Integrazione Senza Cuciture di Microscopia Leggera e delle Immagini del AFM

Gli Strumenti di JPK, un produttore di livello mondiale di strumentazione nanoanalytic per la ricerca nelle scienze biologiche e materia molle, fornisce un pacchetto di programmi unico per rendere alla visualizzazione delle immagini di microscopia leggera insieme alle immagini atomiche di microscopia della forza un esercizio senza cuciture. Questo pacchetto è chiamato DirectOverlay.

La microscopia Atomica della forza (AFM) è uno strumento potente per studiare una varietà enorme di campioni differenti con risoluzione del disgaggio di nanometro nelle circostanze fisiologiche. Così come la fornitura delle misure topografiche, le informazioni sulle forze di interazione ed i beni meccanici come aderenza ed elasticità possono anche essere ottenuti. L'integrazione Perfetta del AFM con un'impostazione ottica può aumentare l'intervallo delle applicazioni ed aprire molte possibilità per la correlazione delle informazioni strutturali con le informazioni ottiche come contrassegno functionalized di componenti determinate.

Un esempio della potenza di DirectOverlay da JPK: Un'immagine della fluorescenza evidenzia tre molecole del DNA contrassegnate persona mentre l'immagine 3D zumma ad un'immagine di alta risoluzione di 700nm AFM. (Cortesia del Campione di Dott. M. Modesti, il CNRS Marsiglia)

Per raggiungere la combinazione perfetta di ottica e di AFM al disgaggio molecolare, le deformazioni devono essere impedite. Ciò provocherà due immagini, quali le immagini del AFM ed ottiche, che non ricoprono perfettamente. Le Ragioni per le deformazioni comprendono le aberrazioni in seguito alle lenti ed agli specchi del sistema dell'ottica. Questo allungamento non lineare, girare e stampare in offset delle immagini ottiche sono presenti in quasi tutti i tipi di impostazioni ottiche.

Per generare un foglio di prova senza cuciture di entrambe le tecniche, JPK ha messo a punto un metodo di avanguardia di calibratura, chiamato DirectOverlay, che usa l'accuratezza del sistema a circuito chiuso di scansione del AFM per permettere ad una visualizzazione vera degli angoli e delle coordinate assoluti di lunghezza. La procedura di calibratura è fatta automaticamente ed usa le posizioni conosciute e le stampe offset della trave a mensola per calibrare l'immagine ottica nel AFM coordina. per generare una corrispondenza perfetta dell'ottico ed immagine del AFM, 25 o più punti sono utilizzati nell'algoritmo di calibratura. Ad ogni punto, un'immagine ottica si acquista e la posizione del suggerimento a mensola è individuata automaticamente in ogni immagine ottica senza avere bisogno dell'input sull'angolo, sulla forma o sull'ingrandimento a mensola. L'algoritmo poi esegue una conversione non lineare e, di conseguenza, l'immagine ottica è corregta tutte le imperfezioni della lente e convertito in lunghezza linearizzata del AFM coordina. Ciò fornisce un'integrazione perfetta di ottico ed i dati del AFM con la sotto-diffrazione limitano la precisione.

Per Concludere, l'immagine ottica calibrata è trasferita nel software di JPK SPM, di modo che le regioni di scansione del AFM possono essere selezionate all'interno dell'immagine ottica. Diriga “la selezione in immagine ottica„ delle misure del AFM (rappresentazione, mappare e spettroscopia della forza) piombo agli esperimenti più efficienti e diminuito drammaticamente lo scansione di immagine di generalità nel AFM.

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