Posted in | Lab on a Chip | Nanofluidics

De Nieuwe Spaander Microfluidic Laat Snelle Analyse van ultra-Kleine Steekproef voor de Opsporing van RNA toe

Published on November 8, 2012 at 3:25 AM

Een nieuwe macht-vrije microfluidic spaander die door onderzoekers bij het RIKEN Gevorderde Instituut van de Wetenschap wordt ontwikkeld (ASI) laat opsporing van microRNA van uiterst klein steekproefvolume in toe slechts 20 minuten. Door de tijd en hoeveelheid van steekproef drastisch te verminderen die voor opsporing wordt de vereist, legt de spaander de grondslag voor vroeg-stadium punt-van-zorg diagnose van ziekten zoals kanker en Alzheimer.

Nieuwe macht-vrije de opsporingsmicrochip van RNA. Linkerzijde: Vervaardigde microchip. Recht: Microchannel ontwerp.

MicroRNAs (miRNAs) is de molecules van klein, niet-codeert RNA die genuitdrukking in een brede waaier van biologische processen met inbegrip van ontwikkeling, celproliferatie, differentiatie en celdood (apoptosis) regelen. De Concentratie van bepaalde miRNA in lichaamsvloeistoffen stijgt met de vooruitgang van ziekten zoals kanker en Alzheimer, dat hoop produceert dat deze kort RNA de sleutel kunnen houden sneller, nauwkeurigere diagnose. De Nu verkrijgbare technieken voor gevoelige miRNAopsporing, echter, vereisen dagen om een diagnose te bereiken en apparatuur te impliceren die slechts door opgeleid personeel in werking wordt gesteld, dat hen maakt voor gebruik in vele situaties onpraktisch.

Het onderzoeksteam trachtte deze hindernissen te overwinnen door een apparaat te ontwikkelen dat, makkelijk te gebruiken punt-van-zorg diagnose van (POC) slechts een zeer kleine steekproef snel toelaat. In vroeger onderzoek, ontwikkelde het team een apparaat in de vorm van een microchip die het gebruik polydimethylsiloxane (PDMS), een siliconesamenstelling die voor zijn eigenschappen van de luchtabsorptie wordt gekend, reagentia in een vangst te trekken voor analyse sondeert. Deze het pompen techniek vereenvoudigde ontwerp door de behoefte aan externe krachtbronnen te elimineren, maar het apparaat vereiste een hoeveelheid van steekproef te groot voor praktische toepassingen.

Het nieuwe apparaat gebruikt drastisch ook PDMS als luchtpomp, maar verbetert de gevoeligheid van de methode door een geroepen laminaire stroom-bijgewoonde vertakte versterking van de signaalversterking methode (LFDA). Eerst, worden de fragmenten van DNA die op specifieke miRNAopeenvolgingen plakken aan een glasoppervlakte samen met de miRNAsteekproef bevestigd te analyseren en, dan onder een laag van PDMS met kanalen daarin (Figuur 1) moet worden geklemd. Leeggemaakt van lucht in een vacuüm, veroorzaakt de laag PDMS een pompeffect dat versterkingsreagentia trekt, die bij de kanaalinhammen, in de kanalen en in contact met miRNA worden opgenomen, die tot fluorescentie-geëtiketteerde vertakte structuren leidt die in tijd groeien en snel kunnen worden ontdekt.

De gevoeligheid van deze techniek vermindert drastisch de steekproefhoeveelheid die voor diagnose aan slechts 0.25 attomoles (mol 10-18) wordt vereist, een thousand-fold verbetering over het vroegere model van het team. Samen met zijn opsporingstijd van slechts 20 minuten, maken deze eigenschappen self-powered apparatenideal voor gebruik in middel-slechte milieu's, die draagbare punt-van-zorg diagnose voor miljoenen in ontwikkelingslanden en rond de wereld beloven.

Bron: http://www.riken.jp

Last Update: 8. November 2012 04:43

Tell Us What You Think

Do you have a review, update or anything you would like to add to this news story?

Leave your feedback
Submit