NanoSight에서 Nanoparticle 추적 분석을 사용하는 Exosomes의 직접 구상, 정립 (NTA) 및 세기

AZoNano의

커버되는 토픽

소개
Exosomes를 검출하고 세기
양자택일 기술
측정의 선택성
개요

소개

Microvesicles (전형적으로 1um 범위에 100nm에서)와 또한 exosomes (30-100nm)에게 불린 nanovesicles는, 셀 방식 파편이기 위하여, 처음에 믿어졌습니다. 그러나 이 세포 파생한 입자가 중요한 중요성 이고 세포 커뮤니케이션과 세포 신호에 세포에서 둘 다 중요한 역할을 한다는 것을 지금 감사됩니다.

그들의 중요성은 최근에 그(것)들은 관상 동맥 질환, 선동 질병, 자간전증, 당뇨병 및 암을 포함하여 다수 질병 조건에 있는 현저하게 높다는 것은 수준에 나타난다는 것은 발견될 후 부터 인식해 되었습니다. 이것은 biomarkers로 병인에 있는 그들의 직접 역할 뿐 아니라 그들의 가능한 사용의 문제를 일으킵니다.

그 같은 상황에서는, exosomes는 그들의 높은 농도가 초기와 더 과민한 탐지 식으로 잠재적인 중요성의 이 소립자의 특성을 만드는 microvesicles가와 하는 동안 이 입자의 대형의 프로세스 지금도 토론의 토픽인 보다는 현저하게 최상에서 전형적으로 나타나.

NanoSight는 어느가 고해상도 입자 크기 배급 단면도가에서 (NTA) 장악될 수 있는지 특정 미소체와 exosome 입자를 즉시에 있는 액체에서 직접 그리고 개별적으로 구상하고기 위하여와 세어 허용하고 분석 체계를 추적하는 새로운 레이저 기지를 둔 Nanoparticle를 제안합니다.

기술은 사용하기 편하고, 단단, 강력하고, 정확하 비용 효과적이어, 매력있는 대안 또는 보충 전자 현미경 검사법 또는 동적인 가벼운 뿌리는, DLS (일컬어 광양자 상호 관계 분광학, PCS) 교류 Cytometry와 같은 nanoparticle 분석의 기존 방법에 나타내.

Exosomes 검출 세기

NanoSight 계기는 50nm - 1000nm의 범위 안에 exosomes로 유일한 통찰력을 제안합니다.

기술은 다재다능하 일반적으로 간단한 희석은 견본에서 존재하는 입자의 사격량을 측정하게 충분합니다. 초기에 견본은 사용자가 급속하게 보인 소포의 고해상 입자 크기 배급 단면도 그리고 조사를 (절대적인 수 사격량 식으로) 생성할 수 있는 모인 물자에게 (숫자 1a) 따르기 또는 더 큰 입자의 존재를 위해 눈으로 확인될 수 있습니다 (숫자 1b).

묽게 된 혈소판 자유로운 플라스마의 숫자 1. 견본. 아) NanoSight 기술에 의해 일어나는 전형적인 심상. 심상은 사용자가 즉시 polydispersity의 사격량 그리고 수준을 포함하여 그들의 견본에 관하여 특정 특징을 인식하는 것을 허용합니다. B) 견본에서 입자 크기 배급 그리고 산출된 본래 사격량.

양자택일 기술

역사적으로, 다수 기술은 마이크로 컴퓨터에 의하여 치수가 재진 입자에 유효한 추가 기술을 가진 microvesicles 그리고 nanovesicles를 성격을 나타내기 위하여 이용되었습니다.

분석 기술:

아마 이들의 일반은 교류 cytometry입니다. 전형 상업적인 교류 cytometry에는 300nm의 주위에의 더 낮은 규모 한계가 있습니다 어떤 순간에 신호는 기준선 잡음 레벨에서 구별할 수 없습니다. 이 탐지 한계가 형광성 레이블의 사용으로 확장되는 수 있는 동안, 더 낮은 규모에 정확하게 그 같은 입자를 치수를 재는 기능은 가혹하게 한정됩니다.

동적인 가벼운 뿌리는 것은 (DLS) 또한 이 응용에서 사용되었습니다 그러나 종합적 효과 측정이어서, 결과는 간단한 z 평균 (무겁게 하는 강렬) 입자 크기 및 polydispersity 또는 한정되 해결책 입자 크기 배급 단면도 아주 구성하고 있습니다. 결정적으로, 입자 사격량 정보는 유효하지 않고 DLS는 형광성 레테르를 붙인 입자를 측정할 수 없습니다.

전자 현미경 검사법은 마이크로 공부를 위한 및 nanovesicles 그러나 견본 준비 다음 주요한 운영 비용, 견본 준비와 처리량 시간 및 견본 보전성을 희생해서 유용한 연구 공구입니다.

측정의 선택성

어느 정도 규모 규모 범위의 입자는 견본에서 나타나 단지 결정하는 위하여 자주 적당한 하는 동안, 수시로 견본 내의 입자의 특정 부분 모집단을 확인하고 감별하는 것이 매우 중요합니다. NanoSight 기술은 선택적으로 처음부터 끝까지, 항체 중재한 형광성에게 레테르를 붙이기의 예를 들면 그 같은 인구를, 사용 분석 가능합니다. 이 접근은 사용자가 형광성 레테르를 붙인 항체가 묶는 단지 특정 nanoparticles, 적합한 광 필터의 사용을 통해 제외되는 배경 일반적인 미립자를 검출하고, 분석하고 세는 것을 허용합니다. fluorophores의 범위는 이용되는 수 있는 동안, 높 효율성, 최고 결과를 위한 높은 안정성 양 점 (QDot®) 레이블을 채택하는 것이 유리합니다.

이것은 파란 레이저 다이오드와 맞은 NanoSight 계기로 흥분한 양 점에서 방출된 형광 빛의 단 하나 영상 프레임을 보여주는 숫자 2A에서 설명됩니다. 이 양 점은 항체 (syncytiotrophoblast microvesicle (STBM 존재하는)에 표적 biomarker에 NDOG II) 특성을 레테르를 붙이기 위하여 이용되었습니다.

STBM 입자에 항체를 통해 붙어 있는 양 점에서 숫자 2. 아) 형광 심상. B) (파란) 뿌려진 빛, (빨간) 정확한 항체 및 잘못된 (통제) 항체 (녹색)에서 입자 크기 배급. 수 사격량 수직 축선을 주의하십시오.

2B 쇼 3 크기 분포 보여주를 계산하십시오: i) II) 입자 형광성 QDot 레테르를 붙인 NDOG II 항체 특히 바운스되었었던 형광 최빈값 (운용 한계)의 밑에 측정으로 (비 형광성) 빛 살포에 의해 검출되는 STBM 견본 (블루 라인)에서 존재하는 모든 입자, 및 iii) 친화력 없이 (또한 형광 최빈값에서 측정되는) STBM에 표적 biomarker와 유사하게 레테르를 붙인 QDot 레테르를 붙인 항체를 함유하는 통제 (녹색 선). 이것은 견본에서 STBM 특정 Q 점 NDOG II 항체에 의해 존재하는 입자의 대다수가 성공적으로 그리고 특히 레테르를 붙였다는 것을, 그리고 통제가 성공적으로 아주 낮은 신호를 보여주었다는 것을 보여줍니다.

개요

NanoSight 기술은 성공적으로 치수를 재골 낮은 사격량에 microvesicles와 exosomes를 둘 다 및 세는 것은, 형광성 레이블 함께 사용될 때, 선택적으로 복잡한 견본 내의 입자의 특정 모형을 결정하고 분석할 수 있습니다.

이 정보는 계속 NanoSight에 의해 제공된 물자에서 sourced, 검토해서 그리고 적응시켜 입니다.

추가 정보를 위해 NanoSight를 방문하십시오.

Date Added: Oct 17, 2010 | Updated: Mar 7, 2013

Last Update: 7. March 2013 11:33

Ask A Question

Do you have a question you'd like to ask regarding this article?

Leave your feedback
Submit