de órgão é feita, se não a transplantação pode ser rejeitada.

Dr. Simon Powis com seu sistema de NanoSight LM10 para estudar o comportamento exosome

Sabe-se agora que seu papel preciso no sistema imunitário normal é ligar fragmentos pequenos das proteínas virais degradadas que indicam aos linfócitos de T do sistema imunitário. Isto permite a detecção específica de proteínas “estrangeiras”, isto é dos micróbios patogénicos potenciais, e permite que o sistema imunitário especificamente detecte e mate pilhas contaminadas, enquanto deixando uma pilha uninfected vizinha sozinha. Além, há uma doença auto-imune fascinante associada pròxima com um tipo particular de classe de MHC Mim molécula. Sobre 90% dos pacientes com um tipo de artrite inflamatório chamou o spondylitis ankylosing que afecta a espinha, expressa um tipo específico de classe de MHC Mim HLA-B27 chamado molécula. A relação entre estes circunstância e HLA-B27 artríticos foi sabida por quase 40 anos, mas o mecanismo da doença e como HLA-B27 é involvido deve ser compreendida ainda.

Enquanto o grupo de Powis estudava a classe de MHC Mim as moléculas expressadas em exosomes, descobriu-se que podem expressar um tipo novo de estrutura. A região da cauda da classe de MHC Eu a molécula, que se senta dentro do exosome, posso freqüentemente formar um enlace da bissulfeto-ligação a uma outra classe de MHC Mim molécula, assim trazendo duas moléculas pròxima junto em uma estrutura dimeric. Isto normalmente não acontece nas pilhas porque o citoplasma tem um ambiente de diminuição, impedindo que as ligações de bissulfeto formem. Contudo, nos exosomes a capacidade manter um ambiente de diminuição parece ter sido perdida.

O grupo está estudando agora se as pilhas do sistema imunitário consideram a classe destes MHC Mim estruturas dos dímero em exosomes e lhes respondem. Uma Outra pergunta chave é o que os peptides são encontrados encadernado à classe de MHC Mim moléculas em exosomes. O caminho exosome da produção não é a rota normal para a classe de MHC Mim as moléculas a obter à superfície da pilha, assim a possibilidade que os peptides diferentes estão encontrados neste subconjunto da classe que exosomal de MHC Mim as moléculas são uma possibilidade real. Para poder estudar estes exosomes de uma variedade de pilhas imunes, é necessário detectar seus presença e tamanho nas culturas. Esta é a razão para a equipe que escolhe a aproximação de NanoSight NTA com o sistema LM10.

Antes de usar NanoSight, o cytometry de fluxo tinha provado uma ferramenta valiosa na caracterização preliminar dos exosomes liberados por pilhas imunes. O Dr. Powis diz que “A aproximação de NanoSight permite uma determinação mais exacta do tamanho e da concentração relativa ambos antes e depois da purificação. Isto permite que nós monitorem a liberação dos exosomes na escala 30-150nm após a activação com uma variedade de estímulos imunes relevantes às respostas imunes normais e aberrantes em uma maneira não previamente visível com cytometry de fluxo.”

Last Update: 12. January 2012 17:09

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