Anticorps et Étude des Interactions d'Antigène/Virus Utilisant des Techniques Dynamiques de Dispersion de la Lumière Des Instruments de Malvern

Sujets Couverts

Mouvement Propre
     Antigènes et Anticorps
     Dispersion de la Lumière Dynamique pour la Dimension Particulaire De Mesure
     Traiter de Petites Particules et Concentrations Diluées
Étude de Cas - Interactions Entre les Anticorps et un Virus
     Méthode Expérimentale
     Résultats
Conclusions

Mouvement Propre

Antigènes et Anticorps

Les Anticorps (Ab) sont des protéines produites par le fuselage en réponse à la présence d'un corps étranger. Les Antigènes (Ag) sont des composés étrangers qui incitent la production des anticorps. Ils peuvent se produire librement en solution ou ils peuvent être liés sur la surface des cellules ou des particules telles que des virus ou des bactéries. Un anticorps produit en réponse à un corps étranger réagit avec de l'antigène pour former un complexe immun (Ab-AG) et est pour cette raison inactivé.

Dispersion de la Lumière Dynamique pour la Dimension Particulaire De Mesure

La dispersion de la lumière Dynamique (spectroscopie de corrélation de photon) est une technique qui peut mesurer la taille des particules vers le bas à 1nm de diamètre. Les Particules subissent en suspension le mouvement Brownien irrégulier. Si ces particules sont illuminées avec un faisceau laser, l'intensité de la lumière dispersée flotte à des tarifs qui dépendent de la taille des particules. L'Analyse de ces variations d'intensité fournit la vitesse du mouvement Brownien et par conséquent de la dimension particulaire.

Traiter de Petites Particules et Concentrations Diluées

L'intensité de la lumière dispersée obtenue à partir de petites particules ou à partir des échantillons qui sont très dilués sera insuffisante pour des mesures reproductibles de calibrage de PCS utilisant un laser normal de -Ne 10mW.

Une méthode de surmonter de tels problèmes est d'utiliser un détecteur de rendement plus élevé. L'instrument de HS de Malvern Zetasizer contient une photodiode d'avalanche (APD).

Ce détecteur permet la mesure de petites particules et d'échantillons de concentration faible sans besoin de laser plus puissant.

Étude de Cas - Interactions Entre les Anticorps et un Virus

Cette note d'application décrit les mesures dynamiques de dispersion de la lumière dans lesquelles l'affinité de deux anticorps différents pour un échantillon de virus peut être étudiée.

Méthode Expérimentale

Les mesures ont été effectuées sur un Malvern Zetasizer 3000HS à une température de 25°C. La lumière dispersée a été trouvée sous un angle de 90°.

Résultats

Le Schéma 1 expositions les distributions de grandeurs d'intensité obtenues à partir de 3 mesures de répétition d'un échantillon de sérum contenant des anticorps. Les distributions ont été obtenues à partir de l'analyse des données avec l'algorithme de CONTIN. Les distributions sont monomodal avec des modes maximaux à 32nm respectivement. L'affinité de deux anticorps différents pour un virus a été déterminée en mélangeant chacun des échantillons d'anticorps à un échantillon du virus et en effectuant des mesures rapides de calibrage (toutes les 30 secondes). Le Schéma 2 affiche les diamètres z-moyens (le moyen diamètre basé sur l'intensité de la lumière dispersée) obtenus pour les mélanges de 2 anticorps avec des particules de virus en fonction du temps écoulé après mélange. L'augmentation en diamètre z-moyen résulte de la formation du composé d'anticorps-virus. L'Anticorps 1 affiche une affinité plus élevée pour le virus indiqué par la pente plus escarpée de la courbure.

Le Schéma 1. distributions de grandeurs d'Intensité obtenues à partir de 3 mesures de répétition d'un échantillon de sérum contenant des anticorps.

Figure traçage de 2.A des diamètres z-moyens des mélanges de 2 anticorps différents avec un virus en fonction du temps écoulé après mélange.

Conclusions

La spectroscopie de corrélation de Photon peut être employée pour mesurer la taille de petites particules. C'est une technique non envahissante qui peut être employée pour évaluer l'affinité des anticorps variés pour un virus particulier.

Source : L'Étude de l'Anticorps : Interactions d'Antigène Utilisant des Techniques de Dispersion de la Lumière », Note d'Application par des Instruments de Malvern.

Pour plus d'informations sur cette source visitez s'il vous plaît Malvern Instruments Ltd (R-U) ou les Instruments de Malvern (ETATS-UNIS).

Date Added: May 3, 2005 | Updated: Jun 11, 2013

Last Update: 13. June 2013 01:22

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