脂質體的表徵,包括大小和陰離子和貓 Zeta電位表徵

討論主題

背景
性質,影響靜脈注射脂質體的命運
脂質體的測量Zeta電位
實驗
脂質體的製備
脂質體的表徵
結果
陰離子脂質體
陽離子脂質體
結論

背景

脂質體是一個封閉的水體積​​的脂質分子雙層組成的囊泡。他們最初是用來作為模型系統,研究如滲透膜性能。最近的應用程序都集中在其納入水溶性材料中的水的體積或油溶性材料,在脂質雙層的能力由於使用藥物運載工具。通過控制脂質成分或修改表面抗體或肽共軛的脂質體可以針對特定應用而設計。例如,使用陽離子脂質體在基因治療中的應用,由於其複雜的DNA的能力。

性質,影響靜脈注射脂質體的命運

靜脈注射脂質體的命運是由一些屬性。其中兩個最重要的是粒徑和Zeta電位。這些參數都可以測量納米激光粒度儀的工具的範圍。使用動態光散射DLS )測量粒度。這項技術措施,在散射光的強度隨時間變化的波動而發生的,因為粒子進行布朗運動。這些強度波動的分析,可以轉換成粒度分佈,粒子的擴散係數的測定。

脂質體的測量 Zeta電位

一個粒子的zeta電位的整體電荷的粒子在特定介質中獲得。一個脂質體的製備 zeta電位的知識可以幫助預測在體內的脂質體的命運。 納米激光粒度儀測量樣品的Zeta的潛力是使用激光多普勒測速儀技術。在這種技術中,一對電極施加電壓跨,在含有顆粒分散的單元格的任一端。帶電粒子被吸引帶相反電荷的電極,和他們的速度是衡量其電泳遷移率在單位電場強度表示。這些技術的詳細資料,可發現在其他應用程序和技術說明,在馬爾文儀器網站。

本應用筆記總結的大小和zeta電位測量陰離子和陽離子脂質體。

實驗

脂質體的製備

超聲方法製備脂質體。二棕櫚酰磷脂酰膽鹼(DPPC)和磷酸鹽 dipalmitoylphosphatidylglycerol的各種混合物準備一系列的陰離子脂質體如表1詳細緩衝液(PBS)。陽離子脂質體的製備 DPPC,膽固醇和陽離子表面活性劑的二甲基dioctadecylammonium溴化物(DDAB)總結如表2。在所有情況下,脂質體終濃度分別為 4毫克脂質 / ml的PBS。

DPPC和DPPG 見表1。重量在一系列磷酸鹽陰離子脂質體的製備緩衝液(PBS )

DPPC(毫克)

DPPG(毫克)

DPPG(摩爾%)

PBS(ML)

19

1

5.2

5

18

2

10.9

5

17

3

17.4

5

16

4

24.6

5

15

5

32.8

5

DPPC,膽固醇和DDAB一系列磷酸鹽陽離子脂質體的製備中使用的表2。重量緩衝液( PBS)。

DPPC(毫克)

膽固醇(毫克)

DDAB(毫克)

DDAB(摩爾%)

PBS(ML)

17

2

1

5.6

5

16

2

2

11.8

5

15

2

3

18.6

5

14

2

4

26.1

5

13

2

5

34.6

5

在氯仿中溶解並混合血脂(DPPG溶解在氯仿/甲醇(2:1 V / V)的混合物),由旋轉蒸發除去溶劑,在60 ° C至取得一個薄的脂質膜。適當體積的磷酸鹽緩衝液(預熱在60 ° C)和船隻的大力旋轉混合器激動 multilamellar囊泡(MLV更具)。然後洗澡的MLV更具超聲在60 ° C 15分鐘產生 unilamellar的脂質體。超聲後,脂質體樣品孵育15分鐘,讓他們在60 ° C退火。

脂質體的表徵

所有的大小和zeta電位測量在納米激光粒度儀ZS在25 ° C漿紗測量了整齊的脂質體樣本,而樣本用PBS稀釋 1 10 zeta電位測量。納米 ZS採用非侵入性的反向散射(NIBS™)光學測量大小。探測角度173 °,使集中,混濁樣品的尺寸測量。然而,從樣品檢測過程中Zeta電位測量的散射光,在12 °的前進角度。因此激光束需要穿透樣品,作為一個後果,zeta電位測量樣品濃度必須低於用於調整。

結果

陰離子脂質體

粒子的大小和zeta電位測量的各種陰離子脂質體的結果總結於表3。此表顯示的Z -平均直徑(散射光的強度為基礎的平均直徑),多分散指數(分佈寬度估計),平均zeta電位值獲得各種脂質體樣品。 Z -平均直徑值是3重複上整齊的脂質體樣品的測量結果(括號內為標準差)的手段。 Zeta電位值是5(1 10),用PBS稀釋樣品的重複測量(括號內為標準差)的手段。

表3。Z -平均水平,在納米的直徑,多分散指數值和Zeta在PBS中準備的各種陰離子脂質體MV的潛力。重複測量的標準偏差值顯示在括號中。

鼴鼠%DPPG

Z - AV直徑在納米(SD)

分子量分佈(SD)

Zeta電位毫伏(SD)

5.2

133.8(0.4)

0.292(0.01)

-9.0(0.64)

10.9

92.3(0.49)

0.269(0.01)

-15.7(1.36)

17.4

107.2(0.20)

0.256(0.01)

-22.5(0.95)

24.6

125.1(0.60)

0.261(0.01)

-27.3(1.29)

32.8

八十九點二(1.39)

0.264(0.01)

-31.4(0.98)

上漿這些陰​​離子脂質體的準備工作取得的成果表明,準備洗澡超聲方法提供類似規模的手段和分佈寬度。

Zeta電位和大小值繪在圖 1摩爾%DPPG功能。數據顯示,測量每個脂質體樣品的重複和預期的趨勢越來越負面被控增加DPPG內容。此外,結果表明,大小是獨立的脂質體組成。

圖1。Zeta電位和大小值獲得的痣%DPPG一系列陰離子脂質體的內容的函數。

陽離子脂質體

表4總結了大小和zeta電位陽離子脂質體系列取得的成果。同樣大小的分佈相比,陰離子脂質體的準備。圖 2顯示了Zeta電位和獲得的摩爾%DDAB的功能,並顯示在逐漸增加,正電荷脂質體增加DDAB內容的大小的情節。

表4。Z -平均水平,在納米的直徑,多分散指數值和各種陽離子脂質體的zeta在mV潛力PBS編制。重複測量的標準偏差值顯示在括號中。

鼴鼠%DDAB

Z - AV直徑在納米(SD)

分子量分佈(SD)

Zeta電位毫伏(SD)

5.6

116.6(1.0)

0.258(0.01)

10.3(0.88)

11.8

95.8(0.36)

0.223(0.01)

20.1(1.36)

18.6

120.3(0.40)

0.266(0.01)

25.9(0.52)

26.1

109.0(1.15)

0.270(0.01)

33.1(2.2)

34.6

一零四點零(0.42)

0.251(0.01)

39.5(1.2)

圖2。Zeta電位和大小值作為一個功能的痣%DDAB內容取得了一系列陽離子脂質體

結論

脂質體的物理特徵,了解他們是否適合的應用範圍具有重要意義。一個脂質體的製備 zeta電位的知識可以幫助預測在體內的脂質體的命運。協會與帶相反電荷的分子收取的脂質體可以監測測量 zeta電位,由此產生的複雜。

納米激光粒度儀系列產品可作為本應用筆記詳細的脂質體的大小和Zeta潛力的快速和可重複的特性。

注:完整的參考文獻列表中可以找到源文件。

來源:“尺寸和澤塔納米的激光粒度儀的陰離子和陽離子脂質體的潛在表徵”,由馬爾文儀器中的應用注意。

對於這個源的更多信息, 請訪問馬爾文儀器有限公司(英國)或馬爾文儀器(美國 )。

Date Added: May 6, 2005

Last Update: 9. October 2011 12:21

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