Thèmes abordés
Contexte
Antigènes et les anticorps
Dynamique Light Scattering pour la taille des particules de mesure
Traiter avec de petites particules et les concentrations diluées
Étude de cas - Les interactions entre les anticorps et un virus
Procédure expérimentale
Résultats
Conclusions
Contexte
Antigènes et les anticorps
Anticorps (Ac) sont des protéines produites par le corps en réponse à la présence d'un corps étranger. Antigènes (Ag) sont des composés étrangers qui fomentent la production d'anticorps. Ils peuvent se produire gratuitement dans la solution ou ils peuvent être liés à la surface des cellules ou des particules telles que des virus ou des bactéries. Un anticorps produits en réponse à un corps étranger réagit avec l'antigène pour former un complexe immun (Ab-Ag) et est donc inactivée.
Dynamique Light Scattering pour la taille des particules de mesure
Diffusion de lumière dynamique (spectroscopie de corrélation de photons) est une technique qui permet de mesurer la taille des particules jusqu'à 1 nm de diamètre. Particules en suspension subissent aléatoire du mouvement brownien. Si ces particules sont éclairées par un faisceau laser, l'intensité de la lumière diffusée fluctue à un taux qui dépend de la taille des particules. L'analyse de ces fluctuations d'intensité donne la vitesse du mouvement brownien et donc la taille des particules.
Traiter avec de petites particules et les concentrations diluées
L'intensité de la lumière diffusée obtenus à partir de petites particules ou à partir d'échantillons qui sont très diluées seront insuffisantes pour PCS reproductibles dimensionnement des mesures en utilisant une norme 10mW laser He-Ne.
Une méthode de surmonter ces problèmes est d'utiliser un détecteur de rendement plus élevé. Le Malvern Zetasizer HS instrument contient une photodiode à avalanche (APD).
Ce détecteur permet la mesure de petites particules et des échantillons de faible concentration, sans la nécessité d'un laser plus puissant.
Étude de cas - Les interactions entre les anticorps et un virus
Cette note d'application décrit dynamiques mesures de diffusion lumineuse dans laquelle l'affinité de deux anticorps différents pour un échantillon de virus peuvent être étudiés.
Procédure expérimentale
Les mesures ont été effectuées sur un Malvern Zetasizer 3000HS à une température de 25 ° C. La lumière diffusée est détectée à un angle de 90 °.
Résultats
La figure 1 montre les distributions de taille intensité obtenue à partir de 3 mesures répétées d'un échantillon de sérum contenant des anticorps. Les distributions ont été obtenus à partir de l'analyse des données avec l'algorithme CONTIN. Les distributions sont monomodale avec les modes pic à 32 nm, respectivement. L'affinité de deux anticorps différents pour un virus a été déterminé par un mélange de chacun des échantillons d'anticorps avec un échantillon du virus et de décisions rapides mesures de dimensionnement (toutes les 30 secondes). La figure 2 montre les diamètres moyen z (le diamètre moyen fondé sur l'intensité de la lumière diffusée) obtenus pour les mélanges de deux anticorps avec des particules de virus en fonction du temps écoulé après le mélange. L'augmentation dans les résultats de diamètre moyen z de la formation du complexe anticorps-virus. Anticorps 1 montre une plus grande affinité pour le virus indiqué par la pente plus raide de la courbe.
Figure 1. Distributions de taille de l'intensité obtenue à partir de 3 mesures répétées d'un échantillon de sérum contenant des anticorps.
Figure 2. Une parcelle de diamètres moyen z à partir de mélanges de 2 anticorps différents avec un virus en fonction du temps écoulé après le mélange.
Conclusions
La spectroscopie par corrélation de photons peut être utilisée pour mesurer la taille des particules de petite taille. Il s'agit d'une technique non invasive qui peut être utilisé pour évaluer l'affinité des anticorps différents pour un virus particulier.
Source: l'étude des anticorps: Interactions Antigène En utilisant des techniques de diffusion de lumière », Note d'application par Malvern Instruments.
Pour plus d'informations sur cette source s'il vous plaît visitez Malvern Instruments Ltd (Royaume-Uni) ou de Malvern Instruments (Etats-Unis) .