Site Sponsors
  • Technical Sales Solutions - 5% off any SEM, TEM, FIB or Dual Beam
  • Strem Chemicals - Nanomaterials for R&D
  • Oxford Instruments Nanoanalysis - X-Max Large Area Analytical EDS SDD
  • Park Systems - Manufacturer of a complete range of AFM solutions
Posted in | Microscopy

De Microscopie SEEC Verstrekt Onverwachte Informatie Over het Gedrag van Geëtiketteerde Lipiden

Published on September 26, 2011 at 11:25 PM

Een onderzoeksteam van het Instituut van Karlsruhe van Technologie (UITRUSTING) in Duitsland meldt in Langmuir hoe de microscopie SEEC kan worden gebruikt om een aannemelijk scenario in verband met het gedrag van geëtiketteerde lipiden aan een oppervlakte te verstrekken.

Deze nieuwe techniek, die op het gebruik van de nieuwe generatie van microscoopdia's wordt gebaseerd - die als Brandingen worden bedoeld - leidt tot de directe visualisatie van nanometric steekproeven door een conventionele optische microscoop. Bovendien laten de recente ontwikkelingen de volledige topografische studie van nanometric steekproeven met een specifiek optisch instrument toe.

Multilayer Lipiden waargenomen door SEEC de microscopie.

De Pen Nanolithography is van de Onderdompeling (DPN) getoond om een krachtig hulpmiddel voor de generatie van biologisch actieve oppervlaktepatronen te zijn. De Molecules worden geleverd van een uiteinde AFM aan een stevige oppervlakte via capillair vervoer, die tot DPN maken een potentieel nuttig hulpmiddel want de uitwerking van nanoscale apparaten functionalised. wegens het grote behandelde gebied, blijft de systematische kwaliteitsbeheersing van voorbereide patronen moeilijk. De Atoom Microscopie van de Kracht (AFM) is niet praktisch voor buitengewoon breed gebiedsonderzoek terwijl de fluorescentiemicroscopie (FM) fotochemische degradatie kan veroorzaken en de toevoeging van fluorescente sondes wordt vereist die ongewenste bijwerkingen voor het systeem zouden kunnen hebben.

De Oppervlakte Verbeterde de Ellipsometrische microscopie (SEEC) van het Contrast wordt uitgevoerd in combinatie met speciale microscoopdia's (Nanolane) die contrast-verbeterende eigenschappen tentoonstellen, die het om nanometric structuren (onderaan aan 0.3nm) met een „standaard“ optische microscoop te visualiseren mogelijk maakt. Deze techniek vereist absoluut geen voorbehandeling zoals etikettering. De microscopie SEEC profiteert van alle optische de microscopieeigenschappen: weergave in real time; brede waaier van gebieden van mening (van 70µm x 50µm aan verscheidene mm ²); de capaciteit om studies in te noemen vloeistof maar enkelen uit te voeren. Naast dat, staan sommige recente ontwikkelingen nu voor de omzetting van een 2D beeld SEEC in een 3D kaart voor volledige topografische studies (profielextractie, de metingen van de staphoogte, ruwheid…) toe. De nauwkeurigheid van de metingen (0.3nm) is dankzij gewaarborgd verklaarde kaliberbepalingsnormen (van PTB Instituut, Duitsland) en de procedures van ISO 17025.

Onlangs, heeft een Instituut van Karlsruhe het onderzoeksteam van van de Technologie (UITRUSTING) (Duitsland) dat door Dr. Hirtz wordt geleid een nieuw structureel model van lipidemembraan stapelend door informatie van 3 microscopische technieken met inbegrip van de microscopie te combineren SEEC voorgesteld. De stapels van het Membraan die met 20 mol % het vermengen zich van DNP GLB PE* aan de carrier DOPC worden voorbereid worden ** bestudeerd door AFM, FM en SEEC. PE *** wordt van Rhod van Liss gebruikt als fluorophore molecule voor de analyse van FM.

Terwijl de topografische studies AFM en SEEC op drie verschillende niveaus van de membraanstapel wijzen die door DPN wordt uitgewerkt, besluiten de dikten die door AFM en SEEC worden bepaald dat de eerste laag monolayer is terwijl de tweede en derde lagen bilayers zijn. Verrassend, toont FM geen hogere maar lagere fluorescentieintensiteit voor het derde niveau. De de intensiteitsdalingen van de Fluorescentie bijna op het niveau verkregen voor één enkele monolayer en is ongeveer 3.5 keer lager dan verwacht. De groep van Dr. Hirtz's bracht twee hypothesen naar voren om dit fenomeen te verklaren dat voor een hoog niveau van zich het vermengen van PE van DNP GLB voorkomt: (1) een verrijking van DNP CapPE in en onder de derde laag met verminderde fluorescente intensiteit toe te schrijven aan uitgeputte PE van Liss Rhod concentratie of (2) een verhoging van PE van Liss Rhod concentratie van en onder het derde laag veroorzaken self-quenching van fluorophore.

Scenario (1) wordt beschouwd als het aannemelijkst. Bij kamertemperatuur, is PE van DNP GLB in een gelstaat en DOPC en Liss Rhod zijn boven hun respectieve overgangstemperatuur, zouden de hoge hoeveelheden zich het vermengen met PE van DNP GLB tot fasescheiding van gel-staat DNP GLB PE domeinen moeten leiden, terwijl de fl uid-staat PE van DOPC en van Liss Rhod van betere verenigbaarheid bij kamertemperatuur zou moeten zijn.

Bovendien, het vergelijken van de optische dikte die door SEEC de microscopie met de fysieke dikte uit metingen AFM wordt verkregen verstrekt informatie over r.i van de verschillende laag van de membraanstapel. R.i van de eerste (mono) wordt laag bepaald om hoger te zijn dan die van lipidebilayers (tweede en derde lagen). De stijging van de laagcompactheid van monolayer in vergelijking tot dat van een bilayer schijnt een mogelijke verklaring voor dit resultaat te zijn.

Hoewel fl de uorescencemicroscopie het onderzoeksproces na de lithografische processtap kan versnellen, kan het ook tot verkeerde interpretaties in het geval van dunne structuren leiden met zich het hoge vermengen van functionele samenstellingen zoals waargenomen in deze studie. De microscopie SEEC maakt het gebruik van fluorescente sondemolecules stomp, die in handig voor bepaalde toepassingen zouden kunnen komen. Als AFM, kan de microscopie SEEC diktemetingen maar zonder beperking voor zijonderzoek uitvoeren. Het Combineren van beide technieken is een elegante manier om de optische indexen van onbekende materialen te schatten en informatie over sommige van hun fysische eigenschappen zoals dichtheid te bereiken.
De recentste ontwikkelingen in de microscopie SEEC worden geleid door Nanolane.

Verwijzingen:
*DNP PE van GLB: [6 [(2,4-dinitrophenyl) amino] hexanoyl 1.2 dipalmitoyl-Sn-glycero-3-phos-phoethanolamine-n])
** DOPC: dioleoyl-Sn-glycero-3-phosphocholine 1.2
PE van *** Liss Rhod: 1.2 dioleoyl-Sn-glycero-3-phosphoethanolamine-n (sulfonyl lissaminerodamine B)

Last Update: 12. January 2012 13:08

Tell Us What You Think

Do you have a review, update or anything you would like to add to this news story?

Leave your feedback
Submit