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Rapporto degli Strumenti di JPK su Ricerca di Nanostructures all'Istituto di Tecnologia di Karlsruhe

Published on January 31, 2012 at 7:29 PM

Strumenti di JPK, un produttore di livello mondiale di strumentazione nanoanalytic per ricerca nelle scienze biologiche e materia molle, rapporti sulla ricerca di Dott. Clemens Franz al DFG-Centro per Nanostructures Funzionale a Karlsruhe.

Il Dott. Clemens Franz piombo un gruppo di ricercatori al DFG-Centro per Nanostructures Funzionale all'Istituto di Tecnologia di Karlsruhe in cui lavora a ampliare l'impiego del AFM per le applicazioni biologiche delle cellule. Il AFM presenta un forte vantaggio sopra altre tecniche di microscopia. I Campioni possono essere imaged direttamente senza preparato priore, quali la macchiatura o la fissazione. Ciò rende la tecnica estremamente adatta per i campioni biologici della rappresentazione mentre le molecole biologiche o persino le celle viventi possono essere mantenute nelle circostanze fisiologiche. Il gruppo egualmente usa ordinariamente il AFM per caratterizzare i substrati di aderenza delle cellule.

Anello di Ramona & LU Dao del Gruppo di Franz a Karlsruhe facendo uso dei sistemi di JPK NanoWizard.

Poichè le travi a mensola del AFM sono sorgenti ultrasoft, possono essere usate per misurare inter e perfino le obbligazioni intramolecolari. Per studiare l'aderenza delle cellule, il Dott. Franz ed il suo gruppo impiegano spesso la spettroscopia unicellulare AFM basata della forza (SCFS). Qui, una cella vivente è fissata al AFM a mensola ed è messa in contatto con un substrato negli stati definiti del contatto (forza e tempo del contatto). Con una sensibilità della forza che misura oltre quattro ordini di grandezza, SCFS fornisce un'opportunità unica di misurare le forze cellulari di aderenza dal livello della unico molecola ad aderenza globale nella stessa impostazione sperimentale. SCFS AFM basato ha fornito la comprensione importante nei meccanismi molecolari in questione nella generazione della forza di aderenza, quale la transizione dal unico ricevitore mediato all'associazione cooperativa del ricevitore durante la fase iniziale di contatto cellulare con un substrato extracellulare. Ancora, i beni adesivi delle superfici differenti possono essere caratterizzati esattamente.

La Loro ultima sfida è di combinare il AFM con le tecniche avanzate di microscopia leggera, quale il laser che scandisce la microscopia confocale o totale del riflesso (TIRF) interno. In questo modo, il raggruppamento dei ricevitori può essere seguito in celle viventi da del tempo intervallo microscopia ottica e direttamente essere correlato alle informazioni della forza di aderenza. Il gruppo ora ha sviluppato un'impostazione funzionale di TIRF/AFM.

La motivazione per questo lavoro è di capire meglio i meccanismi fondamentali di aderenza delle cellule, specialmente eventi di aderenza iniziale quando le celle in primo luogo incontrano le componenti della matrice extracellulare (ECM). Con l'uso dei substrati artificiali micro- o nano-modellati di aderenza delle cellule, lo scopo è di emulare l'ambiente naturale delle cellule e di manipolare l'aderenza delle cellule.

Il Dott. Franz descrive perché gradisce usare i sistemi di JPK AFM: “I prodotti di JPK sono particolarmente adatti a ricerca biologica a causa della loro facilità d'uso relativa; la loro buona integrazione software/del hardware; la disponibilità delle camere heated del campione e la possibilità all'immagine in liquido per tenere campione biologico funzionale. Ancora, l'integrazione eccellente di offerte di JPK del AFM e delle tecniche ottiche di microscopia (quale microscopia confocale o di TIRF di contrasto, di fase) mentre l'intervallo di trazione z-piezo-elettrico unico di 100 µm (moduli di CellHesion) è essenziale per la separazione completa del cella-substrato in spettroscopia unicellulare della forza.„

Last Update: 31. January 2012 23:41

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