脂質體描述特性包括負離子和負離子脂質體的範圍和 Zeta 潛在的描述特性使用 Zetasizer 的納諾從 Malvern 儀器

包括的事宜

背景
     影響靜脈內被注射的脂質體命運的屬性
     脂質體評定的 Zeta 潛在
實驗
     脂質體準備
     脂質體描述特性
結果
     負離子脂質體
     負離子脂質體
結論

背景

脂質體是泡組成由油脂分子 bilayer 放入一個含水數量的。 他們最初使用作為模型系統學習膜屬性例如滲透性。 最近應用集中他們的使用作為藥物運載工具由於合併在他們的含水數量的溶於水材料或在油脂 bilayer 的可溶於油的材料的能力。 脂質體可以為特定應用設計通過油脂構成的表面的控制或修改由抗體或肽的結合。 例如,負離子脂質體用於基因治療應用由於他們的能力對複雜對脫氧核糖核酸。

影響靜脈內被注射的脂質體命運的屬性

一定數量的屬性取決於靜脈內被注射的脂質體命運。 二最重要是顆粒大小和 Zeta 潛在。 這兩個參數在儀器的 Zetasizer 納諾範圍可以被評定。 使用動態光散射,顆粒大小被評定 (DLS)。 此技術評定發生在強度的非定常波動分散的光,因為微粒進行布朗運動。 對這些強度波動的分析啟用微粒的擴散率的確定被轉換成大小分佈。

脂質體評定的 Zeta 潛在

微粒的 Zeta 潛在是這個微粒在一個特殊媒體獲取的整體充電。 脂質體準備的 Zeta 潛在的知識可能幫助預測脂質體的命運體內。 範例 Zeta 潛在的評定在納諾的 Zetasizer 的完成使用 velocimetry 激光多譜勒儀的技術。 在此技術,電壓在一個對是應用的電極間在包含微粒散射的細胞的任一個末端。 荷電粒子被吸引到相反被充電的電極,并且他們的速度用部件場強被評定并且表示作為他們的電泳流動性。 關於這些技術的詳細信息可以在其他應用和技術聲明找到關於 Malvern 儀器網站。

此應用註解總結在負離子和負離子脂質體做的範圍和 Zeta 潛在的評定。

實驗

脂質體準備

脂質體用聲處理方法準備。 一系列的負離子脂質體從多種混合物 dipalmitoylphosphatidylcholine 準備 (DPPC),并且在磷酸緩衝鹽的 dipalmitoylphosphatidylglycerol (PBS) 詳情參見表 1. 負離子脂質體從 DPPC、膽固醇和負離子表面活化劑二甲基 dioctadecylammonium 溴化物準備 (DDAB)如被總結在表 2. 在所有的情況下脂質體的最終濃度 4mg lipid/ml PBS。

用於一系列的負離子脂質體的準備和 DPPG 的 1. 重量 DPPC 在磷酸緩衝鹽的 (PBS)

DPPC (mg)

DPPG (mg)

DPPG (痣 %)

PBS (ml)

19

1

5.2

5

18

2

10.9

5

17

3

17.4

5

16

4

24.6

5

15

5

32.8

5

用於一系列的負離子脂質體的準備和 DDAB 的 2. 重量 DPPC、膽固醇在磷酸緩衝鹽的 (PBS)。

DPPC (mg)

膽固醇 (mg)

DDAB (mg)

DDAB (痣 %)

PBS (ml)

17

2

1

5.6

5

16

2

2

11.8

5

15

2

3

18.6

5

14

2

4

26.1

5

13

2

5

34.6

5

油脂在三氯甲烷被溶化了并且混合 (DPPG 在混合物被溶化了三氯甲烷/甲醇 (2:1 v/v)) 并且轉臺式蒸發去除的溶劑在 60°C 得到一部稀薄的油脂影片。 適當的數量的磷酸緩衝鹽 (預先加熱在 60°C) 被添加,并且船在一臺轉臺式攪拌機有力地被鼓動生產 multilamellar 泡 (MLVs)。 MLVs 是然後浴被聲波處理在 60°C 15 分鐘生產 unilamellar 脂質體。 在聲處理以後,脂質體範例被孵化在 60°C 15 分鐘給他們鍛煉。

脂質體描述特性

所有大小和 Zeta 潛在的評定在 25°C. 大小評定的納諾 ZS 在整潔的脂質體範例做的 Zetasizer 做,而範例用 Zeta 潛在評定的 PBS 稀釋了 1 在 10。 納諾 ZS 合併估量的評定的非侵入性的背景散射的 (NIBS™) 光學。 173°enables 將做的集中的,混濁範例的範圍評定檢測角度。 然而,從範例檢測的分散的光在 Zeta 潛在的評定期間做在 12° 轉接角度。 所以激光需要擊穿這個範例和結果, Zeta 潛在的評定的範例濃度低於那一定估量的。

結果

負離子脂質體

微粒大小的結果和多種負離子脂質體的 Zeta 潛在的評定在表 3. 被總結。 此表顯示 z 平均直徑 (平均直徑根據強度分散的光),多分散性索引 (配電器的寬度的估計) 和為多種脂質體範例得到的平均 Zeta 潛在的值。 z 平均直徑值是在整潔的脂質體範例 (在托架的標準偏差) 做的方法 3 個重複評定。 Zeta 潛在的值是在被稀釋的範例 (在托架的標準偏差) 做的方法 5 個重複評定 (1 在 10 與 PBS)。

表 3。 在 nm、多分散性給定值和 Zeta 潛在的 z 平均直徑在 mV 多種負離子脂質體在 PBS 準備。 從重複評定的標準偏差值在托架顯示。

痣 % DPPG

z Av Dia 在 nm (SD)

多分散性 (SD)

Zeta 潛在 mV (SD)

5.2

133.8 (0.4)

0.292 (0.01)

-9.0 (0.64)

10.9

92.3 (0.49)

0.269 (0.01)

-15.7 (1.36)

17.4

107.2 (0.20)

0.256 (0.01)

-22.5 (0.95)

24.6

125.1 (0.60)

0.261 (0.01)

-27.3 (1.29)

32.8

89.2 (1.39)

0.264 (0.01)

-31.4 (0.98)

為這些負離子脂質體準備顯示得到的大小結果準備浴聲處理方法產生相似的範圍平均值和配電器寬度。

作為 mole% DPPG 功能, Zeta 潛在和範圍值在表 1 被密謀。 這個數據向顯示評定為每個脂質體範例是非常可重複的并且顯示期望的趨勢成為帶負電荷隨著 DPPG 目錄的增加。 另外,結果向顯示這個範圍是脂質體構成的獨立。

圖 1. Zeta 潛在和範圍值得到作為一系列的負離子脂質體的 mole% DPPG 目錄功能。

負離子脂質體

表 4 總結為負離子脂質體系列得到的大小和 Zeta 予想結果。 相似的大小分佈獲得了與負離子脂質體準備比較了。 當脂質體的 DDAB 目錄增加,圖 2 顯示 Zeta 潛在和範圍結果的劇情得到作為 mole% DDAB 功能并且顯示在正電荷的一個逐漸增量。

表 4。 在 nm、多分散性給定值和 Zeta 潛在的 z 平均直徑在 mV 多種負離子脂質體在 PBS 準備。 從重複評定的標準偏差值在托架顯示。

痣 % DDAB

z Av Dia 在 nm (SD)

多分散性 (SD)

Zeta 潛在 mV (SD)

5.6

116.6 (1.0)

0.258 (0.01)

10.3 (0.88)

11.8

95.8 (0.36)

0.223 (0.01)

20.1 (1.36)

18.6

120.3 (0.40)

0.266 (0.01)

25.9 (0.52)

26.1

109.0 (1.15)

0.270 (0.01)

33.1 (2.2)

34.6

104.0 (0.42)

0.251 (0.01)

39.5 (1.2)

圖 2. Zeta 潛在和範圍值得到作為一系列的負離子脂質體的 mole% DDAB 目錄功能

結論

脂質體的實際描述特性是在瞭解他們的適合的重要性的應用範圍。 脂質體準備的 Zeta 潛在的知識可能幫助預測脂質體的命運體內。 被充電的脂質體的關聯與相反被充電的分子的可以通過評定發生的複雜的 Zeta 潛在監控。

Zetasizer 納諾串聯啟用範圍和脂質體 Zeta 潛在的迅速和可重複的描述特性詳情參見此應用註解。

注意: 參考一個完整的目錄可以通過是指源文檔找到。

來源: 「範圍和負離子和負離子脂質體的 Zeta 潛在的描述特性在 Zetasizer 的納諾」,應用註解由 Malvern 儀器。

關於此來源的更多信息请請參觀 Malvern 有限公司 (英國) 儀器Malvern 儀器 (美國)

Date Added: May 6, 2005 | Updated: Jun 11, 2013

Last Update: 13. June 2013 01:16

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