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Tubos de ensaio Nanodrop permitirá aos investigadores estudar proteínas individuais

Published on April 16, 2008 at 11:01 AM

Pesquisadores do Instituto Nacional de Padrões e Tecnologia ( NIST ) demonstraram um novo dispositivo que cria "tubos de ensaio" nanodroplet para estudar proteínas individuais sob condições que imitam os limites lotado de uma célula viva. "Ao limitar proteínas individuais em nanogotas de água, os pesquisadores podem observar diretamente a dinâmica e as mudanças estruturais dessas biomoléculas", diz o físico Lori Goldner, um co-autor do artigo publicado na Langmuir.

Pesquisadores demonstraram um novo dispositivo que cria tubos de ensaio nanodroplet para estudar proteínas individuais sob condições que imitam os limites lotado de uma célula viva.

Pesquisadores recentemente voltaram sua atenção para o papel que desempenha na crowding o comportamento de proteínas e outras biomoléculas, não há muito espaço extra em uma célula. Nanogotas NIST pode imitar o ambiente lotado nas células onde as proteínas ao vivo, proporcionando vantagens sobre outras técnicas para limitar ou imobilizar proteínas para o estudo que podem interferir ou danificar a proteína. Esta configuração mais realista pode ajudar os pesquisadores a estudar as bases moleculares da doença e fornecer informações para o desenvolvimento de novos produtos farmacêuticos. Por exemplo, misfolded proteínas desempenham um papel em muitas doenças, incluindo diabetes tipo 2, doenças de Alzheimer e de Parkinson. Vendo como as proteínas se dobram nestes nanogotas, os pesquisadores podem ganhar uma nova visão sobre estas doenças e pode encontrar novas terapias.

O NIST sistema de entrega nanodroplet usa micropipetas de vidro pequeno para criar minúsculas gotículas de água suspensas em um líquido oleoso para o estudo sob um microscópio. Uma pressão aplicada força a solução de água contendo assuntos de teste de proteína para a ponta da micropipeta como ele fica imerso em uma pequena gota de óleo no palco microscópio. Então, como um mágico chicoteando uma toalha de mesa de uma mesa, deixando a louça para trás, um interruptor eletrônico faz com que a pipeta para empurrão para trás, deixando para trás uma pequena gota tipicamente menos de um micrômetro de diâmetro.

A gota é mantida no lugar com um laser "pinça óptica", e outro laser é utilizado para excitar a fluorescência da molécula ou moléculas na gota. Em um conjunto de experimentos de fluorescência, explica Goldner, "As moléculas parecem imperturbáveis ​​por sua prisão - eles não aderem às paredes ou deixar o container -. Factos importantes a saber para fazer nanoquímica ou biofísica de moléculas individuais" Similar a um trabalho anterior (veja "'Micro-boxes" de água utilizada para estudar moléculas individuais ", Beat Tech 20 de julho de 2006), os pesquisadores também demonstrou que a única moléculas de proteínas fluorescentes pode ser detectada no interior das gotas.

Fluorescência pode revelar o número de moléculas dentro do nanodroplet e pode mostrar o movimento ou as mudanças estruturais da molécula ou moléculas confinados, permitindo aos pesquisadores estudar como duas ou mais proteínas interagem. Usando apenas algumas moléculas e pequenas quantidades de reagentes, a técnica também minimiza a necessidade de produtos químicos caros ou tóxicos.

Last Update: 9. October 2011 17:19

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