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Posted in | Microscopy

SEEC-Mikroskopie Liefert Unerwartete Informationen Über das Verhalten von Beschrifteten Lipiden

Published on September 26, 2011 at 11:25 PM

Eine Forschungsgruppe von der Karlsruhe-Fachhochschule (SATZ) in Deutschland berichtet in Langmuir, über wie SEEC-Mikroskopie verwendet werden kann, um ein plausibles Szenario hinsichtlich des Verhaltens von beschrifteten Lipiden an einer Oberfläche zur Verfügung zu stellen.

Diese neue Technik, basiert auf dem Gebrauch von der neuen Generation von den Objektträgern - gekennzeichnet als Brandungen - führt zu die direkte Sichtbarmachung von nanometric Proben durch ein herkömmliches optisches Mikroskop. Darüber hinaus aktivieren Neuentwicklungen die komplette topographische Studie von nanometric Proben mit einem engagierten optischen Instrument.

Lipidmehrschichtiges beobachtet durch SEEC-Mikroskopie.

Federhalter Nanolithography (DPN) ist gezeigt worden, um ein leistungsfähiges Hilfsmittel für die Generation von biologisch-aktiven Oberflächenmustern zu sein. Moleküle werden von einer FLUGHANDBUCH-Spitze an eine feste Oberfläche über den haarartigen Transport entbunden und stellen DPN ein möglicherweise nützliches Hilfsmittel für die Ausarbeitung von functionalised nanoscale Einheiten her. Wegen des großen abgedeckten Bereiches, bleibt systematische Qualitätskontrolle von vorbereiteten Mustern schwierig. AtomKraft-Mikroskopie (AFM) ist nicht für Extrascreening des großen Gebiets praktisch, während Fluoreszenzmikroskopie (FM) photochemischen Abbau verursachen kann und Einführung von Leuchtstofffühlern erforderlich ist, dass Macht unerwünschte Nebenwirkungen auf die Anlage haben.

Oberfläche Erhöhte Ellipsometric Kontrast (SEEC)mikroskopie wird im Verbindung mit speziellen Objektträgern (Nanolane) Kontrast-Vergrößerungseigenschaften dieser Ausstellung durchgeführt, die es möglich, nanometric Zellen (unten zu 0.3nm) mit einem „Standard“ optischen Mikroskop sichtbar zu machen macht. Diese Technik benötigt absolut keine Vorbehandlung wie Kennzeichnung. SEEC-Mikroskopie profitiert von allen optischen Mikroskopiemerkmalen: Echtzeitdarstellung; große Auswahl von Gesichtsfeldern (von 70µm x von 50µm zu einige mm-²); die Fähigkeit, Studien in der Flüssigkeit, um zu benennen aber in einigen durchzuführen. Zusätzlich zu dem lassen etwas Neuentwicklungen jetzt die Umwandlung eines 2D SEEC-Bildes in eine Karte 3D für komplette topographische Studien zu (Profilextraktion, Schritthöhenmessungen, Rauheit…). Die Genauigkeit der Maße (0.3nm) ist garantierte dank zugelassene Kalibrierungsstandards (von PTB-Institut, Deutschland) und Prozeduren ISO 17025.

Vor Kurzem hat eine Karlsruhe-Fachhochschule die (SATZ) Forschungsgruppe (Deutschland) geführt von Dr. Hirtz ein neues strukturelles Baumuster der Lipidmembran stapelnd vorgeschlagen, indem sie Informationen von 3 mikroskopischen Techniken einschließlich SEEC-Mikroskopie kombinierte. Membranstapel vorbereitet mit 20 Mol % Beimischung von DNP-Schutzkappe PE* zum DOPC ** Transportunternehmer werden durch FLUGHANDBUCH, FM und SEEC studiert. PET Liss Rhod *** wird als fluorophore Molekül für FM-Analyse verwendet.

Während topographische Studien FLUGHANDBUCHS und SEEC anzeigen, arbeitten drei verschiedene Niveaus des Membranstapels durch DPN aus, stellen die Stärken, die durch FLUGHANDBUCH und SEEC bestimmt werden fest, dass die erste Schicht eine monomolekulare Schicht ist, während die zweiten und dritten Schichten bilayers sind. Überraschend zeigt FM nicht höher aber niedrigere Fluoreszenzintensität für das Drittniveau an. Fluoreszenzintensität fällt fast auf die Stufe ab, die für eine einzelne monomolekulare Schicht erhalten wird und ist ungefähr 3,5mal niedriger als erwartet. Gruppe Dr. Hirtzs brachte zwei Hypothesen vor, um dieses Phänomen zu erklären, das für ein hochrangiges der Beimischung von DNP-Schutzkappe PET auftritt: (1) verbrauchten eine Bereicherung von DNP CapPE und unter in der dritten Schicht mit der verringerten Leuchtstoffintensität, die passend ist, PET-Konzentration Liss Rhod oder (2) eine Zunahme der PET-Konzentration Liss Rhod und unter in der dritten Schicht, die das selbst-Löschen von fluorophore verursacht.

Szenario (1) gilt als das plausibelste. Bei Zimmertemperatur ist DNP-Schutzkappe PET in einem Gelzustand und DOPC und Liss Rhod sind über ihrer jeweiligen Übergangstemperatur, hohe Mengen Beimischung mit DNP-Schutzkappe PET sollten zu Phasentrennung von Gelzustand DNP Schutzkappe PET-Gebieten führen, während der fl Uidzustand DOPC und PET Liss Rhod von der besseren Kompatibilität bei Zimmertemperatur sein sollten.

Außerdem liefert das Vergleichen der optischen Stärke, die durch SEEC-Mikroskopie mit der körperlichen Stärke von FLUGHANDBUCH-Maßen erreicht wird, Informationen über den Brechungskoeffizienten der unterschiedlichen Membranstapelschicht. Der Brechungskoeffizient der ersten (Mono) Schicht wird bestimmt, um als die von Lipid bilayers höher zu sein (an zweiter Stelle und dritte Schichten). Der Anstieg der Schichtkompaktheit einer monomolekularen Schicht verglichen mit der eines bilayer scheint, eine mögliche Erklärung für dieses Ergebnis zu sein.

Obgleich fl uorescence Mikroskopie das Prüfverfahren nach dem lithographischen Prozessschritt beschleunigen kann, führt möglicherweise sie auch zu Fehlinterpretationen im Falle der dünnen Zellen mit der hohen Beimischung von Funktionsmitteln, wie in dieser Studie beobachtet. SEEC-Mikroskopie macht den Gebrauch der Leuchtstofffühlermoleküle sinnlos, die möglicherweise für bestimmte Anwendungen gelegen kämen. Wie FLUGHANDBUCH ist SEEC-Mikroskopie in der Lage, Stärkemaße aber ohne Beschränkung für seitliches Screening durchzuführen. Beide Techniken Zu Kombinieren ist eine elegante Methode, die optischen Indexe von unbekannten Materialien zu schätzen und Informationen über einige ihrer physikalischen Eigenschaften wie Dichte zu gewinnen.
Die spätesten Entwicklungen auf SEEC-Mikroskopie werden durch Nanolane geleitet.

Bezüge:
*DNP Schutzkappe PET: 1,2 dipalmitoyl-sn-glycero-3-phos-phoethanolamine-N- [6 [(2,4-dinitrophenyl) Amino] hexanoyl])
** DOPC: 1,2 dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine
PET *** Liss Rhod: 1,2 dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N- (lissamine Rhodamin B sulfonyl)

Last Update: 12. January 2012 13:12

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